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血清双向凝胶电泳体系的建立: 2006年; 目的:建立血清双向凝胶电泳(two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE)技术体系。方法:用Proteoprep blue albumin depletion kit将血清中高峰度蛋白去除。预冷丙酮沉淀蛋白质后,加入样品溶解液充分溶解,进行等电聚焦电泳(isoelectric focusing,IEF)和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel elecrophoresis,SDS-PAGE),行硝酸银染色后,运用ImageMaster软件行初步分析。结果:通过调整,优化2-DE技术条件,建立了稳定的2-DE技术。结论:建立了相对稳定的人血清蛋白质2-DE技术,其稳定性、重复性好,为开展疾病蛋白质组学的研究奠定了基础。; 李焕敏邵明周细武吴卓华; 关键词：双向凝胶电泳血清蛋白质组学

蛋白酶抑制剂Lactacystin建立帕金森病大鼠模型的胶质细胞反应: 2010年; 目的：探讨蛋白酶抑制剂造成的蛋白酶功能损伤的帕金森病（PD）动物模型黑质区胶质细胞的病理特点.方法：将SD大鼠随机分成3组：Lactacystin组、生理盐水组及正常对照组.使用立体定向注射方法向黑质区注射Lactacystin制作PD大鼠单侧模型.采用免疫组化方法观察大鼠黑质区酪氨酸羟化酶（TH）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、植物凝集素（BSI-B4）免疫阳性细胞并对其进行细胞计数及灰度分析,对黑质区的多巴胺神经元、星形胶质细胞及小胶质细胞进行分析.结果：模型组病变侧黑质区TH阳性细胞较正常组和生理盐水组明显减少（P〈0.05）,胞浆染色浅.GFAP免疫组化染色模型组灰度值较正常组及生理盐水组降低（P〈0.05）.BSI-B4免疫组化染色模型组阳性细胞均数较正常组和生理盐水明显增加（P〈0.05）;模型组灰度值较正常组及生理盐水组低（P〈0.05）.结论：泛素蛋白酶抑制剂lactacystin可导致多巴胺能神经元变性死亡,并可导致黑质区小胶质细胞增生活化与星形胶质细胞的活化.; 邵明陈楚霜肖蕾孙卫文; 关键词：帕金森病泛素蛋白酶体系统 LACTACYSTIN 小胶质细胞星型胶质细胞

帕金森病患者脑脊液蛋白质组学的研究被引量：1: 2011年; 目的:通过脑脊液蛋白质组学实验技术体系,筛选并鉴定帕金森病患者脑脊液特异蛋白,初步探讨帕金森病的发病机制。方法:选自广州医学院第一附属医院神经内科与脑深部电刺激术(deep brainstimulation,DBS)治疗中心帕金森病患者和对照组脑脊液为研究对象,进行双向凝胶电泳,经银染、图像分析寻找差异蛋白质,并进行质谱分析鉴定。结果:鉴定得到4种差异蛋白质,分别是CENP-E、Tetranectin非钙离子C型凝集素样结构域、假想蛋白FLJ38159和KIAA1640。帕金森病组中KIAA1640蛋白含量占总蛋白含量的比例(0.09±0.05)%高于对照组(0.03±0.00)%,CENP-E(0.04±0.02)%、Tetranectin非钙离子C型凝集素样结构域(0.04±0.02)%、假想蛋白FLJ38159(0.11±0.06)%蛋白含量均低于对照组[(0.08±0.01)%,(0.07±0.02)%,(0.17±0.04)%],P<0.05。结论:本研究鉴定出4种差异蛋白,这些蛋白可能参与帕金森病的发病,但具体机制及其在帕金森病发病中的作用有待进一步研究。; 李焕敏邵明吴卓华谭红愉周细武孔天翰; 关键词：帕金森病脑脊液蛋白质组学双向凝胶电泳

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广东省科技计划工业攻关项目(2004B338010114)