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油茶总RNA的提取与内参基因的初选被引量：9: 2014年; 为得到高质量的油茶总RNA及稳定的内参基因,以油茶良种‘华硕’为试验材料,采用ambion试剂盒结合CTAB法进行总RNA提取。获得的总RNA完整性好,纯度高;从前期构建的油茶转录组数据中选取ACT(肌动蛋白基因)等14个基因作为候选内参基因,共设计22对引物,通过RT-PCR反应体系的优化及琼脂糖凝胶电泳检测,快速筛选出了适合油茶不同组织(器官)的内参基因。ALB(清蛋白基因),EF1α(延伸因子基因),ETIF3H(启动因子基因),UBC2(泛素结合酶基因)可以作为油茶果实初选内参基因,EF1α可以作为油茶根、茎、花及果实内参基因,ETIF3H可以作为油茶根、茎、叶、花瓣的内参基因。; 宋志波刘敏贾宝光田雷曾艳玲周俊琴谭晓风张琳; 关键词：油茶 RNA提取内参基因逆转录PCR

油桐β-酮脂酰-ACP合酶Ⅲ基因克隆及序列分析被引量：4: 2013年; β-酮脂酰-ACP合酶——KAS是脂肪酸合成中的一种缩合酶,主要是在缩合反应中起作用。研究以近成熟的油桐种子为材料,根据GenBank中蓖麻等已知的β-酮脂酰-ACP合酶基因KASⅢ的序列设计简并引物,利用PCR、RACE等技术克隆得到了油桐KASⅢ基因的全长cDNA序列。该基因序列全长1 901 bp,开放阅读框为1 209 bp,编码403个氨基酸,通过与其他物种的KASⅢ氨基酸序列比对,油桐KASⅢ基因与麻疯树的同源性最高,达90%。软件预测表明,KASⅢ蛋白等电点为5.78,存在跨膜结构域,整个蛋白质基本上是表现出亲水性的。将该基因命名为vf-kasⅢ。; 严方方谭晓风龙洪旭; 关键词：油桐基因克隆

油桐叶柄高效直接再生体系的建立被引量：7: 2014年; 以油桐无菌苗叶柄为外植体,研究植物生长调节剂对其离体培养及植株再生的影响。结果表明:叶柄直接诱导不定芽的最佳培养基1/2MS+3.0 mg·L-1 6-BA+0.05 mg·L-1 IAA,诱导率达91.67%;最佳继代增殖培养基1/2MS+3.0 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1 IBA+1.0 mg·L-1 GA3,增殖系数可达4.89;最佳生根培养基为1/2MS+0.05 mg·L-1 IBA,生根率96.18%。炼苗移栽到泥炭土:珍珠岩:黄土=2:1:1的基质中,成活率达93.55%以上。; 林青吴玲利张琳谭晓风龙洪旭李泽; 关键词：油桐叶柄植株再生

三年桐EST-SSR标记的开发与种质遗传多样性分析被引量：7: 2016年; 以三年桐品种对年桐发育中的种子为材料,构建c DNA文库,获得3202个原始EST序列,经过去除冗余和低质量序列后,获得1047条非冗余单一序列,利用MISA软件从其中的173个非冗余EST序列中搜索得到212个SSR位点。其中,二核苷酸重复类型为主导（68.39%）,其次是三核苷酸重复类型（25.94%）,其优势基元为AG/CT（43.87%）、AT/AT（19.34%）和AGC/GCT（5.66%）。针对可设计引物的68个序列进行EST-SSR引物设计,结合PCR扩增和数据分析,鉴定出14对多态性标记,用该14对引物对169份三年桐种质资源进行遗传多样性检测,共得到41个等位基因（Na）,平均每对引物扩增出2.93个等位基因,期望杂合度（He）变幅为0.08~0.63,平均值为0.33,多态性信息含量（PIC）变幅为0.08~0.56,平均值为0.3,表明14对EST-SSR标记多态性较高,能较好地反映三年桐种质的遗传多样性。三年桐种质资源按群体进行非加权配对算术平均法（UPGMA）聚类分析,群体间的相似度变幅为0.9604~0.9986,遗传距离变幅为0.0022~0.0404,表明三年桐群体间的遗传多样性相对较低,亲缘关系较近。对169份三年桐种质资源个体进行聚类分析,结果显示不同地理种源的遗传关系缺乏明显的地理结构。; 贾宝光林青谭晓风李泽龙洪旭向晖张琳; 关键词：三年桐 EST-SSR标记

枣ZjMADS1-box基因克隆与表达分析被引量：2: 2012年; 以‘金丝4号’枣花蕾和叶片为材料,通过抑制消减杂交文库(SSH文库)的构建、RACE技术和半定量RT-PCR等方法,克隆了枣花发育基因并研究了其时空表达模式,为枣花发育机理研究奠定基础。结果表明:(1)从枣花SSH文库中鉴定出476bp的花发育B类PISTILLATA(PI)基因的EST序列,命名为ZjMADS1-box;通过RACE技术获得了枣ZjMADS1-box基因的全长cDNA序列。(2)枣ZjMADS1-box基因表现出PI基因的序列结构特征。其全长cDNA长度为957bp,编码220个氨基酸残基;在氨基酸序列水平上,该基因与巨桉EgM2(Eu-calyptus grandis M2)和白千层MqPI(Melaleuca quinquenervia PI)的相似性最高为72.6%,与辣椒CaPI(Capsi-cum annuum PI)的相似性最低为61.8%;系统进化树分析显示,枣ZjMADS1-box与MqPI和EgM2基因聚在一起;枣ZjMADS1-box基因编码蛋白的等电点为9.75,分子量为25 587.5Da,属亲水性的非分泌性蛋白。(3)Zj-MADS1-box基因在花器官中特异表达,在嫩茎、成熟叶、腋芽等营养器官中不表达;在4月30日和5月8日花蕾中的表达量略高于5月4日、5月12日、5月16日的表达量,但差异不显著。; 段经华张琳李芳东杜红岩袁德义马履一; 关键词：快速扩增CDNA末端

4个油桐品种光合特性的日变化研究被引量：35: 2013年; 为了研究油桐光合效率的高低及不同品种之间光合特性的差异,筛选高光效的油桐品种,利用Li-6400便携式光合测定系统,测定了4个油桐品种光合指标的日变化。结果表明:(1)‘葡萄桐’、‘小米桐’、‘对年桐’的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)日变化均呈单峰曲线,‘大米桐’的Pn、Gs、Tr日变化呈双峰曲线;(2)4个品种的胞间CO2浓度(Ci)日变化呈不规则的"V"字型;(3)4个品种净光合速率日变化平均值大小排序为:‘葡萄桐’>‘小米桐’>‘对年桐’>‘大米桐’;(4)影响油桐净光合速率值的主要生态生理指标大小依次为:蒸腾速率>胞间CO2浓度>光合有效辐射>气孔导度。油桐具有较高的光合效率,不同品种之间的光合特性有所差异。; 李泽谭晓风袁军龙洪旭张琳周乃富; 关键词：油桐净光合速率光合特性蒸腾速率日变化

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国家林业局948项目(2012-4-42)