国家自然科学基金(30572117)
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤相关线粒体蛋白12对肝癌细胞凋亡的抑制作用
- 2009年
- 目的:探讨肿瘤相关线粒体蛋白12(TAMP12)对肿瘤细胞凋亡的抑制作用。方法:(1)构建重组逆转录病毒表达载体并转染包装细胞PA317,将获得的病毒颗粒感染TAMP12低表达的肝癌细胞株HepG2。应用RT-PCR检测TAMP12 mRNA表达变化;激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察双色荧光标记蛋白的亚细胞定位和定量表达。(2)应用Hoechst 33258染色和FACS检测5-氟尿嘧啶(5-FU)处理后对诱导HepG2细胞凋亡的影响。结果:(1)CLSM检测显示TAMP12主要表达于HepG2细胞线粒体中。转染细胞中TAMP12基因和蛋白呈稳定高表达。(2)5-FU诱导细胞发生凋亡后,转染细胞的核形态较为完整,但对照细胞的染色质发生凝聚、边缘化、核固缩;且FACS检测显示转染细胞的凋亡率显著低于对照细胞(P<0.05或P<0.01)。结论:TAMP12具有抑制肝癌细胞凋亡的作用。
- 金姝王俐王颖谢国化陈惠娟王树军张惠珍张勇葛瑜葛海良
- 关键词：线粒体逆转录病毒载体HEPG2细胞氟尿嘧啶细胞凋亡
- 肿瘤相关抗原线粒体蛋白12基因的RNA干扰对HeLa细胞的抑制作用被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨肿瘤相关抗原线粒体蛋白质12基因(tumor-associated antigen mitochondrial protein 12 gene,TAMP12)表达变化对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用。方法:利用计算机辅助设计并化学合成3对针对TAMP12的siRNA片段,通过脂质体法将siRNA转染于TAMP12高表达的HeLa细胞中,筛选有效的siRNA片段。以RT-PCR、实时定量PCR及流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞TAMP12 mRNA及蛋白表达的变化。以激光扫描共聚焦显微镜(confocal lyser scarning microscope,CLSM)观察双色荧光标记蛋白的亚细胞定位和定量表达。以3H-TdR掺入实验和FCM检测阻断TAMP12基因表达对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。结果:CLSM检测显示TAMP12蛋白主要表达在HeLa细胞线粒体中。转染siRNA-TAMP12的肿瘤细胞中TAMP12 mRNA及蛋白的表达显著降低,与对照组对比,抑制率分别为81%和87%(P<0.01);转染细胞的DNA合成受抑制,抑制率达42%(P<0.01);转染siRNA-TAMP12肿瘤细胞的凋亡率由对照细胞的8.14%上升到15.59%(P<0.01)。结论:RNA干扰可阻断TAMP12基因的表达,从而对人宫颈癌Hela细胞产生抑制作用。
- 丁永霞王树军张勇张惠珍王颖金姝沈天伟葛瑜葛海良
- 关键词：SIRNAHELA细胞线粒体凋亡
- SEREX筛选肿瘤抗原进展被引量：3
- 2006年
- 肿瘤抗原的鉴定是肿瘤免疫学的重要任务之一,也是肿瘤免疫治疗发展的必然途径。重组cDNA表达文库的血清学分析法(serological analysis of re-combinant cDNA expression library,SEREX)是一种重要的筛选肿瘤抗原的方法,为临床肿瘤标志物的筛选、鉴定及肿瘤疫苗的研制提供了重要的技术手段。
- 丁永霞葛海良
- 关键词：SEREX血清肿瘤抗原
- 亲环素A在肿瘤研究中的进展
- 2009年
- 亲环素A（CypA）广泛存在于多种组织和细胞，具有肽基脯氨酰顺反异构酶（PPIase）活性，最早发现其为免疫抑制剂环孢素A的细胞内受体。CypA在一系列生物学过程中发挥重要功能，如蛋白折叠、免疫抑制、与CD147相互作用以及细胞凋亡等。近年来的研究发现，CypA与一些肿瘤的发生发展存在密切的联系，特别是与肺癌、胰腺癌和肝癌等。进一步深入研究CypA在肿瘤生物学中的作用与分子机制具有重要意义，有可能成为肿瘤研究中一个新的关注点。
- 王庆飞王福庆葛海良
- 关键词：肿瘤亲环素A环孢素ACD147细胞凋亡
- 肿瘤相关线粒体蛋白12对移植瘤细胞增殖的影响
- 2008年
- 目的探讨肿瘤相关线粒体蛋白12(TAMP12)对小鼠移植瘤细胞增殖的影响。方法采用脂质体法将TAMP12基因及空载体转染肝癌细胞系SMMC-7721,经G418筛选获得稳定高表达TAMP12细胞株(SMMC-7721-TAMP12)及对照细胞(SMMC-7721-pcDNA3.1),实时定量PCR和蛋白印迹检测TAMP12在这两组细胞中的表达。将SMMC-7721-TAMP12和对照SMMC-7721、SMMC-7721-pcDNA3.1三组细胞分别接种于BALB/cnu/nu小鼠的前肢腋下,连续观察荷瘤小鼠中肿瘤的生长状况。接种4周后处死小鼠,取瘤块分别测量瘤体质量和体积,应用实时定量PCR和免疫组化方法检测三组移植瘤中TAMP12的表达;透射电镜观察移植瘤细胞中亚细胞器形态;并应用基因芯片技术检测三组移植瘤肿瘤细胞中的基因差异表达。结果将经实时定量PCR和蛋白印迹检测显示高表达TAMP12的SMMC-7721和对照细胞分别接种裸鼠后,三组荷瘤小鼠中肿瘤的生长曲线呈现明显差异,转染TAMP12的荷瘤小鼠中肿瘤生长速度明显快于对照组荷瘤小鼠。肉眼观察可见实验组肿瘤组织中血管较对照组丰富;电镜观察发现实验组的细胞分裂增殖明显。基因芯片显示,该基因的高表达可促进多个与细胞增殖相关的基因表达上调。结论TAMP12基因具有促进细胞增殖的作用,其机制可能与调节细胞增殖的胰岛素样受体介导的信号转导通路有关。
- 陈惠娟金姝王颖王树军张惠珍钱呈睿谢国化葛海良
- 关键词：肿瘤相关抗原细胞增殖基因芯片
- 趋化因子与肿瘤转移被引量：1
- 2008年
- 大量临床研究表明,在人体常见肿瘤如乳腺癌、肺癌、膀胱癌、大肠癌和黑色素瘤中趋化因子受体的表达通常出现上调。在肿瘤转移至重要器官以及区域淋巴结的过程中,趋化因子及其相应的配体扮演了重要角色。CXC21-CXCR4轴有助于肿瘤细胞转移至远处器官,而CCL12-CCR7轴则促使肿瘤细胞转移至淋巴结,这两个受体-配体对通常是介导肿瘤细胞转移的关键物质。因此,趋化因子抑制物在肿瘤治疗中有应用前景。
- 刘争春王福庆葛海良
- 关键词：趋化因子趋化因子受体肿瘤转移
- CD4^+CD25^+调节性T细胞与肿瘤免疫被引量：5
- 2007年
- CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)是维持机体免疫耐受的一种重要因素。它组成性表达IL-2受体α链(CD25),主要的功能是抑制自身反应性T细胞的活化和功能,调节机体对抗原的免疫应答,从而使机体避免发生自身免疫病。近年来研究表明,Treg也可能通过相同的机制削弱机体的抗肿瘤效应。Treg介导的免疫抑制是肿瘤逃逸的原因之一。针对Treg进行肿瘤免疫治疗是一项可行的策略。
- 陈惠娟葛海良
- 关键词：CD4^+CD25^+调节性T细胞肿瘤免疫治疗
- p53转录非依赖活性介导细胞凋亡被引量：8
- 2007年
- p53主要通过两条途径诱导细胞凋亡:p53作为转录因子,促进细胞凋亡的靶基因的表达上调,如PUMA、NOXA、PIDD、p53AIP1、COP1等,并通过这些蛋白参与内源和外源凋亡途径;另一方面,胞浆中的p53能转位到线粒体,激活内源性的线粒体途径,促进凋亡。后者已成为研究p53促凋亡机制的热点。本文就p53对转录非依赖活性诱导细胞凋亡途径的研究进展作一概述。
- 钱呈睿葛海良王颖
- 关键词：P53线粒体细胞凋亡
