全球变化研究国家重大科学研究计划(2011CBA01000)
- 作品数：3 被引量：66H指数：2
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- 相关机构：北京大学东北农业大学更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 大众化的基因组定点修饰技术--从TALEN到CRISPR/Cas系统
- 近年来，以锌指核酸酶(ZFN)和TALEN为代表的人工构建的序列特异性核酸内切酶为基因组定点修饰技术带来了革命性的飞跃，使原来只能在小鼠、果蝇等极少数物种中实现的基因打靶迅速扩展到多种实验材料.本实验室在斑马鱼中建立了一...
- 刘达王展翔肖安张雨田李文渊祖尧姚少华林硕张博
- 关键词：斑马鱼基因打靶
- 类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)介导的基因组定点修饰技术被引量：53
- 2013年
- 人工构建的序列特异性核酸内切酶能够识别并切割特定的DNA靶序列,造成双链断裂,从而引起基因组结构的定点改变。人工核酸内切酶技术使得研究人员有可能对任意物种的基因组进行定点修饰,开启了反向遗传学研究的新天地。类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)自2010年底开始成功应用于基因打靶,很快成为一种比锌指核酸酶(Zinc-finger nuclease,ZFN)更容易设计、特异性更高和毒性更低的人工核酸内切酶。文章综述了TALEN技术的研究进展及应用前景,重点介绍TALEN的结构、作用机制与构建方法和利用TALEN进行基因组定点修饰的策略,以及目前利用这一技术已成功实现突变的物种及内源基因,特别是在斑马鱼中的应用,为开展这一领域的研究工作提供参考。
- 沈延肖安黄鹏王唯晔朱作言张博
- 猪多能性干细胞与人类遗传疾病模型被引量：1
- 2015年
- 由于猪在机体解剖结构、器官大小、生理功能和病理特征等方面与人相似,因此猪不仅是重要的肉用家畜,还具有重要的人类医学模型价值。"十二五"期间国家重大科学研究计划在干细胞领域设立了"诱导多功能干细胞(i PS)猪与小型猪疾病模型"重大科学问题导向项目。项目组在过去的5年时间里开展了大量的探索性科研工作,取得了一系列的科研成果。本文围绕项目组开展的科研工作进行了综述,从领域的研究背景、世界前沿进展、项目组取得的主要进展、仍存在的问题以及未来的发展方向等方面进行阐述,希望本文有助于全社会理解猪多能性干细胞和人类疾病模型猪相关工作的重要意义和在我国的发展状况。
- 刘忠华
- 关键词：胚胎干细胞基因工程疾病模型
- TALEN构建与斑马鱼基因组定点突变的实验方法与流程被引量：22
- 2013年
- 类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)是最近发展起来的一类新型的人工核酸内切酶,它由特异性的TALE DNA结合结构域和非特异性的FokⅠ核酸内切酶切割结构域组成。TALEN能够根据用户需要切割特定的核苷酸靶序列,造成DNA双链断裂,从而诱导该靶序列产生indel突变,目前已成功地应用于多个物种或体外培养细胞的基因组定点突变。文章介绍TALEN靶点的选择与确认,采用"单元组装法"构建人工TALEN的原理与步骤,以及通过显微注射TALEN mRNA诱导并筛选斑马鱼突变体的实验流程与经验。这些方法理论上也适用于对其他物种进行基因打靶。
- 沈延黄鹏张博
- 关键词：基因打靶
