福建省自然科学基金(2011J05055)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：吴唯维李盼陈叙林晨韬李素一更多>>
- 相关机构：福建师范大学福建省农业科学院福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 嗜水气单胞菌外膜蛋白基因DNA疫苗载体的构建及分析被引量：4
- 2013年
- 为构建嗜水气单胞菌的DNA疫苗载体,根据已发表的该菌外膜蛋白基因momp的核苷酸序列设计一对特异性引物,应用PCR技术,扩增到嗜水气单胞菌L316的主要外膜蛋白基因,并插入到真核表达载体pcDNA3上,构建成DNA疫苗,命名为pcDNA3-POMP。以纯化的原核表达蛋白GST-POMP免疫SD大鼠制备抗血清,用ELISA测定抗体效价达到1∶100 000以上;用pcDNA3-POMP质粒转染293细胞,转染48h后收集细胞,提取细胞的RNA进行RT-PCR,检测到外源基因的表达。至此,初步完成嗜水气单胞菌DNA疫苗表达载体的构建,为进一步疫苗免疫和效价的检测奠定基础。
- 李盼李素一吴唯维林天龙林晨韬陈叙
- 关键词：嗜水气单胞菌DNA疫苗外膜蛋白
- 创伤弧菌外膜蛋白OmpU的基因克隆与表达被引量：2
- 2013年
- 创伤弧菌是导致鳗鲡产生体表溃疡死亡的重要致病菌。本研究克隆了创伤弧菌FJ03-X2株外膜蛋白基因(ompU),构建含该基因的原核表达载体,命名为pET-32a-ompU,将其转化到大肠杆菌E.coli中进行融合表达。37℃,0.5mmol.L-1的IPTG诱导4h,融合蛋白rompU以可溶形式表达,采用Ni-NTA亲和层析法纯化融合蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的rompU为与预期大小一致的单一条带。将纯化的rompU免疫SD级大鼠,ELISA检测收获的多克隆抗体血清效价,并通过Western-blot证实该OmpU多克隆抗体可以识别创伤弧菌FJ03-X2株中的天然外膜蛋白OmpU。
- 李素一吴唯维李盼柯翎许斌福林晨韬林天龙陈叙
- 关键词：创伤弧菌克隆原核表达蛋白纯化多克隆抗体
