国家自然科学基金(30572144)
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 相关作者：肖文华李宏涛梁后杰李文梅杜楠更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院第一附属医院第三军医大学西南医院北京市肿瘤防治研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝癌细胞系中DNA甲基转移酶和HLAⅠ类分子的表达及意义被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨甲基转移酶(DNMT)3a及HLAⅠ类分子在肝癌细胞系中表达及意义。方法:提取HepG2、MHCC97L、MHCC97M3、SMMC7421和BEL7402的mRNA,应用RT-PCR及实时定量PCR检测DNMT及HLA的表达情况。结果:RT-PCR显示,在5个肝癌细胞系中DN-MT1和DNMT3b均高表达。而DNMT3a在高转移的MHCC97M3中的表达低于其他细胞。另外,HLA-A、HLA-B和HLA-C则普遍低表达。定量PCR示,DNMT3a在MHCC97L中的相对表达量为1,在MHCC97M3中为0.33。同时,前者的HLA-A、HLA-B和HLA-C的相对表达量分别为4、4.199和3.9,而在后者中分别是2.129、2.621和2.55。结论:在相同的遗传背景下,DNMT3a和HLAⅠ类分子的高表达与肝癌细胞系的低转移能力相关。
- 李宏涛梁后杰李文梅肖文华
- 关键词：肿瘤转移
- 三种DNA甲基转移酶在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义
- 2009年
- 目的:探讨肝细胞癌组织中三种甲基转移酶(DNMT)蛋白表达的差异及其临床意义。方法:收集38例肝癌标本,取癌区组织各3块,制作组织芯片,应用免疫组化SP法分析肝癌组织中DNMT蛋白的表达,并分析其与肝癌各临床、病理参数间的关系。结果:在38例肝癌组织中,DNMT1、DNMT3a和DNMT3b蛋白的表达阳性率分别为55.3%、48.5%和65.8%。DNMT蛋白质着色主要分布在细胞核,散在分布于胞浆。DNMT1蛋白质表达与门脉癌栓和肿瘤无包膜等参数显著相关;组织中DNMT1表达与DNMT3b表达具有相关性,二者同时表达与门脉癌栓和肿瘤无包膜等参数显著相关。但三种DNMT蛋白的阳性表达与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度和淋巴结转移无显著相关性(P>0.05)。结论:肝细胞癌组织中存在三种DNMT蛋白的过表达,DNMT1和DNMT3b的高表达与门脉癌栓和肿瘤无包膜等参数显著相关,二者协同作用可能在肝癌的发生和发展中起重要作用。
- 李宏涛肖文华梁后杰
- 关键词：肝细胞癌DNA甲基转移酶免疫组织化学
- 肝细胞癌组织中HLA-DR,-DQ的表达及其意义
- 2011年
- 目的探讨人白细胞抗原(HLA)-DR和-DQ分子在肝细胞癌的表达及其意义。方法采用免疫组化法分别检测HLA-DR和HLA-DQ抗原在38例人肝癌组织芯片中的表达情况,并和临床病理资料进行相关性分析。结果肝癌组织中HLA-DR和HLA-DQ抗原信号主要定位于细胞浆。HLA-DR的阳性率为5.3%(2/38),HLA-DQ的阳性率为92.1%(35/38),但在4例伴淋巴结转移的肝癌中,3例无HLA-DQ的表达,HLA-DQ表达与肝癌的淋巴结转移负相关(P<0.0001)。HLA-DR和HLA-DQ表达与年龄和肝癌的组织分化无相关性(P>0.05)。结论 HLA-DQ的表达在肝癌组织中很常见,无HLA-DQ的表达可能提示与淋巴结转移有关。
- 李宏涛肖文华李秋文郝怡鑫朱建华王如良叶明
- 关键词：HLA-DRHLA-DQ肝癌免疫组织化学
- 辐射与化疗诱导Egr-1启动子调控GM-CSF基因表达的实验研究
- 2009年
- 目的探讨辐照与阿霉素诱导早期生长反应因子（Egr-1）启动子调控造血生长因子基因表达对造血损伤的恢复作用。方法构建携带Egr-1启动子且下游连接GM-CSF和EGFP基因的真核表达载体（Egr-EG）；脂质体介导转染人骨髓基质细胞系HFCL；经^60Coγ源辐照2.5Gy或3μmol/L的阿霉素处理后，采用FACS检测转染细胞绿色荧光蛋白的表达，N-乙酰半胱氨酸（活性氧抑制剂）鉴定辐照及阿霉素处理诱导Egr-1调控下游基因表达的特异性；采用ELISA和RT-PCR检测辐照或阿霉素对HFCL／EG细胞GM-CSF蛋白及mRNA表达的影响；观察辐照及阿霉素处理后的细胞上清对CFU-GM形成的影响。结果在辐照和阿霉素处理的HFCL／EG细胞中均显示EGFP和GM-CSF表达较未处理组明显增强（t=5.11，P〈0.01），未处理组EGFP^＋细胞占1.2％，阿霉素组EGFP^＋细胞占15.2％，辐照组EGFP^＋细胞占18.2％；N-乙酰半胱氨酸明显减少辐照和阿霉素处理后细胞的绿色荧光蛋白表达强度，两组间差异无统计学意义（P〉0.05）；辐照和阿霉素处理组细胞上清促进CFU-GM增殖作用较未处理组明显增强（t=4.37，P〈0.01）。结论辐照和阿霉素诱导Egr-1启动子调控的造血生长因子基因表达可能对其所致的造血损伤具有一定的恢复作用。
- 杜楠裴雪涛周进明孙君重付艳赵晖
- 关键词：电离辐射阿霉素粒-巨噬细胞集落刺激因子
- 半抗原修饰的黑素瘤细胞激活树突状细胞诱导特异性T细胞反应被引量：3
- 2006年
- 目的:探索半抗原[二硝基氟苯(DNP)]修饰的恶性黑素瘤细胞(恶黑)激活树突状细胞(DC)体外诱导特异性T细胞反应的抗肿瘤效应。方法:采用DNP修饰恶黑细胞B16(H-2b),然后在体外激活C57BL/6小鼠(H-2b)外周血来源的DC,观察其诱导T细胞的增殖和特异性T细胞杀伤功能;在小鼠皮肤迟发性超敏反应实验和荷瘤实验中观察DNP修饰瘤苗+DC的特异性。结果:经DNP修饰的B16细胞激活的DC,诱发T细胞增殖能力和对B16细胞的特异性杀伤效应均明显高于未修饰的B16细胞和DC。动物实验显示DNP修饰瘤苗联合DC具有明显的诱发皮肤迟发性超敏反应作用和抑瘤作用。结论:DNP修饰B16所激活的DC可以诱导更强的恶黑特异性T细胞效应。
- 杜楠李留树肖文华唐卓斌孙同柱
- 关键词：半抗原二硝基氟苯树突状细胞黑素瘤细胞
- DNA甲基转移酶基因干扰对HepG2细胞癌-睾丸抗原再表达的影响
- 2009年
- 目的探讨抑制甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)对肝细胞癌细胞中癌-睾丸抗原表达的影响及相关机制。方法分别采用针对DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3a+3b),针对DNMT1和DNMT3a的siRNA(DNMT1+3a),针对DNMT1和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3b)以及针对DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT3a+3b)转染HepG2细胞,并以使用5-杂氮脱氧胞嘧啶(5-Aza-dC)处理的细胞作为阳性对照,采用RT-PCR、实时定量PCR和Western blotting检测细胞中DN-MT及癌-睾丸抗原的表达情况,并采用甲基化特异PCR(MSP)检测部分癌-睾丸抗原基因启动子的甲基化状态。结果经siRNA干扰后,细胞中DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达量均明显降低。癌-睾丸抗原CT10和SSX1在转染DNMT1+3a和DNMT1+3b的细胞中出现再表达,而MAGE1及MAGE3在各siRNA转染细胞中均有表达,且无明显差异。CT10的启动子区发生了去甲基化,但MAGE1启动子区处于非甲基化状态。结论在HepG2细胞中,干扰DNMT可使癌-睾丸抗原基因的启动子区发生去甲基化,后者可使由甲基化导致的不能表达的癌-睾丸抗原基因发生再表达。
- 李宏涛梁后杰李文梅肖文华
- 关键词：甲基转移酶类癌-睾丸抗原
