广西农业科学院科技发展基金(2013JQ05)
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
- 相关作者:王丛丛唐荣华钟瑞春蒋菁韩柱强更多>>
- 相关机构:广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室仲恺农业工程学院广西农业科学院更多>>
- 发文基金:广西农业科学院科技发展基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证被引量:4
- 2013年
- 【目的】探讨花生不同组织部位RNA提取方法,为开展花生分子生物学研究奠定基础。【方法】在CTAB法的基础上,设计一种改良的mCTAB-dLiCl法,其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖,使用两次10.0 mol/L的LiCl沉淀RNA,采用琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,核酸蛋白分析仪测定RNA纯度,并通过逆转录、RT-PCR和cDNA-SCoT验证其质量。【结果】采用mCTAB-dLiCl法的RNA产率为554.80μg/g,RNA的A260/A280比率为1.89,RNA非变性琼脂糖凝胶电泳未出现可见的DNA条带;扩增的28S和18S条带比值为2∶1,且条带清晰无拖尾现象;提取的RNA通过逆转录、RT-PCR扩增和cDNA-SCoT扩增验证,均获得较好的扩增效果,获得的RNA和cDNA质量好。【结论】mCTAB-dLiCl RNA提取方法是一种高效提取花生各组织部位RNA的方法,可在花生分子生物学研究中应用。
- 熊发前刘俊仙王丛丛贺梁琼韩柱强蒋菁钟瑞春李忠唐秀梅唐荣华
- 关键词:花生RNA提取