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S-烃基-1-烃基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲的合成及其iNOS抑制活性被引量：8: 2003年; 以 2 -巯基苯并咪唑 ( 1 )为原料 ,经缩合和还原得到 2 -( 4 -氨基苯硫基 )苯并咪唑 ( 3 ) ,再与异硫氰酸苯甲酰酯或异硫氰酸烃基酯反应得到取代硫脲 ( 5和 7) ,最后与卤代烃反应得到 2 0个新的 S-烃基 -1 -烃基 -3 -[4-(苯并咪唑 -2 -巯基 )苯基 ]异硫脲化合物 ( 6和 8) ,其结构经 IR,1H NMR,MS及元素分析确证 .初步的药理试验表明 ,2 0个目标化合物均有不同程度的 i NOS抑制活性 ,其中化合物 6b,8d和 8f的 i NOS抑制活性与阳性对照药氨基胍相当 .; 徐云根华维一朱东亚时煜封小琴; 关键词：INOS抑制剂败血性休克

诱生型一氧化氮合酶特异性抑制肽的制备: 2002年; 目的 :通过噬菌体展示技术筛选 i NOS特异性抑制肽。方法 :将 i NOS FAD结合区及其附近序列的基因片段装入 p ET-2 8a( + ) ,在大肠杆菌 BL2 1 中表达 ,His.Bind TM亲和层析柱纯化目的蛋白 ,使用纯化蛋白筛选Ph.D.-1 2 TM噬菌体库 ,筛选 i NOS活性抑制作用较高的噬菌体克隆 ,测序并合成其中具有一致序列的短肽。结果 :得到具有较高表达量的目的蛋白 ,经 His.Bind TM柱亲和层析纯化后纯度大于 95 % ,以纯化蛋白筛选 Ph.D.-1 2 TM噬菌体库 ,经 4轮筛选获得 1 0株 i NOS活性抑制作用较高的噬菌体克隆 ,测序发现其中 5株序列完全相同 ,合成该 1 2肽 ,初步研究表明其对 i NOS表现为高浓度抑制 ,低浓度兴奋的作用 ,而对 n NOS及 e NOS则没有影响。结论 :以 i NOSFAD片段蛋白为靶蛋白筛选得到的克隆对 i NOS活性具有特异性影响 ,可根据这些特征设计合成小分子前导药物。; 潘英朱敏生沈月许祥裕朱东亚朱有华; 关键词：噬菌体展示

诱生型一氧化氮合酶抗体的制备与初步应用被引量：4: 2001年; 目的制备诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)特异性抗体并应用于iNOS检测。方法将iNOSN端片段装入原核表达载体pET 2 8a(+) ,在大肠杆菌BL2 1中表达 ,两步法纯化目的蛋白 ,使用纯化蛋白制备iNOS多克隆抗体。获得的抗血清用于小鼠巨噬细胞及小鼠脑缺血模型中iNOS的检测。结果得到具有较高表达量的融合蛋白 ,经两步纯化获得iNOSN端融合蛋白纯品 ,将此蛋白免疫家兔 ,得到iNOS多克隆抗体 ,Westernblot分析表明该抗体不与nNOS、eNOS交叉反应 ,而能检测组织、细胞中的iNOS。; 许祥裕朱敏生潘英沈月朱东亚朱有华; 关键词：诱生型一氧化氮合酶重组蛋白特异性抗体

S-烃基-1-烃基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲的合成及生物活性被引量：2: 2004年; 以 2 巯基苯并噻唑 ( 1)为原料 ,经缩合和还原得到 2 ( 4 氨基苯硫基 )苯并噻唑 ( 3 ) ,再与异硫氰酸苯甲酰酯或异硫氰酸烃基酯反应得到取代硫脲 ( 5和 7) ,最后与卤代烃反应得到 2 0个新的S 烃基 1 烃基 3 [4 (苯并噻唑 2 巯基 )苯基 ]异硫脲化合物 ( 6和 8) ,其结构经IR ,1HNMR ,MS及元素分析确证 .初步的药理试验表明 ,2 0个目标化合物均有不同程度的iNOS抑制活性 ,化合物 8a ,8b ,8c ,8e ,8f ,8i,8j和 8k的iNOS抑制活性强于阳性对照药氨基胍 ,其中化合物 8j的iNOS抑制活性比氨基胍强 2; 徐云根华维一刘晓燕朱东亚; 关键词：生物活性

S-烃基1烃基-3-[4-(5-取代苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲的合成及生物活性被引量：3: 2004年; 以 5 甲氧基 (或氯 ) 2 巯基苯并咪唑 ( 1)为原料 ,经缩合和还原得到 5 甲氧基 (或氯 ) 2 ( 4 氨基苯硫基 )苯并咪唑 ( 3 ) ,再与异硫氰酸烃基酯反应得到取代硫脲 4,最后与卤代烃反应得到 12个新的S 烃基 1 烃基 3 [4 ( 5 甲氧基 (或氯 )苯并咪唑 2 巯基 )苯基 ]异硫脲化合物 5 .其结构经IR ,1 HNMR ,MS及元素分析确证 .初步的药理试验表明。; 徐云根罗穗华维一朱东亚; 关键词：INOS抑制剂炎症败血性休克

一氧化氮供体对成年大鼠脑缺血后海马神经元再生的影响被引量：1: 2004年; 目的　研究NO是否参与脑缺血后海马神经元再生。方法　血管内栓线法阻塞大脑中动脉 1.5h后再灌注 ,制备局灶脑缺血再灌性模型。脑缺血后 1h海马内输入 10 μLNO供体硝普钠 (0 .1mmol·L- 1)和维生素C(0 .4mmol·L- 1)。于脑缺血后 12 0h ,5 溴 2′ 脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)掺入法测定海马齿状回的细胞扩增。于再灌注后 2 4h测定海马诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)活性及NO水平。结果在再灌注后d 8缺血侧海马齿状回的BrdU阳性细胞数比对照侧多大约 5倍 ,硝普钠和维生素C海马内输入显著增加脑缺血诱发的海马齿状回神经细胞扩增。; 孙勇军王玮奚涛朱东亚; 关键词：一氧化氮一氧化氮合酶硝普钠脑缺血

诱生型一氧化氮合酶FAD结合区的克隆、表达和活性鉴定被引量：1: 2001年; 诱生型的一氧化氮合酶 (iNOS)的表达可以被多种细胞因子、IPS、多种试剂及创伤等诱导 ,很多疾病的产生发展都与iNOS的过度表达有关。为进一步研究iNOSFAD结合区的功能和特异性抑制肽的筛选 ,用PCR方法克隆出iNOSFAD结合区编码基因片段 (iNOS2 0 31 2 6 6 0bp) ,并在大肠杆菌中得到高效表达 ,得到表达率 >30 %的包涵体 ;经过Ni金属螯合亲和柱层析和电泳纯化 ,得到纯度 >95 %的重组蛋白 ,相对分子质量为2 3 0 0 0。运用波长扫描 ,证实纯化蛋白具有与FAD的结合活性。; 李爱萍徐洪朱敏生朱东亚吴如金智刚Kim S Lau.James.T.Stull; 关键词：一氧化氮合酶诱生型克隆活性鉴定

nNOS选择性拮抗剂7-硝基吲唑促进成年小鼠脑缺血后神经元再生被引量：9: 2006年; 目的研究nNOS选择性拮抗剂7-硝基吲唑对脑缺血后神经元再生的影响。方法大脑中动脉阻塞法制备局灶性脑缺血/再灌注模型。腹腔注射7-硝基吲唑(30 mg.kg-1)。B rdU、NeuN标记法测定海马齿状回的细胞扩增及新生细胞的分化,跳台实验法测定动物的学习记忆能力。结果在脑缺血后d 8缺血侧海马齿状回的B rdU阳性细胞数比对照侧多大约3倍,7-硝基吲唑进一步促进了脑缺血所诱发的海马齿状回神经细胞扩增,并促进新生细胞的存活,改善脑缺血小鼠的学习记忆功能。结论nNOS对脑缺血诱发的海马齿状回神经元再生有重要作用。; 王玮孙勇军罗春霞张爱霞朱东亚; 关键词：7-硝基吲唑神经元型一氧化氮合酶神经元再生

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