江苏省教育厅自然科学基金(06KJD1801)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：南京晓庄学院南京农业大学华中农业大学更多>>
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- 检测硫酸雌酮间接ELISA方法的建立
- 2009年
- 目的:建立酶联免疫吸附法(ELISA)以检硫酸雌酮的含量.方法:首先合成硫酸雌酮-BSA,然后将其作为包被抗原,建立检测硫酸雌酮的间接ELISA法.结果:建立了检测硫酸雌酮的标准曲线y=9E-5X+0.0998,该ELISA法灵敏度为0.69 ng.mL-1,批内和批间变异系数分别为8.8%和10.3%,与孕酮、炔雌醇、睾酮的交叉反应不明显.结论:初步建立了定量测定硫酸雌酮含量的间接酶联免疫吸附试验方法(ELISA).
- 杨剑波吴向华周红霞林兴凤张红琳
- 关键词：ELISA
- 抑制素基因免疫多克隆抗体制备被引量：3
- 2009年
- 为制备成本低廉、效价高的抗抑制素抗体，将6只2．5—3kg的健康大白兔分为3组（n=2），分别皮下多点注射100μg纯化的抑制素质粒pCISI（T1、T22组）或100μg生理盐水（S对照组），T1组加强免疫1次，而T2组加强免疫2次，每隔10d采血1次，用辛酸-硫酸铵法纯化抗血清；用ELISA法检测血清中抗抑制素抗体水平，以P／N值〉2判为阳性。ELISA检测结果表明，T1、T2组血清中均检测到抗抑制素抗体，效价为1：6400。研究结果表明，抑制素质粒pCISI免疫大白兔可产生较高效价的抗抑制素抗体，且只须加强免疫1次。
- 张红琳周梅仙茆达干董清华杨利国
- 关键词：免疫多克隆抗体
- 抑制素质粒的提取与纯化研究
- 2009年
- [目的]为抑制素质粒的大量提取与纯化寻找一种成本低的方法。[方法]采用碱裂解法与DEAE-纤维柱层析法提取与纯化抑制素质粒DNA,用分光光度法测定其浓度和纯度。[结果]抑制素质粒DNA的等电点为2.0～2.5,低于大部分蛋白质。pH值为8.0时,抑制素质粒DNA带负电荷,且电荷数量与RNA和蛋白质不同。用紫外分光光度计测定的柱层析后洗脱峰1、2、3在260和280 nm波长处的吸光度值分别为3.01和2.9、0.95和0.51、0.84和0.76,其OD260 nm/OD280 nm分别为1.04、1.86和1.10。3 mol/LNaCl的洗脱峰1大部分是蛋白质,0.6 mol/LNaCl的洗脱峰2是浓度为93.0 ng/ml的抑制素质粒DNA,3 mol/LNaCl的洗脱峰3是杂质。[结论]利用碱裂解法能从大肠杆菌细胞中分离出抑制素质粒DNA,DEAE-纤维柱层析法纯化的抑制素质粒DNA达到了要求的纯度。
- 杨维石国庆夏洁张红琳
- 关键词：质粒纯化碱裂解法
- 抑制素质粒(pCISI)DNA卵黄抗体的制备被引量：1
- 2010年
- 张红琳周红霞周业飞茆达干
- 关键词：卵黄抗体抑制素ELISA
