国家自然科学基金(81371362) 作品数:16 被引量:58 H指数:4 相关作者: 王莹 李文媛 李智刚 孙平 张洋 更多>> 相关机构: 牡丹江医学院 宁夏医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 黑龙江省卫生厅科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
ChABC联合脂肪源性干细胞对大鼠脱细胞异体神经支架移植后功能恢复的影响 被引量:6 2013年 目的:探讨硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)与脂肪源性干细胞(Adipose-derived stem cell,ADSC)联合应用对脱细胞异体神经支架移植修复坐骨神经缺损后大鼠运动和感觉功能恢复的影响。方法:成年大鼠随机分为脱细胞坐骨神经(acellular rat sciatic nerve,ARSN)组、ChABC组、ADSC组、ChABC+ADSC组;应用坐骨神经功能指数(SFI)、电生理和胫前肌湿重比检测神经再生和运动功能的恢复;脊神经节HRP逆行标记及患侧足掌皮肤触觉小体HE染色检测感觉功能的恢复。结果:与ARSN组比较,ChABC组、ADSC组和ChABC+ADSC组SFI显著增高,神经传导速度显著增高,动作电位波幅增大,胫前肌湿重比率增高,HRP阳性标记感觉神经元和触觉小体的数量增高(P<0.05)。其中ChABC+ADSC组作用显著优于单独治疗组(P<0.05)。结论:ChABC联合ADSC移植对大鼠坐骨神经缺损脱细胞异体神经支架修复后运动和感觉功能恢复的作用优于单独治疗组。 王莹 李智刚 赵艳晶 冯克俭 李文媛 孙平 刘艳翠关键词:硫酸软骨素酶ABC 脂肪源性干细胞 黄芪皂甙Ⅳ联合ADSC对坐骨神经缺损后大鼠运动功能的修复作用 被引量:4 2013年 目的探讨黄芪皂甙Ⅳ联合脂肪源性干细胞(ADSC)对大鼠坐骨神经缺损后运动功能恢复的影响。方法将40只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组各10只,4组均采用化学萃取脱细胞方法制备大鼠缺损脱细胞神经支架(ARSN)。ARSN组注入等剂量DMEM于ARSN;黄芪皂甙Ⅳ组注入等剂量DMEM于ARSN,并于术前5 min及术后12、24 h腹腔注射黄芪皂甙Ⅳ(20 mg/kg);ADSC组注入等剂量ADSC(1×106/mL)于ARSN;黄芪皂甙Ⅳ+ADSC组同时采用黄芪皂甙Ⅳ组、ADSC组的方法。用各组的神经移植体桥接长1 cm坐骨神经两断端间的缺损造模,术后8周取材。检测各组坐骨神经功能指数(SFI)、神经电生理参数(神经传导速度、潜伏期、波幅)及胫前肌湿重比率。结果与ARSN组比较,黄芪皂甙Ⅳ组、ADSC组和黄芪皂甙Ⅳ+ADSC组术后各时点SFI增高,神经传导速度增快,潜伏期缩短,波幅增大,胫前肌湿重比率增高(P均<0.05);与黄芪皂甙Ⅳ组比较,黄芪皂甙Ⅳ+ADSC组术后56 d SFI增高,神经传导速度增快,潜伏期缩短,波幅增大,胫前肌湿重比率增高(P均<0.05)。结论黄芪皂甙Ⅳ联合ADSC移植能促进大鼠神经再生和运动功能恢复,其作用优于单独应用黄芪皂甙Ⅳ或ADSC。 王莹 李文媛 刘贵波 冯克俭 孙平 刘艳翠关键词:脂肪源性干细胞 神经再生 腺病毒KLF7对大鼠脊髓损伤TrkA及TrkB表达的影响 被引量:1 2017年 目的探讨腺病毒KLF7对大鼠脊髓半横断损伤后酪氨酸激酶A(Trk A)和酪氨酸激酶B(TrkB)表达、损伤灶形态及运动功能恢复的影响。方法制作大鼠脊髓半横断损伤模型,分别将腺病毒2(AAV2)、腺病毒2-KLF7(AAV2-KLF7)用微量注射器注射到脊髓损伤灶,实验大鼠随机分为正常组、AAV2对照组及AAV2-KLF7组。术后4周,通过HE染色观察脊髓损伤灶面积,Western Blot检测KLF7、TrkA和TrkB蛋白表达,BBB行为学评价运动功能恢复。结果与对照组比较,AAV2-KLF7组脊髓半离断损伤灶面积比显著缩小(P<0.05),KLF7、Trk A、Trk B蛋白相对表达显著增高(P<0.05)。AAV2-KLF7组BBB评分显著高于对照组(P<0.05)。结论 KLF7通过上调神经营养因子受体Trk A和Trk B表达,改善大鼠脊髓损伤灶形态,促进运动功能的恢复。 胡光亮 王子健 鲁一村 任禾 崔晓爽 王欣雨 王钰 李文媛 王莹关键词:酪氨酸激酶A 酪氨酸激酶B 下调HMGA1对乳腺癌MCF7细胞增殖和侵袭能力的影响及机制 被引量:4 2017年 目的观察下调高迁移率族蛋白A1(HMGA1)对乳腺癌MCF7细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其机制。方法选择人乳腺癌MCF7细胞,将其分为siRNA对照组、siRNA-HMGA1组、miR对照组和miR-24-3p组,分别转染siRNA对照慢病毒、siRNA-HMGA1慢病毒、miR对照慢病毒和miR-24-3p慢病毒。采用Western boltting法检测未转染MCF7、正常乳腺上皮细胞株(HMEC h TERT)及siRNA对照组、siRNA-HMGA1组细胞HMGA1蛋白,实时荧光定量PCR法检测miR对照组和miR-24-3p组细胞HMGA1、miR-142-3p mRNA,MTT法和Transwell法检测4组细胞增殖活力和侵袭能力,荧光素酶报告基因分析验证HMGA1与miR-142-3p靶向关系。结果 MCF7、HMEC h TERT细胞中HMGA1蛋白相对表达量分别为0.574±0.075、0.234±0.099,两者相比P<0.01。siRNA-HMGA1组、siRNA对照组HMGA1蛋白相对表达量分别为0.141±0.051、0.651±0.136,两组相比P<0.01。miR-142-3p组、miR对照组HMGA1 mRNA相对表达量分别为0.135±0.046、0.604±0.156,miR-142-3 mRNA相对表达量分别为1.128±0.174、0.263±0.116,两者相比P均<0.01。MCF7细胞中HMGA1 mRNA、miR-142-3p mRNA表达呈负相关(r=-0.259,P=0.021)。siRNA-HMGA1组、siRNA对照组细胞增殖活力分别为0.535±0.066、1.160±0.125,穿膜细胞数分别为(32.05±9.33)、(71.68±14.39)个,两者相比P均<0.01。miR-142-3p组、miR对照组细胞增殖活力分别为0.362±0.121、1.083±0.139,穿膜细胞数分别为(21.52±6.64)、(46.74±7.82)个,两组相比P均<0.01。miR-142-3p组、miR对照组野生型HMGA1 3'-UTR荧光素酶活性分别为0.668±0.074、1.000±0.000,两组相比P<0.01。结论下调HMGA1乳腺癌MCF7细胞增殖和侵袭能力增强,其机制可能与HMGA1可靶向反向调控miR-142-3p有关。 张洋 董理 孙源博 李文媛 王莹 孙平 于伟光关键词:高迁移率族蛋白A1 微小RNA 乳腺肿瘤 细胞侵袭 二氢睾酮联合脂肪源性干细胞对小鼠坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子及其受体TrkB表达的影响 2018年 目的探讨二氢睾酮(DHT)与脂肪源性干细胞(ADSC)联合应用对小鼠脱细胞同种异体神经支架移植坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体Trk B的表达和功能恢复的影响。方法 30只成年C57BL/6小鼠随机分为脱细胞神经支架(ANA)组、ADSC组和DHT+ADSC组。坐骨神经功能指数(SFI)、电生理和胫前肌湿重比方法检测神经运动功能的恢复,Western印迹检测神经移植体内BDNF及其受体Trk B的蛋白表达。NF200免疫荧光法检测神经支架中轴突表达,并示踪PKH26标记的移植ADSC。结果与ADSC组比较,DHT+ADSC组神经移植体内BDNF和Trk B蛋白相对表达明显增高,NF200表达增强,PKH-26标记的ADSC数量显著增高(P<0.05)。与ANA组比较,ADSC组和DHT+ADSC组电生理波幅明显增高、神经传导速度明显增快、延迟期明显缩短、胫前肌湿重比率明显增高,其中DHT+ADSC组神经恢复作用显著优于ADSC组(P<0.05),而且DHT+ADSC组SFI明显高于ANA组和ADSC组(P<0.05)。结论 DHT联合ADSC移植对小鼠脱细胞异体神经支架修复坐骨神经缺损后轴突再生和功能恢复的作用优于ADSC组,其机制可能与促进神经移植体内BDNF及其受体Trk B表达,进而促进移植的ADSC存活有关。 王莹 李文媛 尹国华 李智刚 金在顺 滕诚毅 孙平关键词:二氢睾酮 脂肪源性干细胞 Krüpple样转录因子在脑缺血损伤疾病中的作用 2018年 转录因子在脑缺血损伤疾病的病理生理学中发挥重要作用,近年来越来越多的转录因子和相关的基因信号网络被发现,并成为脑缺血损伤研究领域的焦点。KLFs因子是锌指转录因子家族的成员,在细胞生长、分化、增殖、迁移、凋亡、代谢和炎症等方面具有不同的调节功能。KLFs也大量的表达在脑组织中,调节神经发育和再生,维持脑的正常功能。KLFs的失调与各种神经紊乱疾病相关联。最近研究表明KLFs在脑缺血损伤疾病中发挥重要作用,可在脑供血不足时促进内源性血管生成,发挥神经保护作用。对Krüpple样转录因子在中枢神经损伤的研究进展,尤其是KLFs在脑缺血损伤疾病中的作用进行综述。 鲁一村 任禾 崔晓爽 王欣雨 王钰 李文媛 王莹关键词:中枢神经系统 脑缺血损伤 Transcriptional and Epigenetic Regulation in Injury-Mediated Neuronal Dendritic Plasticity 被引量:4 2017年 Injury to the nervous system induces localized damage in neural structures and neuronal death through the primary insult, as well as delayed atrophy and impaired plasticity of the delicate dendritic fields necessary for intemeuronal communication. Excitotoxicity and other sec- ondary biochemical events contribute to morphological changes in neurons following injury. Evidence suggests that various transcription factors are involved in the dendritic response to injury and potential therapies. Transcription factors play critical roles in the intracellular regulation of neuronal morphological plasticity and dendritic growth and patteming. Mounting evidence supports a crucial role for epigenetic modifications via histone deacetylases, histone acetyltransferases, and DNA methyltransferases that modify gene expression in neuronal injury and repair processes. Gene regulation through epigenetic modification is of great interest in neurotrauma research, and an early picture is beginning to emerge conceming how injury triggers intracellular events that modulate such responses. This review provides an overview of injury-mediated influences on transcriptional regulation through epigenefic modification, the intracellular processes involved in the morphological consequences of such changes, and potential approaches to the therapeutic manipulation of neuronal epigenetics for regulating gene expression to facilitate growth and signaling through dendritic arborization following injury. Ying Wang Wen-Yuan Li Zhi-Gang Li Li-Xin Guan Ling-Xiao Deng关键词:EPIGENETICS TRIM11靶向调控miR-24-3p促进乳腺癌细胞系MCF7增殖和侵袭 被引量:4 2018年 目的探讨TRIM11靶向调控miR-24-3p对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响,明确TRIM11高表达与乳腺癌预后的相关性。方法免疫组化法检测TRIM11在31例乳腺癌和31例癌旁正常组织中的表达。用siRNA TRIM11和miR-24-3p慢病毒转染人乳腺癌MCF7细胞,实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western bolt检测TRIM11、miR-24-3p mRNA和蛋白表达变化及相关性分析;荧光素酶报告实验验证miR-24-3p为TRIM11的潜在靶点;MTT法和Transwell检测细胞增殖数量、增殖活力和侵袭。结果 TRIM11在乳腺癌组织及MCF7细胞中表达显著增高(P<0.05)。TRIM11高表达患者生存率显著降低(P<0.05)。siRNA TRIM11转染显著抑制MCF7细胞中TRIM11表达,而且抑制MCF7细胞增殖数量、增殖活力和侵袭能力(P<0.05)。miR-24-3p显著降低野生型3'-UTR TRIM11荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型没有作用。miR-24-3p mRNA在MCF7细胞下调,miR-24-3p抑制MCF7细胞TRIM11蛋白和mRNA表达,miR-24-3p mRNA与TRIM11 mRNA在MCF7细胞中表达显著负相关(P<0.05),miR-24-3p抑制MCF7细胞增殖数量、增殖活力和侵袭能力(P<0.05)。结论 TRIM11在乳腺癌组织及MCF7细胞中表达上调,并可能通过靶向调控miR-24-3p促进乳腺癌细胞增殖和侵袭,进而影响乳腺癌预后,TRIM11/miR-24-3p轴有望成为治疗乳腺癌的新靶点。 张洋 张静 季琳 李文媛 王莹 孙平 于伟光关键词:乳腺癌 增殖 腺相关病毒介导KLF7对小鼠坐骨神经缺损后感觉功能的作用 被引量:1 2016年 [目的]探讨腺相关病毒2(AAV2)介导核转录因子KLF7对脱细胞异体神经支架(ANA)修复小鼠坐骨神经缺损后感觉轴突再生和感觉功能恢复的作用。[方法]成年C57BL/6小鼠随机分为正常组、ANA+AAV2对照组和ANA+AAV2-KLF组,术后4周RT-PCR和免疫荧光染色检测神经支架内KLF7 mRNA和蛋白表达,免疫荧光染色检测神经支架内NF和S100蛋白表达,霍乱毒素亚单位B结合荧光素TRITC(CTB-TRITC)逆行示踪L2~5脊髓背根神经节神经元(DRG)标记感觉轴突再生,Hargreaves法和电生理检测感觉功能的恢复。[结果]与对照组比较,ANA+AAV2-KLF组神经支架内KLF7mRNA和蛋白表达显著增高,NF和S100蛋白表达增加,CTB阳性标记DRG感觉神经元数量增加,Hargreaves热缩足反射潜伏期降低,电生理神经传导速度增加,潜伏时缩短,动作电位波幅增大(P〈0.05)。[结论]KLF7可促进小鼠坐骨神经缺损后感觉轴突再生和髓鞘形成,促进感觉功能的恢复。 王莹 李文媛 闫哲 杨春壮 李智刚 李凯军 赵微 任宝松 张洋关键词:感觉功能恢复 脊髓背根神经节 ChABC联合ADSC促进脱细胞同种异体神经支架移植后轴突再生的作用 被引量:4 2013年 [目的]探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)与脂肪源性干细胞(ADSC)联合应用对大鼠脱细胞同种异体神经支架移植后轴突再生的影响。[方法]36只成年大鼠随机分为脱细胞神经支架(ARSN)组、ChABC组、ADSC组、ChABC+ADSC组;坐骨神经功能指数(SFI)、电生理和胫前肌湿重比方法检测神经再生和运动功能的恢复;荧光显微镜观察神经移植体内PKH-26标记的ADSC;电镜检测神经移植体中有髓神经纤维数目、轴突直径和髓鞘厚度;免疫荧光法检测神经移植体中S100和GFAP蛋白表达。[结果]ChABC+ADSC组神经移植体内PKH-26标记的ADSC高于ADSC组(P<0.05)。与ARSN组比较,ChABC组、ADSC组和ChABC+ADSC组SFI增高,神经传导速度增高,潜伏时缩短,动作电位波幅增大,胫前肌湿重比率增高,有髓神经纤维数目、髓鞘厚度、轴突直径、S100和GFAP蛋白表达显著增加(P<0.05)。其中ChABC+ADSC组作用显著优于单独治疗组(P<0.05)。[结论]ChABC联合ADSC移植对大鼠脱细胞异体神经支架修复坐骨神经缺损后轴突再生的作用优于单独治疗组。 王莹 李文媛 张高坤 李智刚 冯克俭 贾桦关键词:硫酸软骨素酶ABC 脂肪源性干细胞 轴突再生