教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-04-0303)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 相关作者:王琳杜博苏学今苗兰芳朱喆更多>>
- 相关机构:吉林大学第四军医大学第一附属医院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”教育部“优秀青年教师资助计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 可诱导表达的白细胞介素12基因治疗小鼠原位移植性肝癌
- 2010年
- 目的 评估RU486系统诱导表达的白细胞介素12(IL-12)基因对小鼠原位移植性肝癌的治疗效果.方法 小鼠肝脏接种H22肝癌细胞,制备原位移植性肝癌模型.采用水流动力学注射法,将含有RU486调控系统的小鼠IL-12表达质粒pRS22注射到小鼠体内,腹腔注射RU486(250μg/kg)诱导质粒表达,检测血清中IL-12、干扰素γ(IFN-γ)和一氧化氮(NO)的表达水平.采用HE染色和免疫组织化学方法检测瘤细胞增殖活性和肿瘤血管生成情况.结果 注射生理盐水+RU486组、pRS-LacZ+RU486组、pRS22+芝麻油组和pRS22+RU486组小鼠肝脏肿瘤体积分别为(409.90±137.03)mm^3、(271.80±182.63)mm^3、(251.00±76.55)mm^3和(46.48±47.19)mm^3,肿瘤细胞增殖细胞核抗原(PCNA)阳性率分别为(82.10±4.62)%、(83.45±2.34)%、(77.46±2.99)%和(50.67±8.09)%,肿瘤组织微血管密度分别为(74.58±18.47)个/400倍视野、(63.60±13.36)个/400倍视野、(53.52±11.74)个/400倍视野和(25.38±10.87)个/400倍视野.与注射生理盐水+RU486组、pRS-LacZ+RU486组和pRS22+芝麻油组相比,pRS22+RU486组小鼠生存期明显延长(接种瘤细胞后第50天仍然有1只小鼠存活),血清中IL-12、IFN-γ和NO的表达水平分别为(11.52±7.46)ng/ml、(2.68±0.32)ng/ml和(5.10±3.27)μmol/L.结论 RU486系统能有效地调控IL-12基因的表达,可诱导的IL-12能够有效地抑制小鼠原位移植性肝癌的生长,延长小鼠的生存期.
- 李艳茹张海英金珍婧李玉林王琳
- 关键词:白细胞介素12RU486基因疗法小鼠
- 含有RU486诱导系统的IL-2基因表达质粒的构建及功能鉴定被引量:1
- 2010年
- 目的:构建含有RU486诱导系统的小鼠白细胞介素2(IL-2)基因表达质粒,研究RU486系统对IL-2基因表达的调控作用。方法:用限制性内切酶ClaⅠ处理含有RU486诱导系统的质粒pRS17和编码IL-2基因的质粒pUC57-IL-2,将IL-2基因插入到pRS17构建pRS-IL-2;通过PCR及限制性酶切鉴定重组质粒;将重组质粒体外转染SMMC-7721细胞,用不同浓度的RU486进行处理;将重组质粒通过水流动力学注射法注射到小鼠体内,腹腔注射RU486进行诱导;通过ELISA方法检测细胞上清及血清中IL-2基因的表达。结果:重组质粒pRS-IL-2经过限制性内切酶消化及PCR分析,显示了预期的片段。细胞在1×10-8mol·L-1的RU486诱导下,IL-2表达水平最高,是无RU486组的1.95倍(P<0.001)。注射质粒后,接受RU486诱导的小鼠血清中IL-2水平较诱导前升高320倍,而未接受RU486的小鼠血清未检测到IL-2的表达。结论:成功构建了含有RU486诱导系统的IL-2基因表达质粒,IL-2基因的表达依赖于诱导剂RU486的存在。
- 杜博苗兰芳苏学今朱喆王琳
- 关键词:白细胞介素2基因调节