教育部留学回国人员科研启动基金(0236009)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：廖品琥黄冰曹建杜学柯姚为学更多>>
- 相关机构：广西医科大学附属肿瘤医院广西医科大学第一附属医院湛江中心人民医院更多>>
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- IL-1β对A549细胞分泌IL-8的诱导作用及其机理
- 2009年
- 目的:研究白细胞介素1β(IL-1β)对A549细胞分泌趋化因子白细胞介素8(IL-8)的诱导作用、相关的细胞内信号通道的激活和传导机理。方法:使用IL-1β刺激A549细胞后,Western blot检测细胞内磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2),磷酸化p38(p-p38)和磷酸化JNK(p-JNK)蛋白的表达水平;逆转录-聚合酶反应(RT-PCR)检测IL-8 mRNA的表达;ELISA检测IL-8的蛋白水平。结果:IL-1β刺激后细胞内p-ERK1/2、p-p38和p-JNK的蛋白表达明显增加;A549细胞IL-8 mRNA表达明显升高;IL-8的蛋白表达水平明显高于未干预组。MEK1/2激酶抑制物U0126完全阻断了细胞内p-ERK1/2蛋白表达的升高,显著减低了IL-1β诱导的IL-8 mRNA和蛋白表达的增高;p38激酶抑制物SB203580部分阻断了细胞内p-p38表达的增高,对IL-8 mRNA无明显的影响但减低了IL-8蛋白表达的增高。c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路抑制物SP600125不表现对p-JNK抑制作用,没有影响IL-8mRNA和蛋白的表达。结论:IL-1β通过激活ERK1/2,p38信号通道,介导了A549细胞分泌IL-8。
- 廖品琥姚为学杜学柯曹建黄冰张玮阮林潘灵辉王建荔
- 关键词：IL-1ΒIL-8A549细胞
- 白细胞介素-1β激活核转录因子-κB介导A549细胞分泌白细胞介素-8的研究被引量：3
- 2007年
- 目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)对肺II型上皮A549细胞分泌白细胞介素-8(IL-8)的诱导作用,探讨相关的细胞内信号通道的激活和传导的机理。方法以1ng/ml终浓度的IL-1β干预经核转录因子-κB(NF-κB)的IKK2复合物抑制物(AS602868)预处理的A549细胞,Western blot检测IL-1β干预后细胞内磷酸化IκBα(p-IκBα)和IκBα蛋白的表达水平;激光扫描共焦显微镜(LSCM)检测NF-κB的p65和p50蛋白的核转移过程;ELISA检测NF-κB的p65和p50蛋白与DNA结合活性及IL-8蛋白的释放。结果IL-1β干预后细胞内p-IκBα蛋白明显升高,IκBα蛋白明显下降;LSCM扫描显示p65和p50蛋白从胞浆向胞核转移,同时p65和p50与DNA结合活性明显升高(P<0.01);IL-8的蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。细胞经AS602868的预处理,阻断了细胞内p-IκBα蛋白升高和IκBα蛋白降解;减少了p65和p50蛋白的核转移和与DNA结合活性(P<0.01);降低了IL-8蛋白的表达水平(P<0.01)。结论IL-1β通过激活NF-κB介导了A549细胞分泌IL-8,结果提示可能通过抑制NF-κB信号通道的方法,减轻呼吸机相关肺损伤(VALI)的生物性损伤。
- 廖品琥黄冰
- 关键词：白细胞介素-1Β白细胞介素-8核转录因子-KB呼吸机相关肺损伤
- 对白细胞介素-1β激活核转录因子-κB介导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1作用的研究被引量：3
- 2009年
- 目的研究白细胞介素-1β（IL-1β）对A549细胞表达细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的诱导作用及相关细胞内信号通路的激活和转导机制。方法以1pg／L终浓度的IL一1p刺激经SC-514[核转录因子-κB（NF—κ）的IKK-2复合物抑制物]预处理的A549细胞，用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测IL-1β刺激5、10、30、60min时细胞内磷酸化NF—κB抑制蛋白（pIκBα）和IκBα蛋白表达水平；激光扫描共焦显微镜（LSCM）显像检测NF-κBp65的核转移过程；按试剂盒说明测定NF-κBDNA结合活性；p65抗体染色质免疫沉淀结合聚合酶链反应（CHIP—PCR）技术检测乙酰化组蛋白H4和p65与ICAM-1基因启动子的结合；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测4h后的ICAM—1mRNA表达；酶联免疫吸附法（ELISA）检测24h后细胞表面的ICAM-1蛋白表达。结果IL-1β刺激后细胞内pIκBα蛋白表达水平明显升高，IκBα蛋白表达水平明显下降；LSCM检测显示激活的p65蛋白从胞质向胞核转移，p65与DNA结合活性明显升高（P〈0．01）。ChIPPCR扩增发现，IL-1β促使乙酰化组蛋白H4和p65与ICAM-1基因启动子区域的DNA片断结合。IL-1β刺激4h后ICAM-1mRNA表达明显升高，刺激24h后A549细胞表面ICAM-1蛋白表达亦明显升高（P均〈0．01）。SC-514阻断了pIκBα蛋白的升高和IκBα蛋白的下降；减少了p65蛋白的核转移和DNA结合活性；降低了ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平（P均〈0．01）。结论IL-1β通过激活NF—κB介导了A549细胞表达ICAM-1。
- 廖品琥杜学柯黄冰姚为学曹建
- 关键词：细胞间黏附分子-1核转录因子-ΚB白细胞介素-1Β
