国家自然科学基金(39670774) 作品数:12 被引量:17 H指数:3 相关作者: 蔡浩然 王红 温晓红 朱丹 朱丹 更多>> 相关机构: 北京大学第一医院 内蒙古医学院附属医院 北京医科大学第一临床医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
幼年非洲爪蟾视顶盖区突触前、后膜上受体间的相互作用 2004年 目的 记录幼年非洲爪蟾视顶盖区第六层神经元的自发性微突触后电流 (mPSCs)。 方法 应用盲法电压膜片钳全细胞记录技术。 结果 观察到用谷氨酸受体激动剂NMDA灌流脑片后先引起mIPSCs的频率明显增加并出现内向膜电流及高频的mEPSCs,经一段时间洗脱后mIPSCs和mEPSCs又均完全消失 ,而膜电流恢复到原来未加NMDA前的水平。GABA受体的激动剂GABA可诱发明显的外向膜电流。GABAa受体拮抗剂荷包牡丹碱 (bicucullin ,BM)不仅能将mIPSCs全部抑制掉 ,并且还可以诱发mEPSCs。谷氨酸受体的拮抗剂APV对mPSCs亦有类似的作用 ,不仅可以抑制顶盖神经元的mEPSCs,而且可以使原有的mIPSCs的频率和振幅均增加。 结论 幼年期的突触前、后膜上既有兴奋性谷氨酸能受体也有抑制性γ 氨基丁酸能受体 ,而且在突触前膜上受体可以调制突触末梢神经递质的释放。因此突触前、后膜上的受体间存在相互作用 ,以确保突触前后活动和功能上的稳定 ,从而达到神经网络的平衡。 刘燕 温晓红 管永清 蔡浩然关键词:受体 相互作用 脑片 爪蟾视觉发育过程中抑制性GABAa受体功能的变化(英文) 被引量:1 2003年 目的 :阐明从幼年 (变态脱尾后 2~ 12周 )到成年 (变态脱尾后 5~ 10月 )爪蟾的视顶盖神经元突触受体变化。 方法 :盲法脑片全细胞电压钳技术。结果 :成年视顶盖神经元的微抑制性突触后电流 (mIPSCs)的发放频率 (Hz)和平均振幅 (pA)分别为 2 .6 5± 0 .6 9和 9.82± 1.30 ,而幼年的分别为 0 .6 8± 0 .2 3和 15 .36± 2 .4 0 ,其中成年动物的mIPSCs的频率是幼年频率的 3.90倍 ;乙酰胆碱受体 (nAChR)激动剂carbachol均可使幼年及成年的mIPSCs频率增加 ,增强效率有所不同 ,幼年增加至对照组的 192 .0 % ,而成年组仅为 14 6 .2 %。 结论 :随着视顶盖神经元的成熟 ,其突触GABAa受体功能也相应增强。 王红 温小红 蔡浩然关键词:爪蟾 GABAA 受体功能 视顶盖 电压钳 视顶盖神经元的两种振荡模式(英文) 被引量:1 2009年 本文旨在应用离体全细胞膜片钳技术,记录和分析爪蟾视顶盖神经元阈下振荡活动。长时程的去极化电流可以诱发两种模式的阈下振荡,一种振荡是叠加在慢内向电流(slow inward current,SIC)之上的,另一种振荡则不伴有SIC。在本实验中,去极化能诱发阈下振荡的细胞占所记录神经元的48%。振荡活动和SIC都是河豚毒素耐受的,而在无钙溶液中浸泡的脑片未记录到振荡和SIC。振荡活动的诱发依赖膜电位初始水平和变化幅度,只有当神经元的钳制电压从-40mV、-50mV或更低的初始水平去极化10mV时,才能诱发阈下振荡。SIC的幅度和时程依赖于膜电位的初始水平。本文报导的阈下振荡可能在蛙的生理和行为功能(如模式辨认,猎物识别和逃避行为等)方面起重要作用,进而也有可能在哺乳类和非哺乳类脊椎动物的神经活动整合中发挥作用。 蔡浩然 李琳 朱丹 王红关键词:去极化 膜片钳 非洲爪蟾 细胞外Ca^(2+)对爪蟾脑片神经元微抑制性突触后电流的调制 被引量:6 2003年 应用盲法膜片钳全细胞记录技术,以爪蟾视顶盖神经元微抑制性突触后电流(miniature inhibitory postsyn-aptic currents,mIPSCs)为指标,观察了细胞外 Ca^(2+)对爪蟾脑片神经元突触后 mIPSC的调制。结果表明:用细胞外无钙或无钙含乙二醇双乙胺醚-N,N’-四乙酸(EGTA)(200 nmol/L-2mmol/L)溶液灌流,均可使mIPSCs的发放频率降低;非特异性钙离子拮抗剂氯化铬(100μmol/L)也可使mIPSCs的频率降低;内质网钙泵抑制剂thapsigargin (TG)以及内质网ryanodine受体(RyR)激动剂ryanodine均可使mIPSCs频率升高,内质网RyR拮抗剂普鲁卡因则可降低mIPSCs的频率;磷脂酶C抑制剂U73122也可降低mIPSCs的频率,对三磷酸肌醇(inositol,4,5-triphosphate,IP_3)水平有抑制作用的咖啡因亦可显著地降低mIPSCs,甚至完全抑制mIPSCs。从而表明:对突触前神经元及其末梢,细胞外钙离子可通过细胞膜上的钙通道进入细胞内,使细胞内钙浓度升高,突触前神经末梢释放出更多的神经递质,进而可能使突触后mIPSCs的频率增加;突触前细胞内钙储池上的RyR和IP_3R均可介导钙从其中释放,并也可使突触前细胞内的钙离子浓度升高,进而可能使突触后mIPSCs的发放频率增加。 王红 蔡浩然关键词:脑片 Modulation of presynaptic nAChRs on postsynaptic GABA receptor in optic tectum of juvenile Xenopus 被引量:3 2003年 Using the blind patch-clamp technique with the whole-cell mode, we have studied the modulation of pre-synaptic receptor on postsynaptic g-aminobutyric acid (GABA) receptor measuring miniature inhibitory postsy-naptic currents (mIPSCs) in optic tectum of Xenopus during critical peroid. It was demonstrated that compared with mature neurons, mIPSCs recorded from immature neurons had smaller amplitude and longer decay time. mIPSCs are mediated by GABAa receptor. The nicotinic acetylcholine receptor agonists (carbachol, cytisine, nicotine, DMPP and so on) could increase the frequency of mIPSCs. The enhance-ment of mIPSCs frequency induced by nAChR agonists was calcium-dependent. However, the choline, a product of hy-drolyzed acetylcholine, could not increase the frequency of mIPSCs. DH-b-E, a competitive antagonist of nAChR, blocked the increase of mIPSCs frequency induced by car-bachol. Mecamyllamine, an a3b4 subtype of nAChR antago-nist, also blocked the carbachol-induced enhancement of mIPSCs. On the other hand, MLA, a7 subtype of nAChR antagonist, had no effect on it. Thus, it seems that nAChR could presynaptically modulate the mIPSCs and a3b4 sub-type of nAChR might be involved. But a7 nAChR subtype of nAChR would not be involved. The modulation is calcium- dependent. Meanwhile, we found that Ca2+-free solution could elicit giant PSCs. The frequency of mIPSCs also is related with the level of HP. WANG Hong & CAI Haoran (TSAI Haojan) First Hospital, Peking University, Beijing 100034, China Correspondence should be adressed to Cai Haoran (e-mail: hjtsai@ sun.bjmu.edu.cn)关键词:突触后 离体成年非洲爪蟾视顶盖区突触后电流的研究 被引量:3 2001年 用盲法对成年非洲爪蟾视顶盖区的自发微突触后电流 (mPSCs)进行全细胞膜片钳记录 ,观察到了突触后膜有分别由AMPA受体和GABA受体介导的微兴奋性突触后电流 (mEPSCs)和微抑制性突触后电流(mIPSCs) ,mIPSC的发放频率远高于mEPSC ,GABA受体的阻断剂荷包牡丹碱 (bicuculline ,BM)却能使mEPSC的振幅增加。可能是由于成年期AMPA受体介导的兴奋性活动受到同处于突触后膜的抑制性GABA受体的制约。尽管因NMDA受体的效能大大下降而记录不到自发电流中的NMDA成分 ,但远高于生理浓度的外源性NMDA可以诱发去极化的宏电流 ,说明突触后膜的确仍有NMDA受体存在。而muscimol则能诱发超极化宏电流 ,这也表明突触后膜上有GABA受体存在。估计各种受体的一系列变化 。 温晓红 蔡浩然关键词:突触后电流 脑片 盲法 非洲爪蟾 幼年爪蟾突触前ACh受体对视顶盖神经元突触后膜GABA受体的调制 2003年 应用盲法膜片钳全细胞记录技术,以微抑制性突触后电流(miniature inhibitory postsynapticcurrents,mIPSCs)为指标,对敏感期内爪蟾突触前尼古丁乙酰胆碱受体(nAChR)调制视顶盖神经元突触后膜的GABAa受体的活动进行研究.结果表明,与成年神经元相比,从未成年动物神经元记录到的mIPSCs的振幅较小,下降时间较长.mIPSCs是由GABAa受体介导的.AChR激动剂(carbachol,nicotine,DMPP和cytisine等)均可使mlPSCs的频率增加,且carbachol的怍用需要Ca2+介导;而乙酰胆碱水解产物choline却无此作用;AChR竞争性拮抗剂DH-β-E能够拮抗carbachol诱发的mIPSCs频率增加,α3β4亚型AChR拮抗剂mecamyllamine也可以拮抗这一怍用,而在低浓度下对α7亚型AChR特异拮抗的MLA却没有这种拮抗作用.因此,乙酰胆碱以Ca2+依赖的方式参与了mIPSCs的突触前调制,其中可能主要涉及AChR的α3β4亚单位,但可能不涉及α7亚单位.同时还观察到,无Ca2+灌流可以导致巨形PSCs的出现,钳位电压对mIPSCs频率亦有调制作用. 王红 蔡浩然关键词:爪蟾 突触前 突触后膜 GABA受体 视顶盖 非洲爪蟾顶盖神经元的抑制性微突触后电流频率和振幅的电压依赖性 2006年 采用全细胞记录膜片钳技术,研究非洲爪蟾脑片视顶盖神经元微突触后电流(miniature inhibitory postsynaptic current, mIPSC)频率和振幅对电压依赖关系。观察到以下结果:(1)当通过改变记录电极内的DC电流,将神经元的膜电位从静息电位逐步(每步10 mV的增量)去极化或超极化时,mIPSC的频率和/或振幅分别升高或降低。随着膜电位的去极化,mIPSC的频率逐渐升高;当钳位电压升至+10 mV时,mIPSC的频率达到最高值。(2)当神经元去极化时,振幅仅轻微升高。膜电位去极化达到-30 mV或-40 mV时,mIPSC的振幅最大;进一步去极化,振幅反而下降。另外,在膜电位去极化至-20 mV 和+10 mV之间时,可记录到大的mIPSC。(3)在无Ca2+浸浴液中,mIPSC的频率和振幅也随膜电位的去极化而逐步增高,但频率的增高幅度远不如在生理盐水浸浴中增高幅度明显。(4)当浸浴液中[K+]o增高时,mIPSC的频率明显降低,而振幅轻微降低。当细胞外[K+]o浓度升高超过20 mmol/L时,神经元产生明显的缓慢内向或外向膜电流。mIPSC频率和振幅与膜电位存在依赖性的可能机制在文中作了简短的讨论。 朱丹 艾育德 蔡浩然关键词:电压依赖性 脑片 去极化 膜电位 非洲爪蟾 不同类型儿童弱视的视觉眼电图研究 被引量:1 2000年 目的 :探讨不同类型弱视在视网膜水平的改变。方法 :对 4种类型的弱视儿童 86例分别进行V -EOG测试 ,并与正常对照组进行比较分析。结果 :形觉剥夺性弱视组的光峰电位、电势差值和Arden比明显偏高 ;屈光参差性弱视组光峰电位偏低 ,光峰时间延长 ;屈光不正性弱视组中 ,近视屈光状态者暗谷电位增大 ,Arden比与Gliem比偏低 ,远视屈光状态者则无明显变化 ;斜视性弱视组各参数未见明显差异。结论 :提示在视网膜水平不同类型的弱视可能存在不同的发病机理。 朱丹 朱赫 郭静秋 蔡浩然关键词:儿童 弱视 视觉眼电图 发病机理 幼年爪蟾视顶盖神经元微兴奋性突触后电流的一些特性 被引量:1 2002年 以微兴奋性突触后电流 (miniatureexcitatorypostsynapticcurrents,mEPSCs)为指标 ,采用盲法膜片电压钳全细胞记录技术 ,研究敏感期内爪蟾视顶盖神经元突触前受体调制突触后mEPSCs的作用。结果发现 ,mEP SCs可以被NMDA受体特异性阻断剂APV和 (或 )AMPA/KA受体特异性阻断剂CNQX所阻断 ,NMDA受体激动剂NMDA可以诱发内向突触后电流。与成年神经元相比 ,未成年动物神经元的mEPSCs的下降相时间较长 ,mEPSCs的NMDA成分较多 ,而AMPA成分较少。尼古丁乙酰胆碱受体激动剂 (carbachol,nicotine和cytisine)可使mEPSCs的频率增加 ,且carbachol使频率增加作用需要Ca2 +介导 ;而乙酰胆碱水解产物choline亦有此作用 ;尼古丁乙酰胆碱受体的竞争性拮抗剂DH β E能够拮抗carbachol诱发的mEPSCs频率增加作用 ;α3β4亚型尼古丁乙酰胆碱受体拮抗剂mecamyllamine不能拮抗carbachol诱发的mEPSCs频率增加作用 ,但在低浓度下对含有α7亚单元尼古丁乙酰胆碱受体起特异拮抗作用的MLA却有这种拮抗作用 ;同时我们还观察到 ,无Ca2 +灌流可以导致巨型PSCs的出现 ,无镁液可以使mEPSCs的下降相延长。结果表明 ,mEPSCs是由NMDA受体和AMPA/KA受体共同介导的 ,尼古丁乙酰胆碱受体以Ca2 +依赖的方式参与了mEPSCs的突触前调制 。 王红 蔡浩然关键词:视顶盖 脑片 NMDAR MACHR