北京市教育委员会科技发展计划(02KJ090)
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
- 相关作者：瓦龙美韩小强杜心欣吴娟更多>>
- 相关机构：首都医科大学航空工业中心医院更多>>
- 发文基金：北京市教育委员会科技发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠卵黄囊间充质干细胞培养及诱导成血管内皮细胞被引量：1
- 2007年
- 目的:成体间充质干细胞发育分化接近终末状态后经过一段时间的体外培养,易衰老凋亡,而来自于早期胚胎的卵黄囊间充质干细胞具有更大的增殖潜能和可塑性。那么体外分离培养的小鼠卵黄囊间充质干细胞能否定向诱导分化为血管内皮细胞呢?方法:实验于2006-03/2007-01在首都医科大学组织学与胚胎学实验室完成。①实验方法:显微分离妊娠10d的ICR小鼠胚胎卵黄囊,经Ⅰ型胶原酶消化得到卵黄囊细胞,取贴壁细胞培养,于接近90%融合时按1∶2进行传代。②实验评估:取生长状态良好的第1代细胞,透射电镜观察细胞器超微结构,流式细胞仪检测其表面标志的表达;以血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子进行体外诱导,观察诱导后细胞形态及超微结构变化,免疫荧光法鉴定诱导后内皮细胞标志物的表达。结果:①体外分离培养可获得小鼠卵黄囊间充质干细胞,大多数呈梭形。透射电镜下卵黄囊间充质干细胞表面有微绒毛,胞浆中细胞器丰富,核大,形态不规则。流式细胞仪检测第1代卵黄囊间充质干细胞CD44、CD105均呈阳性,CD34亦有少量表达。②诱导后的细胞形态明显改变,透射电镜下可见内皮细胞特征性Weible-Palade小体,胞质中有大量吞饮小泡,同时内皮细胞标志物FLK1染色呈阳性。结论:体外可分离培养出小鼠卵黄囊间充质干细胞,并能够成功定向诱导分化为血管内皮细胞。
- 韩小强瓦龙美
- 关键词：卵黄囊间充质干细胞内皮细胞
- 小鼠胚胎卵黄囊与成体间充质干细胞的比较:生物学特性相似吗?
- 2009年
- 背景:与成体间充质干细胞相比,来源于早期胚胎的卵黄囊间充质干细胞有更强的自我更新能力和可塑性,且在胚胎发育过程中可分化为成血管细胞和造血干细胞,启动胚胎血管发生和造血组织发育。目的:探讨小鼠卵黄囊间充质干细胞的生物学特征。设计、时间及地点:重复测量设计,细胞学体外观察,于2006-03/2007-01在首都医科大学组织学与胚胎学实验室完成。材料:妊娠10d的ICR小鼠80只,由首都医科大学动物部提供。方法:显微分离ICR小鼠胚胎卵黄囊,经Ⅰ型胶原酶消化得到卵黄囊细胞,取贴壁细胞培养,于接近90%融合时按1∶2进行传代。取生长状态良好的第1代细胞,以地塞米松、胰岛素定向诱导卵黄囊间充质干细胞向脂肪细胞方向分化;以血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子体外诱导其向血管内皮细胞方向分化。主要观察指标:相差显微镜下观察卵黄囊间充质干细胞形态;流式细胞仪检测卵黄囊间充质干细胞表面标志和细胞周期;钙钴法测定卵黄囊间充质干细胞碱性磷酸酶活性;细胞组织化学检测卵黄囊间充质干细胞化学变化;油红O检测诱导成脂能力;免疫荧光法鉴定诱导成血管内皮细胞能力。结果:体外培养获得的小鼠卵黄囊间充质干细胞大多数呈梭形;原代和第1代细胞均为CD44,CD105阳性,CD34也有少量表达;67.4%细胞处于G0/G1期,13.9%细胞处于S期;P1代细胞碱性磷酸酶染色及苏丹黑B反应呈阴性,PAS染色呈阳性;成脂诱导1周后,胞浆中有脂滴形成,经油红O染色脂滴为鲜红色;成血管内皮细胞诱导后,细胞由原来梭形或多角形渐变为圆形或椭圆形,且内皮细胞标志物FLK1染色呈阳性。结论:小鼠卵黄囊间充质干细胞的生物学特征与成体间充质干细胞相似。
- 韩小强瓦龙美
- 关键词：卵黄囊间充质干细胞流式细胞术分化
- 小鼠卵黄囊间充质干细胞的培养及鉴别
- 2008年
- 目的研究小鼠卵黄囊间充质干细胞(YS-MSCs)的分离、培养和鉴定。方法显微分离妊娠10d的小鼠胚胎卵黄囊,经0.1%的Ⅰ型胶原酶消化1h得到卵黄囊细胞,取贴壁细胞培养,并于接近汇合时进行传代培养,透射电镜下观察YS-MSCs的超微结构;流式细胞仪检测YS-MSCs表面标志;钙钴法测定YS-MSCs碱性磷酸酶(AKP)活性;细胞组织化学检测YS-MSCs化学变化;地塞米松、胰岛素定向诱导YS-MSCs分化为脂肪细胞,油红O检测中性脂肪。结果体外可获得YS-MSCs,细胞大多数呈梭形;透射电镜下YS-MSCs表面有微绒毛,胞浆中有丰富的线粒体、粗面内质网、高尔基复合体;核大,形态不规则;流式细胞术分析YS-MSCs免疫表型显示,原代和第1代YS-MSCs均为CD44、CD105阳性,CD34也有少量表达;细胞化学YS-MSCs PAS-过碘酸雪夫染色阳性,苏丹黑-B(SB)及碱性磷酸酶(AKP)染色阴性;YS-MSCs经成脂诱导后,胞浆中有脂滴形成,经油红O染色脂滴呈鲜红色。结论小鼠YS-MSCs的生物学特性与成体间充质干细胞相似,且更为原始,提示其可作为组织工程的种子细胞来源。
- 韩小强瓦龙美
- 关键词：卵黄囊间充质干细胞超微结构流式细胞术组织化学小鼠
- 天然生物材料在皮肤组织工程中的应用被引量：6
- 2006年
- 作为组织再生的支架,生物材料在组织工程中有诱导组织再生、调节细胞生长和功能分化的重要作用。本文就几种的天然生物材料在皮肤组织工程中的研究和应用作一综述。
- 杜心欣瓦龙美
- 关键词：皮肤
- 表皮干细胞的研究现况
- 2004年
- 吴娟瓦龙美
- 关键词：干细胞表皮干细胞分化细胞增殖
