上海市教育委员会创新基金(08YZ37)
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
- 相关作者：陈晓东崔一民王晖蔡贵泉王鹏更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属新华医院上海交通大学同济大学更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会创新基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨髓间充质干细胞向纤维软骨细胞表型的诱导分化被引量：7
- 2010年
- 背景:半月板损伤后自行修复能力有限,组织工程技术为半月板损伤后修复开辟了一条新的途径。骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,有可能成为半月板组织工程理想的种子细胞。目的:观察体外培养的猪骨髓间充质干细胞在诱导培养液作用下向纤维软骨细胞表型分化的可行性。方法:采用全骨髓培养法分离培养猪骨髓间充质干细胞。取第3代的骨髓间充质干细胞,实验组以2.0×104/cm2细胞密度接种于24孔板,在含有转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ、地塞米松及抗坏血酸的DMEM-LG完全培养液中诱导分化,对照组以2.0×104/cm2细胞密度接种于24孔板,加入不含诱导因子的DMEM-LG完全培养液。在诱导第7,14,21天分别行甲苯胺蓝染色、免疫细胞化学染色检测其分化结果。结果与结论:①第2代骨髓间充质干细胞的群体倍增时间最短约为2d,第4代以后相对延长,为5～9d。②诱导后的骨髓间充质干细胞由梭形向多角形、多边形转变。③实验组可见胞浆呈明显的紫蓝色,尤其细胞密集生长的区域蓝染较深,染色强度随诱导时间延长而增强。对照组的骨髓间充质干细胞只有核蓝染。④实验组和对照组Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色均阳性,各期染色无明显差异。对照组未见Ⅱ型胶原表达,实验组诱导14d后可见Ⅱ型胶原能稳定的表达。提示骨髓间充质干细胞在体外诱导培养下可分泌纤维软骨细胞特征性细胞外基质,作为半月板组织工程种子细胞来源可行。
- 蔡贵泉崔一民陈晓东
- 关键词：骨髓间充质干细胞纤维软骨细胞分化软骨组织工程
- 半月板组织工程的研究进展被引量：4
- 2009年
- 蔡贵泉陈晓东
- 关键词：半月板种子细胞细胞因子应力
- Wnt信号通路中的分子及配体参与成骨与破骨细胞间的转化被引量：3
- 2012年
- 背景:在关节软骨退行性病变中,Wnt信号通路在调节软骨细胞与成骨细胞的失衡,调控软骨细胞的增殖、骨化与退变的作用,越来越被人们所重视。目的:综述Wnt信号通路在骨性关节炎中的作用。方法:应用计算机检索万方数据库2001/2011相关文章,检索词为"Wnt,信号通路,软骨细胞",并限定文章语言种类为中文,共检索到文献24篇。同时计算机检索Pub Med数据库2001/2011相关文章,检索词为"Wnt,pathway chondrocyte",并限定文章语言种类为English,共检索到文献82篇。最终纳入符合标准的文献25篇。结果与结论:分泌型Wnt家族中的一系列蛋白及其配体在软骨细胞骨化、成骨细胞表型维持、抑制骨髓间充质干细胞脂肪化等方面发挥着重要的作用。其经典的Wnt/β-actnin通路通过一系列信号分子的激活与抑制及与其他信号通路间的交叉和级联反应,参与调控骨性关节炎的发展进程。同时,Wnt通路中的分子及配体又参与调控成骨细胞与破骨细胞间转化的平衡、骨质增生与重建破坏等过程。
- 王晖陈晓东
- 关键词：信号通路信号蛋白软骨细胞
- 力学刺激联合诱导因子对组织工程软骨的影响被引量：1
- 2011年
- 目的力学刺激与诱导因子是软骨组织工程中的重要诱导因素,研究力学刺激联合诱导因子对组织工程软骨的影响。方法 7日龄长枫杂交仔猪,体重3～6 kg,用于分离培养BMSCs,取第2代细胞以5×107个/mL密度接种于聚羟基乙酸-聚乳酸[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]支架上制备细胞-支架复合物。实验随机分为5组,A、B、C组分别对细胞-支架复合物采用软骨诱导培养液诱导、单纯力学加载、力学加载联合软骨诱导液培养处理,其中力学加载参数为1 Hz、0.5 MPa、4 h/d;D、E组分别为单纯细胞-支架复合物阴性对照和猪自体软骨阳性对照。4周后各组分别取材行大体观察、组织学检测及实时荧光定量PCR检测。结果 C组细胞-支架复合物厚度、弹性模量及最大值负荷均显著高于A、B组(P<0.05)。A、B、C组组织切片HE染色均可见有软骨陷窝形成,番红O染色提示支架复合物的细胞外基质中有大量蛋白聚糖(glycosaminoglycan,GAG)形成,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均显示阳性结果,其中A组染色深度强于B组,C组强于A、B组,且最接近E组;C组GAG含量显著高于A、B组(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测示,C组Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖mRNA表达量均显著高于A、B组,且A组各基因表达量均高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论力学刺激联合软骨诱导因子能更好地促进细胞-支架复合物上的BMSCs产生更多胶原和GAG等细胞外基质,增强其力学特性,更有助于其向软骨细胞分化。
- 王晖崔一民朱俊峰周贤德朱传敏陈晓东
- 关键词：组织工程软骨BMSCS细胞外基质
- 软骨组织工程生物反应器研究进展被引量：2
- 2011年
- 软骨组织工程技术的发展已进入体外构建的关键阶段。生物反应器能在体外动态模拟体内微环境中物质转运和流体应力刺激反应,从而实现体外经生物力学途径调控软骨细胞的基因表达和增殖。传统的二维或静态压力型生物反应器难以构建功能接近于正常的软骨,各种可即时智能调控的微重力、灌流液压、微载体等新型生物反应器使得培养基环境的调控更加高效、精确化,培养的三维软骨组织在形态、基因表达及力学特性上均更接近于正常软骨组织。该文就近年软骨组织工程中生物反应器研究进展作一综述。
- 王晖陈晓东
- 关键词：生物反应器应力刺激细胞培养体外构建
- 半月板组织工程支架材料的研究进展被引量：1
- 2010年
- 王鹏崔一民陈晓东
- 关键词：半月板生物材料
- 完全脱钙骨基质与骨髓间充质干细胞体外诱导构建组织工程纤维软骨被引量：6
- 2011年
- 背景:含有骨形态发生蛋白的完全脱钙骨基质可使骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化并维持其软骨细胞的特性,在软骨发生过程中发挥重要作用。目的:将骨髓间充质干细胞与完全脱钙骨基质在体外诱导培养成纤维软骨组织以及观察培养体系与支架材料对细胞凋亡的影响。方法:采用全骨髓培养法分离培养猪骨髓间充质干细胞,取第1代骨髓间充质干细胞均匀接种到完全脱钙骨基质上,以含有转化生长因子β1、胰岛素样生长因子、地塞米松、抗坏血酸及体积分数10%FBS的高糖DMEM诱导培养液培养作为实验组,将单层诱导培养、单层基础培养的骨髓间充质干细胞、空白完全脱钙骨基质作为对照,于培养第1,2,3,4周进行大体形态观察以及Ⅰ、Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖的RT-PCR定性检测;培养4周进行细胞凋亡检测。结果与结论:实验组可检测到Ⅰ型胶原的持续表达,Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖表达逐渐增加。单层诱导培养组可检测到Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达及Ⅰ型胶原的持续表达,但表达量远低于实验组;实验组细胞凋亡率高于单层诱导培养组、单层基础培养组。说明转化生长因子β1、胰岛素样生长因子1体外诱导培养的骨髓间充质干细胞-完全脱钙骨基质可以表达特异性软骨基质,三维环境培养细胞外基质的表达量明显高于单层诱导培养;静态培养系统对三维培养的细胞凋亡有影响。
- 王鹏崔一民陈晓东
- 关键词：骨髓间充质干细胞组织工程软骨
