国家自然科学基金(30572196)
- 作品数：15 被引量：97H指数：8
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- 相关机构：安徽医科大学中国人民解放军无锡市第三人民医院更多>>
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- 重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞内钙离子稳态的影响
- 2009年
- 目的观察重组人内抑素（rhEndostatin）对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞（AAFLSs）内钙离子（Ca2＋）稳态的影响，探讨rhEndostatin促进AAFLSs凋亡的离子机制，为RA药物治疗及寻找其治疗新靶点提供实验依据。方法雄性sD大鼠12只，体质量140～160g，分为正常组（n=3）和AA模型组（n=9）。模型组大鼠制备AA模型，体外培养AAFLSs，应用Ca2＋荧光指示剂Fluo-3／AM孵育培养的细胞，激光扫描共焦显微镜检测有、无细胞外Ca2＋，而rhEndostatin作用所致AAFLSs胞内Ca2＋荧光强度发生动态变化，可以判断rhEndostatin对AAFLSs胞内Ca2＋浓度（[Ca2＋]i）的影响。结果在胞外有Ca2＋的情况下，rhEndostatin可引起静态AAFLS[Ca2＋]i快速增加，rhEndostatin作用10s后，[Ca2＋]i急剧增加达峰值，继之随时间缓慢下降，停止加药50s后，[Ca2＋]i尚未回复到加药前基础水平；而在无细胞外钙环境中，rhEndostatin未引起AAFLSs[Ca2＋]i变化。结论rhEndostatin可促进AAFLSs胞外Ca2＋内流，引起胞内Ca2＋超载，从而促进AAFLSs凋亡。
- 黄学应陈飞虎张晓明刘永靖
- 关键词：内抑素类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞钙离子
- 几种抗类风湿性关节炎药物对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道的表达影响及作用被引量：8
- 2008年
- 目的:观察几种抗类风湿性关节炎(RA)药物对佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨中的酸敏感离子通道(ASICs)表达的影响,探讨抗RA药物对关节软骨的保护作用。方法:将大鼠随机分成正常组、AA模型组、阿司匹林(50mg/kg)组、地塞米松(0.2mg/kg)组、雷公藤多苷(50mg/kg)组和左旋咪唑(10mg/kg)组。弗氏完全佐剂(CFA)致炎后第10天起,AA大鼠出现继发性炎症,此时地塞米松组腹腔注射地塞米松,其它用药组分别灌胃相应的受试药物,正常组与模型组灌胃等容量的无菌注射用水,连续7d。实验结束后,光学显微镜观察关节病理变化;用半定量RT-PCR和Western blotting分析常用药物对AA大鼠关节软骨细胞中ASICs表达的影响;用半定量RT-PCR方法分析常用药物对AA大鼠关节软骨中的蛋白聚糖体(aggregate proteoglycan,aggrecan)表达的影响;免疫组织化学技术检测常用药物对AA大鼠关节软骨中的Ⅱ型胶原蛋白合成的影响。结果:经过治疗后,各用药组能明显抑制AA大鼠的继发性足肿胀。阿司匹林能显著抑制AA大鼠关节软骨细胞ASICs的表达,其它用药组对ASICs无明显抑制作用。各用药组能明显升高AA大鼠关节软骨细胞基质成分Ⅱ型胶原和aggrecan表达量,其中阿司匹林作用显著。结论:阿司匹林可能通过抑制ASICs的表达而抑制AA大鼠关节软骨的破坏。
- 陈飞虎袁凤来李霞吴繁荣黄学应胡伟沈娟李俊
- 关键词：佐剂性关节炎软骨关节离子通道
- 大鼠关节软骨酸敏感离子通道的表达被引量：20
- 2007年
- 目的探讨大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)的表达及其意义。方法利用RT-PCR和Western blot检测ASICs在大鼠关节软骨的表达。结果大鼠关节软骨存在ASIC1a、ASIC2a和ASIC3 mRNA及其蛋白的表达。结论ASICs在大鼠关节软骨组织的表达,其有望成为关节炎治疗的新靶点。
- 袁凤来陈飞虎李霞雄志刚黄学应刘永靖吴繁荣姚莹张晓明
- 关键词：离子通道逆转录聚合酶链反应
- 佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞的体外培养与鉴定被引量：11
- 2007年
- 目的:建立佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)的体外培养及鉴定方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法:制备AA大鼠模型,用组织块培养法培养AA大鼠滑膜细胞,并通过形态学和流式细胞仪(FCM)进行鉴定。结果:培养的滑膜细胞具有成纤维细胞的形态和特征,呈长梭形极向生长,FCM检测VCAM-1表达率94%以上。结论:成功地培养出了AA大鼠滑膜细胞,可作为进一步实验研究的靶细胞。
- 张晓明陈飞虎黄学应夏丽娟刘永靖
- 关键词：类风湿性关节炎滑膜细胞体外培养
- 重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞周期和PCNA表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的观察重组人内抑素(rhEndostatin)对佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨rhEndostatin抑制AAFLS增殖的分子机制。方法制备AA大鼠模型,应用流式细胞仪分析rhEndostatin对AA FLS细胞周期的影响;分别采用实时荧光定量PCR和Western blot方法,定量分析rhEn-dostatin对AA大鼠滑膜组织PCNA mRNA及蛋白表达的影响。结果与正常组相比,AA FLS G1期细胞减少(P<0.01),S期和G2/M期细胞增加(P<0.01);AA大鼠滑膜组织PCNA mRNA和蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01)。与AA模型组相比,rhEndostatin治疗组细胞G1期比例增加(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例减少(P<0.01);滑膜组织PCNA mRNA和蛋白表达减少(P<0.01)。结论rhEn-dostatin可引起AA FLS细胞周期G1期阻滞,该作用可能与其抑制AA FLS PCNA表达有关。
- 黄学应陈飞虎张晓明刘永靖袁凤来
- 关键词：内抑素佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞
- 重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞增殖及产生细胞因子的影响被引量：21
- 2007年
- 目的观察重组人内抑素对体外培养佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞的增殖功能及产生细胞因子的影响,探讨其治疗佐剂性关节炎的作用机制。方法采用弗氏完全佐剂(CFA)诱导的佐剂性关节炎(AA)大鼠模型,用足容积法测量关节肿胀度;采用collagenasetypeⅡ消化法分离、培养滑膜细胞,MTT法检测重组人内抑素体内用药对滑膜细胞增殖的影响;放免法检测滑膜细胞上清液中IL-1β、TNF-α的含量。结果CFA致炎后d10,AA大鼠出现继发性炎症,此时皮下注射重组人内抑素(1·25,2·5,5mg·kg-1),连续7d,对照组于d10给予MTX(1·0mg·kg-1)。各剂量组能明显抑制AA大鼠的继发性足肿胀;重组人内抑素体内用药可明显减少AA大鼠滑膜细胞数量,抑制滑膜细胞的增殖,并呈剂量依赖关系;各剂量组均可明显抑制AA大鼠滑膜细胞产生过高的IL-1β和TNF-α。结论重组人内抑素抑制AA大鼠滑膜细胞过度的增殖及过高的细胞因子是其治疗AA的途径之一。
- 夏丽娟陈飞虎任斌黄学应宋群亮李俊
- 关键词：重组人内抑素佐剂性关节炎滑膜细胞增殖细胞因子
- 内抑素抗血管生成及抗类风湿性关节炎治疗被引量：9
- 2009年
- 血管生成是类风湿性关节炎(RA)早期滑膜病理改变特征之一,也是产生和维持RA血管翳的主要因素。内抑素可特异性抑制新生血管内皮细胞增殖、迁移、诱导其凋亡而发挥抗血管生成作用,应用内抑素抑制滑膜新生血管生成可成为治疗RA的一种全新方法。内抑素还可通过抑制成纤维样滑膜细胞增殖,促进其凋亡发挥抗RA效应。
- 黄学应陈飞虎张晓明刘永靖
- 关键词：类风湿性关节炎血管生成内抑素血管内皮生长因子
- 酸敏感离子通道在缺血性脑损伤中的作用被引量：11
- 2006年
- 综述近年来有关酸敏感离子通道在缺血性脑损伤中的作用研究,论及酸敏感离子通道在脑中的分布和作用、它的激活以及在缺血性脑损伤中的作用机制及与谷氨酸受体的协同作用。酸敏感离子通道是一类由胞外酸化所激活的阳离子通道,而缺血性脑损伤正是由其引起胞内Ca2+超载所致,因此抑制其激活可以对抗缺血性脑损伤,为神经系统缺血性损伤的保护及药物治疗研究提供了新思路。
- 袁凤来陈飞虎
- 关键词：酸敏感离子通道缺血性脑损伤
- 重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠关节软骨酸敏感离子通道的影响及其保护作用被引量：5
- 2008年
- 目的观察重组人内抑素(rh-End)对佐剂性关节炎大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)表达的影响,探讨其对关节软骨的作用。方法将大鼠随机分成正常组、AA模型组、rh-End 1.25、2.5、5.0mg·kg-1组和阿司匹林50mg·kg-1阳性对照组。弗氏完全佐剂(CFA)致佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)后d10,大鼠出现继发性炎症,此时皮下注射重组人内抑素,连续7d,对照组灌胃给阿司匹林;正常组与模型组给予等容量的无菌注射用水。光学显微镜观察关节病理变化,半定量RT-PCR方法检测rh-End对AA大鼠关节软骨ASICs和蛋白聚糖体mRNA的影响,Western blot方法检测rh-End对AA大鼠关节软骨ASICs蛋白的影响,免疫组织化学技术测定rh-End对AA大鼠关节软骨中的Ⅱ型胶原蛋白合成的影响。结果rh-End各剂量组能明显抑制AA大鼠关节软骨组织中的ASICs表达,并升高关节软骨基质成分Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖体mRNA表达量。结论重组人内抑素通过抑制ASICs的表达进而保护AA大鼠关节软骨。
- 袁凤来陈飞虎李霞黄学应吴繁荣张腾跃吕元庆李俊
- 关键词：重组人内抑素佐剂性关节炎关节软骨酸敏感离子通道
- 重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织血管内皮细胞生长因子表达的影响被引量：19
- 2006年
- 目的:观察重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织血管内皮细胞生长因子(vascular endo-thelial cell growth factor,VEGF)的表达及其作用。方法:采用弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant,CFA)诱导的佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthri-tis,AA)大鼠模型,用足容积法测量关节肿胀度;免疫组织化学法检测血管内皮细胞生长因子的表达及其对微血管密度的影响。结果:弗氏完全佐剂致炎后d 10,佐剂性关节炎大鼠出现继发性炎症,皮下注射给予不同剂量的重组人内抑素(1.25、2.5、5 mg.kg-1),连续7 d,对照组于d 10给予氨甲喋呤(Methotrexate,MTX,1.0 mg.kg-1)。重组人内抑素各剂量组能明显抑制AA大鼠的继发性足肿胀,重组人内抑素各剂量组可不同程度减少AA大鼠关节滑膜组织高表达的VEGF,还可使滑膜组织的微血管密度减少。结论:重组人内抑素可显著抑制AA大鼠滑膜组织VEGF的表达及微血管密度,该作用可能与抑制血管翳的生成及减少滑膜细胞表面VEGF的表达有关。
- 夏丽娟陈飞虎黄学应刘永靖李俊
- 关键词：重组人内抑素佐剂性关节炎血管内皮细胞生长因子
