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国家高技术研究发展计划(2006-AA10A117)
作品数:
2
被引量:11
H指数:2
相关作者:
夏庆友
邹勇
赵萍
侯勇
钟晓武
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相关机构:
西南大学
云南省农业科学院
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发文基金:
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相关领域:
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农业科学
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双向电泳
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细胞转染
机构
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西南大学
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云南省农业科...
作者
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刘敏
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杜娟
1篇
潘敏慧
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钟晓武
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侯勇
1篇
赵萍
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邹勇
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鲁成
1篇
夏庆友
1篇
张春东
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传媒
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蚕业科学
年份
2篇
2008
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阳离子脂质体转染家蚕培养细胞的技术体系研究
被引量:4
2008年
阳离子脂质体转染家蚕培养细胞是家蚕基因功能研究的重要技术之一。利用阳离子脂质体Lipofectamine2000与pBac[A3Neo+A3EGFP]转基因表达载体,对家蚕卵巢细胞BmN-SWU1、BmN-SWU2、BmN和草地贪夜蛾卵巢细胞Sf21进行了外源DNA质量、脂质体用量、转染细胞密度和转染孵育时间等4个转染条件的优化实验,筛选到了阳离子脂质体转染效率最高的细胞系BmN-SWU1。BmN-SWU1细胞的最佳转染条件为:外源DNA0.6μg,脂质体2.5μL,细胞密度1×105mL-1,无血清条件下孵育24 h。此条件下转染效率可达55.08%。用抗生素G418筛选转染后的BmN-SWU1细胞,建立了GFP转基因细胞系。
潘敏慧
刘敏
刘佳
杜娟
张春东
鲁成
关键词:
家蚕
阳离子脂质体
细胞转染
家蚕5龄第3天血液蛋白的双向电泳及质谱分析
被引量:7
2008年
基于为家蚕血液比较蛋白质组学的研究提供基础信息的目的,利用双向电泳技术对家蚕5龄幼虫的血液蛋白进行分析,并采用基质辅助质量飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对其中一些表达量较高的蛋白进行了肽质量指纹图谱分析鉴定。120μg血液蛋白经过双向凝胶电泳及考马斯亮蓝染色后可以检测出106个蛋白点,60μg血液蛋白经双向电泳及银染后可以检测出126个蛋白点,这些蛋白点主要集中在分子质量15~80kD区域,等电点4~7。MALDI-TOF MS鉴定的52个蛋白点中都有较强的肽质量指纹信号峰,其中成功鉴定了46个蛋白点。在这些蛋白中,不仅包含了SP贮存蛋白和30K低分子量脂蛋白等家蚕血液蛋白的主要成分,还包含了大量与代谢相关的蛋白酶类、蛋白酶抑制剂、离子转运蛋白、免疫相关因子、分子伴侣等不同种类的蛋白。
侯勇
赵萍
邹勇
钟晓武
夏庆友
关键词:
家蚕
血液蛋白
双向电泳
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