北京市自然科学基金(7022018)
- 作品数：14 被引量：34H指数：3
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- 甲基强的松龙上调受损视网膜节细胞内Hsp27蛋白的表达被引量：4
- 2006年
- 目的研究甲基强的松龙(MP)上调热休克蛋白(Hsp27)蛋白对受损中枢神经元自我保护及修复机制的激发和增强作用,为进一步促进受损中枢神经元存活和纤维再生创造有利的条件。方法建立中枢神经损伤模型(视神经眼眶内切断术),经或未经MP治疗的术后动物分别存活4、7 14、21、28 d,取视网膜,切片,Nissl染色观察视网膜节细胞(RGCs)形态和存活数量的变化,用免疫组织化学染色的方法观察节细胞层中Hsp27的表达(检测A值)。用SAS软件对数据进行统计学处理。结果MP治疗组可见受损RGCs在71、4 d的存活数量增多,有统计学意义(P<0.01),在受损RGCs表达增多的Hsp27表达更加强烈(检测A值)。RGCs存活率与A值在各个时间点的变化趋势相似。结论MP可使具有保护作用的Hsp27表达上调,从形态学角度提示了MP可能激发并增强受损中枢神经的自我保护及修复机制。
- 裴群羽杨磊王珂杨立元周长满雷季良
- 关键词：视网膜节细胞热休克蛋白27免疫组织化学染色
- 大鼠自体嗅黏膜移植修复胸髓损伤:形态学和行为学的验证被引量：1
- 2006年
- 目的:采用自体嗅黏膜作为组织供体修复脊髓损伤,从形态学和行为学角度验证嗅成鞘细胞移植治疗脊髓损伤的作用及效果,为应用自体嗅成鞘细胞移植治疗临床脊髓损伤提供实验依据。方法:实验于2002-06/2004-10在北京大学基础医学院解剖学与组织胚胎学系中枢神经发育与再生研究室完成。选取清洁级6周龄雄性SD大鼠18只,随机分为自体嗅黏膜移植组10只,冻融对照组8只。两组均建立脊髓损伤模型,自体嗅黏膜移植组取位于鼻中隔后上部的嗅黏膜移植于脊髓损伤处,冻融对照组将自体嗅黏膜冷冻于-20℃冰箱5min,取出后室温放置5min解冻,重复5次后将冻融自体嗅黏膜移植于脊髓损伤处。术后6周于脊髓损伤节段上下各5mm处取材,片厚20μm。然后两组分别以神经丝蛋白和神经生长因子受体蛋白免疫荧光双标染色、激光共聚焦显微镜检测移植效果。免疫组织化学染色观察移植嗅黏膜与周围组织的生长情况。通过BBB行为学评分对两组动物后肢恢复功能进行评估。结果:实验选取SD大鼠18只,全部进入结果分析。①免疫组织化学摄片观察移植细胞在脊髓组织中再生情况:自体嗅黏膜移植组有部分空洞形成,但有部分神经纤维穿过移植区,可见神经生长因子受体蛋白免疫反应阳性的嗅成鞘细胞呈束状排列。冻融对照组无再生纤维通过且形成较大空洞,神经生长因子受体蛋白p75免疫组化反应阴性。②两组大鼠的神经丝蛋白和神经生长因子受体蛋白免疫荧光双标染色结果:自体嗅黏膜移植组免疫荧光标记纤维中夹有神经生长因子受体蛋白p75标记的存活的嗅成鞘细胞,细胞随标记的神经丝蛋白纤维走行方向排列,与宿主组织愈合良好。冻融对照组未见神经生长因子受体蛋白p75标记的嗅成鞘细胞以及神经丝蛋白标记的再生纤维,且形成较大空洞。③两组大鼠手术前后行为学评分结�
- 陈庆山陈欣杨磊王珂石献忠孙宇潘胜发于恩华周长满
- 关键词：神经组织蛋白质类神经纤维神经再生染色法
- 自体嗅黏膜移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究被引量：6
- 2003年
- 目的 观察自体嗅黏膜植入大鼠脊髓后的变化及其对轴突再生的修复作用。探索临床自体嗅黏膜移植修复脊髓损伤的可能性。 方法 成年雄性Wistar大鼠随机分为嗅黏膜移植组和对照组各 2 0只。嗅黏膜移植组取鼻中隔后部的嗅黏膜组织 (1mm2 )植入自体大鼠脊髓颈 1节段后索内的皮质脊髓束缺损处 (2mm× 1 5mm) ;对照组取鼻腔呼吸区黏膜植入脊髓同样的损伤处。 4～ 6周处死动物 ,移植区冰冻水平切面 ,免疫荧光双标神经丝蛋白 (NF)和神经生长因子受体蛋白 (NGFRp75 ) ,Confocal显微镜下观察 ,另行免疫组织化学染色观察移植嗅黏膜与周围组织的生长情况。 结果 对照组大鼠的损伤处有明显空洞 ,呼吸区黏膜内未见p75染色 ;嗅黏膜移植组可见p75标记的植入的嗅黏膜与周围组织愈合良好 ,空洞明显减少 ,被标记的嗅成鞘细胞向神经组织浸润生长 ,在移植物内有大量被标记的纤细的不分叉的NF纤维穿过。
- 杨晓梅陈庆山周长满杨磊于恩华
- 关键词：脊髓损伤
- Nogo受体(N-20)在大鼠视神经损伤后视网膜的表达被引量：2
- 2004年
- 观察Nogo受体(NgR)在Wistar大鼠视神经(ON)损伤后视网膜各层的表达变化及分布规律,为Nogo蛋白抑制中枢神经再生的理论提供形态学依据。本实验各组动物均采用眶内眼球后2 mm ON切断术,术后动物分别存活3 d和7 d后取视网膜固定、冰冻后做水平切片,用免疫组织化学的方法观察NgR的表达情况。结果显示:NgR在正常对照组视网膜内3层有表达;在切断ON后实验各组有强烈表达;各组在损伤ON和移植神经组织后存活3 d时也有强烈表达,至7 d时表达有所下降。以上结果表明:NgR在大鼠ON损伤后视网膜的表达位于节细胞层、神经纤维层和内网层;其表达程度与移植物的种类有关,并可随存活时间的延长而下降。
- 雷季良陈白羽栾丽菊杨磊王珂杨立元于恩华
- 关键词：视网膜视神经损伤存活移植物NOGO受体NOGO蛋白
- 碱性成纤维细胞生长因子对成年大鼠嗅黏膜成鞘细胞增殖的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对于纯化后的嗅黏膜成鞘细胞 (OECs)增殖的促进作用 ,探讨嗅黏膜OECs的增殖特性。 方法 应用差速贴壁和酶消化法对原代培养的嗅黏膜OECs进行纯化 ,用BrdU掺入法观察bFGF对嗅黏膜OECs增殖率的影响。 结果 在没有特定刺激因子作用时 ,嗅黏膜OECs本身有一定的增殖率 ,而加入 10 μg/L的bFGF对嗅黏膜OECs有一定的促增殖作用。 结论 在体外培养条件下 ,bFGF能提高嗅黏膜OECs的增殖率。
- 王君王珂于恩华周长满
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子增殖
- 信号转导子与转录激活子3蛋白在金黄地鼠视网膜生后早期发育过程中的表达被引量：2
- 2005年
- 目的 观察信号转导子与转录激活子 3(STAT3)蛋白在金黄地鼠视网膜生后早期发育过程中的表达。 方法 STAT3蛋白免疫细胞化学染色和Western免疫印迹方法 结果 生后发育早期整个视网膜神经层均有STAT3阳性产物分布 ,以视网膜节细胞层 (GCL)、内网层 (IPL)和成神经细胞层 (NBL)的内层更明显 ,随着发育进程 ,其阳性产物逐渐局限于视网膜节细胞的胞浆和胞核 ;蛋白半定量结果显示 ,生后 1周内STAT3蛋白表达水平较高 ,之后逐渐降低 ,成年后最低。 结论 STAT3蛋白的表达及变化可能与视网膜生后早期发育密切相关。
- 张艳于恩华刘猛
- 关键词：STAT3蛋白视网膜生后发育金黄地鼠
- 原代培养大鼠嗅球成鞘细胞Nogo(N-18)的共聚焦激光扫描显微镜观察被引量：3
- 2003年
- 目的 观察原代培养的成年大鼠嗅球成鞘细胞 (OECs)Nogo(N 18)蛋白的表达 ,探讨Nogo与成鞘细胞促进神经再生作用的关系。 方法 原代培养嗅球OECs,采用免疫组织化学和双标免疫荧光细胞化学技术 ,结合激光共聚焦扫描显微镜观察。 结果 原代培养的嗅球OECs的Nogo(N 18)免疫细胞化学反应呈阳性 ,Nogo(N 18)蛋白主要分布于胞浆 ,而在胞膜及突起分布较少。 结论 嗅球 (OECs)含有Nogo A蛋白 ,提示Nogo
- 王君王珂周长满于恩华
- 关键词：细胞培养共聚焦激光扫描
- 视神经切断术后视网膜内信号转导子与转录激活子STAT3蛋白的表达变化被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨视神经损伤后 ,信号转导子与转录激活子 (STAT3)蛋白在视网膜内表达和分布的变化。方法 免疫细胞化学、Westernblot及计算机图像分析技术。 结果 视神经切断术后 ,视网膜内STAT3表达水平上调 ,术后 1d达到高峰 ,并出现核转位增多现象。 5d后STAT3水平逐渐下降至正常。 结论 Janus激酶 信号转导子与转录激活子 (JAK STAT)信号转导途径可能通过STAT3蛋白的活化 。
- 刘猛张艳陈白羽于恩华
- 关键词：视网膜神经切断术金黄地鼠
- 成年大鼠嗅黏膜嗅成鞘细胞的纯化
- 2005年
- 王珂雷季良王君于恩华
- 关键词：嗅成鞘细胞嗅黏膜成年大鼠OECS纯化嗅球
- 锥体束损伤后不同时间点脑内锥体束神经元热休克蛋白27表达的变化被引量：1
- 2004年
- 目的:探讨大鼠锥体束损伤后不同时间点脑内锥体束神经元热休克蛋白27表达的变化。方法:制作大鼠锥体束损伤模型,分别在损伤后3,7,14,28d用免疫组织化学方法检测热休克蛋白27在大鼠脑内初级运动皮质锥体束神经元的表达,分析其表达变化的特点。结果:锥体束损伤3d,HSP27在大多数锥体束神经元中呈强阳性表达,阳性神经元数目为(252±25)个/视野,与对照组(97±18)个/视野比,差异有非常显著性意义(t=10.262,P<0.01),7d时仍维持较高水平(t=2.513,P<0.05),以后则逐渐下降。结论:HSP27的表达随时间而变化,提示其参与了神经系统受损后早期神经元的保护和修复。
- 陈庆山陈欣杨磊唐澍孙丹张剑钊崔扬张晓蕾李菁
- 关键词：神经元热休克蛋白27免疫组织化学
