国家高技术研究发展计划(2012AA10180402)
- 作品数：13 被引量：60H指数：4
- 相关作者：李多川刘宁王禄山陈冠军张怀强更多>>
- 相关机构：山东农业大学山东大学河南天冠企业集团有限公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 嗜热真菌Beta-1,3-葡聚糖酶结晶、晶体结构解析与催化残基鉴定
- 真菌Beta-1,3-葡聚糖酶(分为内切酶和外切酶)具有重要的生物学功能,涉及真菌的众多生长发育过程。尽管目前仅有真菌的一个内切Beta-1,3-葡聚糖酶晶体结构被解析,但它的催化残基是推测性的,没有实验证明;另一方面,...
- Anastassios C.Papageorgiou陈进银李多川
- 关键词：嗜热毛壳菌晶体结构
- 文献传递
- 病原真菌纤维素酶保守结构域涉及激发植物的防卫反应
- 目前,植物病原真菌产生的纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶在植物与真菌互作机制方面引起人们的兴趣和关注。我们的研究发现:在植物与真菌互作中,玉米纹枯病菌(Rhizoctonia solani)的一种45家族内切纤维素酶EG1具有...
- 马亚男陈进银李多川
- 关键词：激发子
- 文献传递
- 疏棉状嗜热丝孢菌转录组分析
- 疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)是嗜热真菌中生长上限温度最高的真菌,广泛存在在自然界中,特别在生物质残体中。为了理解该真菌降解生物质的机制,本研究分别将在微晶纤维素和葡萄糖培养48小时的...
- 耿志刚陈进银李多川
- 关键词：转录组
- 文献传递
- 嗜热毁丝菌外切葡聚糖苷酶CBH1环状结构对酶活性及热稳定性的影响被引量：6
- 2018年
- 糖苷水解酶第七家族(GH7)的外切葡聚糖苷酶(exo-1,4-β-D-glucanase),又称为纤维素生物降解酶(CBHs),在其催化中心活性通道的顶端有1个环状结构,嗜热毁丝菌(Myceliophthora thermophila)第七家族外切葡聚糖苷酶CBH1的环状结构(LS,Loop Structure)由9个氨基酸组成,即G245-Y253,但其对酶特性影响机制尚不清楚。本文构建环状结构缺失突变体CBH1-DM﹝Δ(G245-Y253)﹞以研究该结构对酶特性的影响。野生酶WT与突变酶CBH1-DM通过毕赤酵母表达并纯化,将纯化产物进行酶学性质的测定及分析。研究结果显示野生酶和突变酶的最适反应温度和最适p H值均相同,分别为50℃和5.0。CBH1-DM的比活力为2.42 U/mg,是WT(1.17 U/mg)的2.1倍。野生酶与突变酶在70℃处理1 h后,野生酶仅剩余35%的酶活力,而突变酶剩余70%的酶活力,具有较好的热稳定性。研究表明环状结构对酶的活性及热稳定性具有显著影响。
- 杨志芹高金鹏郭秀娜李多川
- 关键词：酶活力环状结构热稳定性
- 嗜热毛壳菌多糖单加氧酶的性质及协同作用研究
- 2019年
- 多糖单加氧酶(polysaccharide monooxygenases, PMOs)可以氧化裂解纤维素,为纤维素酶提供更多的结合位点,对提高纤维素酶的活性具有重要意义。本研究旨在探索嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilum)AA9家族PMO5456的氧化方式,以及与不同类型纤维素酶的协同作用。通过对PMO反应产物进行鉴定,确定PMO5456具有C1、C4、C6位氧化。设置时间梯度,以PMO5456预处理的磷酸膨胀纤维素(PASC)为底物,测定PMO5456与嗜热毛壳菌三种纤维素酶EG1、CT2、CBH1的协同作用,结果显示随着PMO5456预处理纤维素时间的增加,纤维素酶的活性随之增加。PMO5456对三种纤维素酶EG1、CBH1、CT2的降解效率分别提高了3.6、2.2倍和60%。
- 王美霞惠金聚陈宸郭秀娜李多川
- 关键词：嗜热毛壳菌
- 嗜热真菌Beta-1,3-葡聚糖酶结晶、晶体结构解析与催化残基鉴定
- 真菌Beta-1,3-葡聚糖酶(分为内切酶和外切酶)具有重要的生物学功能,涉及真菌的众多生长发育过程.尽管目前仅有真菌的一个内切Beta-1,3-葡聚糖酶晶体结构被解析,但它的催化残基是推测性的,没有实验证明；另一方面,...
- Anastassios C.Papageorgiou陈进银李多川
- 关键词：嗜热毛壳菌CHAETOMIUM晶体结构
- 热纤梭菌高效降解木质纤维素过程的组学研究进展被引量：6
- 2014年
- 热纤梭菌(Clostridium thermocellum)是高效降解木质纤维素的重要微生物,因其能分泌纤维小体这一超分子酶系复合物而备受关注。它分泌的酶系组分多样,胞外酶组分的表达、分泌及其在纤维小体支架蛋白上的组装是一受到胞外碳源等因素显著影响的动态过程。热纤梭菌究竟如何感知纤维素等不溶性底物的存在并动态调控相应酶组分的分泌,完成具有高效降解能力的超分子酶系复合物的组装成为近几年来相关研究的热点。本文主要从基因组学、转录组学、蛋白质组学及菌体对胞外碳源的感应机制等方面来综述相关研究进展,并对热纤梭菌降解天然复杂生物质的动态过程及其相应机制进行了剖析,并展望其应用前景。
- 陈林王禄山张怀强
- 关键词：基因组学转录组学蛋白组学
- 碳水化合物活性酶数据库(CAZy)及其研究趋势被引量：21
- 2014年
- 碳水化合物活性酶数据库(CAZy)是关于能够合成或者分解复杂碳水化合物和糖复合物的酶类的一个数据库资源,其基于蛋白质结构域中的氨基酸序列相似性,将碳水化合物活性酶类归入不同蛋白质家族。CAZy数据库中包含了碳水化合物酶类的物种来源、酶功能EC分类、基因序列、蛋白质序列及其结构等信息。而随着宏基因组学技术的快速发展,CAZy数据库中家族内序列数据量剧增,这为家族内进一步进行亚家族分类奠定了基础;而蛋白质家族内新一层精细分类的引入可提高亚家族中酶分子功能预测的准确度,进而可指导酶分子理性设计来提高特定功能酶组分设计的成功概率,从而推动生物质转化产业的发展。
- 王帅陈冠军张怀强王禄山
- 关键词：宏基因组亚家族
- 嗜热革节孢内切葡聚糖酶EGⅠ中精氨酸Arg7的功能分析
- 2020年
- 本研究将嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶EGⅠ中的底物结合位点精氨酸Arg7进行饱和突变,测定其性质、动力学参数的变化,以期分析精氨酸Arg7的功能。结果表明,与原酶相比,突变酶R7A的Km有所下降,R7P的kcat显著性提高,但突变酶的kcat/Km均显著性降低。原酶的最适反应温度为50℃,突变酶R7C、R7P和R7V的则为40℃,其余突变酶的均为50℃。原酶于70℃下处理2 h具有61%的活性,相同处理条件下,突变酶R7F、R7H仍具有70%以上的活性,说明其热稳定性明显提高,R7A仅有20%的活性,剩余突变酶均有40%左右的活性。原酶的反应最适pH值为5. 0,而突变酶R7C的为6. 0,剩余突变酶的均为5. 0。本试验探究了精氨酸Arg7饱和突变后嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶的性质变化,可为GH45家族进一步的分子改造和功能研究提供参考。
- 于伟帅李多川
- 关键词：内切葡聚糖酶酶学性质
- 嗜热革节孢多糖单加氧酶氧化方式被引量：1
- 2019年
- 多糖单加氧酶(polysaccharidemonooxygenase,PMO)是一种铜离子依赖的氧化酶,属于辅助活性酶类第九家族(auxiliary activity 9,AA9),在存在电子供体维生素C(vitamin C,Vc)的情况下,可以氧化裂解纤维素的多糖链,显著提高纤维素的酶解效率。本文克隆了嗜热革节孢Scytalidium thermophilumAA9家族的一个编码基因pmo7651,并在毕赤酵母GS115进行诱导表达,通过His标签获得了重组蛋白PMO7651-His。以磷酸膨胀纤维素(PASC)为底物进行酶促反应,薄层层析法(TLC)结果显示PMO7651酶解产物主要为纤维二糖至纤维五糖;飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)和溴氧化法确定PMO7651具有C1、C4、C6位的氧化活性;底物结合平面的3个芳香族氨基酸位点突变对酶的活性具有不同程度的影响;在PMO7651帮助下,纤维素酶的降解效率均具有不同程度的提高。
- 朱敏陈进银刘宁郭秀娜李多川
- 关键词：定点突变
