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排序方式：

嗜热吸水链霉菌cDNA文库构建及其抗原相关基因的表达被引量：3: 2012年; 目的构建嗜热吸水链霉菌cDNA文库并进行表达序列标签（EST）测序，从中筛选具有毒力作用的基因进行体外克隆并诱导表达。方法利用RNA转录5’末端转换技术构建致农民肺嗜热吸水链霉菌的eDNA文库，将平板内克隆进行编号，取前1020个克隆提取质粒，进行EST测序。用生物信息学方法分析EST测序结果并预测基因功能，从中筛选出可能引起人体免疫反应的毒力因子。将这些目的基因亚克隆人pET-28a载体，将重组子转化大肠杆菌BL21，用异丙基-β．D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导相应蛋白的表达。结果成功构建了较高质量的嗜热吸水链霉菌eDNA文库，得到有义序列978个，获得单-基因347个，其中2段基因分别与胸膜肺炎放线菌外膜蛋白、转铁蛋白B的同源性为51％和42％，其开放阅读框长度分别为1554bp和726bp，分别编码517和241个氨基酸。将2段基因亚克隆入原核表达载体中，IPTG诱导表达产物的相对分子质量分别为63000和30000。结论所构建的嗜热吸水链霉菌eDNA文库符合构建基因文库的质量要求，文库中的EST数据将有助于农民肺特异性毒力分子的进一步筛选。; 许蕾王玲玲刘朔凌媛马列王群张丽娇刘晓雨赵明静王笑歌; 关键词：农民肺基因文库抗原

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