博士科研启动基金(201223)
- 作品数：7 被引量：43H指数：3
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- 相关机构：吉林农业大学皖南医学院吉林化工学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家自然科学基金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 动物源性食品中药物残留的研究进展被引量：3
- 2013年
- 动物源性食品因生产过程中药物使用不当,导致食品不同程度的药物残留,严重危害人体健康。近年来为保证食品安全,对食品药物残留的研究引起人们的广泛关注。综述常见的磺胺类药物和氟喹诺酮类药物残留的危害及检测方法,并探讨预防药物残留的措施。
- 詹冬玲林禹欣刘景圣
- 关键词：动物源性食品药物残留
- 七叶皂苷钠阻断JAK-1/STAT-1信号诱导BGC-823及AGS细胞凋亡被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨七叶皂苷钠诱导胃腺癌BGC-823细胞及胃癌AGS细胞凋亡的机制。方法:采用CCK-8法检测七叶皂苷钠作用后胃癌细胞活力的变化;倒置显微镜下观察胃癌细胞的形态变化;荧光倒置显微镜观察DAPI单染后细胞核形态的改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western bloting检测JAK-1、STAT-1磷酸化情况;激光共聚焦显微镜观察STAT-1核转位情况。结果:七叶皂苷钠可浓度依赖性抑制胃癌细胞增殖,使胃癌细胞形态及细胞核形态呈现凋亡变化,显著升高癌细胞凋亡率,并下调JAK-1、STAT-1信号蛋白磷酸化及抑制STAT-1的核转位。结论:七叶皂苷钠能抑制BGC-823细胞及AGS细胞增殖并诱导其凋亡,该过程可能是通过抑制JAK-1/STAT-1信号级联来实现的。
- 冯遵永齐世美戚之琳凌烈锋章尧
- 关键词：七叶皂苷钠BGC-823细胞AGS细胞
- 白杨素通过JAK-STATs信号通路抑制内毒素诱导的巨噬细胞炎症反应被引量：21
- 2018年
- 目的探讨白杨素对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症的调控机制。方法分别用不同浓度(0、5、10、20、40、60、80、100、150、200μg/m L)白杨素作用RAW264.7细胞24 h后,采用CCK-8检测细胞活力值;分别用(10、30、60μg/m L)白杨素预处理RAW264.7细胞2 h后,用LPS刺激RAW264.7细胞18 h后,采用ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-6和MCP-1的释放水平;分别用(10、30、60μg/m L)白杨素预处理RAW264.7细胞2 h后,用LPS刺激RAW264.7细胞4 h后,运用Western blotting法检测JAK-1、JAK-2、STAT-1、STAT-3的磷酸化水平;分别用(10、30、60μg/m L)白杨素预处理RAW264.7细胞2 h后,用LPS刺激RAW264.7细胞15 min后,运用CM-H2DCFDA荧光探针检测RAW264.7细胞内活性氧簇水平;运用ROS清除剂NAC处理RAW264.7细胞,检测ROS对LPS诱导RAW264.7细胞JAK-STATs信号和炎症反应的影响;运用激光共聚焦显微镜观察转录因子STAT-1和STAT-3核转位情况。结果在白杨素浓度低于60μg/m L时,对RAW264.7细胞活力没有显著影响,因此我们选择10、30、60μg/m L白杨素作为抑制炎症作用的低、中、高剂量组;白杨素剂量依赖性地抑制LPS诱导的炎症蛋白i NOS的表达;白杨素剂量依赖性的下调LPS诱导的RAW264.7细胞中促炎因子TNF-α、IL-6和MCP-1的释放(P<0.01);白杨素抑制RAW264.7细胞中JAK-STATs信号活化并抑制STAT-1和STAT-3核转位;白杨素抑制RAW264.7细胞内ROS的产生;ROS作为上游信号介导JAK-STATs信号通路的活化。结论白杨素能有效阻断ROS介导的JAK-STATs信号活化,从而抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应。
- 齐世美李强姜琦戚之琳章尧
- 关键词：白杨素活性氧簇RAW264.7细胞
- 磷酸三酯酶突变体H23A的真核表达及性质表征
- 2013年
- 通过同源序列比对和晶体结构分析,嗜热菌Geobacillus kaustophilusHTA426磷酸三酯酶的H23位点高度保守,并且位于金属离子结合位点附近。结合Rosseta design程序设计,本实验将突变体H23A在毕赤酵母GS115中高效表达。通过组氨酸标签镍柱分离纯化、非变性蛋白电泳和Western blotting鉴定表达产物,证明该突变体酶主要是以介于单体和二聚体之间的寡聚形式存在。初步酶学性质研究表明,突变体酶是别构酶,V max为92.45U/mg,Hill系数h为1.98;最适温度为70℃,最适pH值为10.0;70℃的热稳定性良好,半衰期为5.1h,而且大多数二价金属离子对突变体H23A都有激活作用。
- 詹冬玲任玉雪李克剑闵伟红刘洋张英文刘景圣
- 关键词：突变体真核表达
- 嗜热菌Thermaerobacter subterraneus DSM13965磷酸三酯酶的原核表达、纯化及性质表征
- 2013年
- 将来源于嗜热菌Thermaerobacter subterraneus DSM13965的磷酸三酯酶基因在大肠杆菌BL21中高效表达,并采用超声、热失活和组氨酸标签镍柱对产物进行分离纯化,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定.结果表明:该重组酶以二聚体的寡聚体形式存在;其最适温度为70℃,最适pH=10.0,具有良好的热稳定性.
- 林禹欣刘惠麟韩葳葳詹冬玲刘景圣
- 关键词：原核表达
- 七叶皂苷钠通过抑制AKT,ERK上游信号SRC活性诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡被引量：16
- 2015年
- 探讨七叶皂苷钠对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡诱导作用及其可能的作用机制。运用MTT法检测七叶皂苷钠对MCF-7细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察细胞形态学变化;DAPI染色后在荧光显微镜下检测细胞核变化;采用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Western blotting检测凋亡相关蛋白(PARP,cleaved caspase-8,pro-caspase-3)和细胞存活相关信号分子(AKT,ERK)及其共同上游激酶SRC的磷酸化变化情况。结果显示,不同浓度七叶皂苷钠作用于乳腺癌MCF-7细胞后,以剂量依赖方式抑制MCF-7细胞增殖;诱导细胞凋亡(典型的凋亡形态学变化、细胞核改变和细胞凋亡率显著增加);细胞凋亡相关蛋白PARP切割增加,cleaved caspase-8表达增加,pro-caspase-3表达减少进一步验证了七叶皂苷钠的凋亡诱导作用;七叶皂苷钠显著抑制细胞存活相关信号分子(AKT,ERK)的磷酸化,其共同上游激酶SRC的活化亦显著下降。结果表明,七叶皂苷钠通过抑制SRC的活化,阻断信号向下游信号分子AKT,ERK的传递,抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,诱导细胞凋亡。
- 齐世美吕俊孟宇戚之琳凌烈锋
- 关键词：七叶皂苷钠细胞凋亡SRCAKTERK
- 嗜热菌Geobacillus Kaustophilus HTA426磷酸三酯酶在毕赤酵母GS115中的表达
- 2013年
- 将嗜热菌Geobacillus Kaustophilus HTA426中的磷酸三酯酶基因转入毕赤酵母GS115中,整合到染色体DNA基因组上,并进行诱导表达.SDS-PAGE和Western-blot试验结果显示,重组蛋白是一个分子量约为50KD的磷酸三酯酶二聚体.酶活检测证明重组蛋白具有较高的磷酸三酯酶活性,其最适温度为70℃,最适pH为10.0.
- 詹冬玲林禹欣任玉雪刘洋
- 关键词：嗜热菌毕赤酵母GS115
