广东省科技计划工业攻关项目(2004B33001003)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 缅甸蝰蛇毒纤溶酶FⅡaa的分离及生物活性
- 2010年
- 【目的】从缅甸蝰蛇毒中分离纯化得到纤溶酶FⅡaa并研究其纤维蛋白溶解活性。【方法】缅甸蝰蛇蛇毒纤溶酶FⅡaa经过离子交换层析和凝胶层析分离程序得到,SDS-PAGE电泳测得其分子质量,用纤维蛋白平板法测得其纤维蛋白溶解活性,SDS-PAGE电泳测得其纤维蛋白原和纤维蛋白水解特异性。通过小鼠背部皮下注射FⅡaa测定FⅡaa的局部出血活性。取昆明种小白鼠42只,体质量(20±2)g,雌雄各半,随机分成7组,每组6只,皮下注射0.1mL的FⅡaa(5个剂量组:用生理盐水配制成浓度分别为0.025、0.05、0.075、0.1、0.125mg/mL),生理盐水和粗毒(0.1mg/mL)做对照。6h后处死小白鼠,从皮内侧面测量出血点的大小,计算最小出血剂量(MHD)。【结果】通过三步分离方法得到蛇毒纤溶酶FⅡaa,其分子质量是69000u。FⅡaa在纤维蛋白平板和加热纤维蛋白平板上均显示了纤维蛋白溶解活性。纤维蛋白原和FⅡaa(0.2g/L)保温后,Aα和Bβ链分别在5min和6h后完全水解。γ-链在24h后部分水解。FⅡaa水解纤维蛋白的过程与纤维蛋白原的水解过程相似。蛇毒纤溶酶FⅡaa(0.025、0.05、0.075、0.1、0.125mg/mL)的皮内出血点直径(mm)分别为7.7±1.0、9.9±1.4、10.5±1.8、12.7±1.4、13.5±1.3。最小出血剂量(MHD)为6.0μg。【结论】FⅡaa是一种可以直接降解纤维蛋白且具有出血活性的α-纤维蛋白酶。
- 陈慧珍梁秀霞邱鹏新陈家树
- 关键词：纤溶酶蛇毒
