大庆高新区创新基金(DQGX08YF038)
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 相关作者：李士泽杨焕民赵雅楠高福久李玉恒更多>>
- 相关机构：黑龙江八一农垦大学天津农学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：大庆高新区创新基金公益性行业(农业)科研专项黑龙江省高等学校科技创新团队建设计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 谷氨酰胺和L-肉碱对低温下肉羊瘤胃纤维分解菌的影响被引量：8
- 2011年
- 本试验研究了饲粮中添加谷氨酰胺和L-肉碱对低温下肉羊瘤胃纤维素分解菌的影响,旨在了解谷氨酰胺和L-肉碱在减缓低温应激中的作用,为生产实践中应用抗应激剂提供理论依据和参考。试验选用9只健康东北细毛羊×德国肉用美利奴杂交肉羊,采用L9(34)正交试验设计,设3个谷氨酰胺水平(0、0.6%、1.2%)与3个L-肉碱水平(0、75、150m g/kg)。试验羊在低于正常饲养温度(由10℃降至0℃)条件下,饲喂添加不同水平谷氨酰胺和L-肉碱的饲粮。结果表明,谷氨酰胺有降低瘤胃白色瘤胃球菌相对含量的趋势(P>0.05),L-肉碱能显著降低瘤胃白色瘤胃球菌的相对含量(P<0.05),二者复合使用有缓解瘤胃白色瘤胃球菌相对含量下降的趋势;谷氨酰胺能显著提高瘤胃黄化瘤胃球菌相对含量(P<0.05),L-肉碱有提高瘤胃黄化瘤胃球菌相对含量的趋势(P>0.05),二者复合使用能进一步提高瘤胃黄化瘤胃球菌的相对含量(P>0.05);谷氨酰胺和L-肉碱有降低瘤胃产琥珀酸丝状杆菌相对含量的趋势(P>0.05),但二者复合使用有缓解瘤胃产琥珀酸丝状杆菌相对含量下降的趋势。结果提示:谷氨酰胺和L-肉碱在低温下复合使用能缓解瘤胃白色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌相对含量的下降,提高瘤胃黄化瘤胃球菌相对含量。经比较分析,低温环境下肉羊饲粮谷氨酰胺和L-肉碱的添加量分别为1.2%和75mg/kg时可有效改变瘤胃微生物菌群,提高机体抵抗冷应激的能力。
- 李士泽高福久杨玉英姜宁赵雅楠李玉恒杨焕民计红
- 关键词：谷氨酰胺L-肉碱
- 谷氨酰胺和L-肉碱对低温下肉羊抗氧化性能的影响被引量：9
- 2012年
- 试验旨在研究谷氨酰胺和L-肉碱对寒冷刺激所引起的肉羊机体抗氧化的作用。试验采用L9(34)正交试验设计,3水平谷氨酰胺[A1(0%)、A2(0.6%)、A3(1.2%)]与3水平L-肉碱[B1(0mg/kg)、B2(75mg/kg)、B3(150mg/kg)]。将9只肉羊随机分成3组,每组3个重复,对照组饲喂基础日粮,不添加任何添加剂,试验组羊由饲养环境温度10℃暴露于0℃环境温度下,各试验组分别添加不同水平的谷氨酰胺和L-肉碱。预试期7 d,试验期2 d(间隔10 d)后,测定各组肉羊血清中SOD、MDA、T-AOC活性。结果表明:谷氨酰胺和L-肉碱在低温下复合使用能提高机体血清SOD水平,降低血清MDA水平,提高机体总抗氧化能力。经比较分析,低温环境下肉羊日粮谷氨酰胺和L-肉碱的添加量分别为1.2%、150 mg/kg时可以提高血清SOD水平;低温环境下肉羊日粮谷氨酰胺和L-肉碱的添加量分别为0.6%、150 mg/kg时可以提高血清T-AOC水平,因此,在本试验条件下日粮添加谷氨酰胺和L-肉碱可以提高机体抵抗冷应激的能力。
- 李士泽李玲高福久李俭赵雅楠姜宁杨焕民李玉恒林增
- 关键词：谷氨酰胺L-肉碱抗氧化性能
- BALB/C鼠冷诱导RNA结合蛋白的原核表达、纯化及其单克隆抗体的制备
- 2010年
- 为了获得冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)的单克隆抗体,通过RT-PCR方法从冷处理BALB/C小鼠睾丸的总RNA中扩增获得CIRP基因序列,克隆至pGEM-T载体,获得重组质粒pGEM-CIRP,并进行序列测定。将测序正确的CIRP序列插入质粒pQE-30-Xa,构建表达载体pQE-30-CIRP并转化E.coliM15,IPTG诱导后SDS-PAGE分析表明CIRP基因在大肠杆菌中获得高效表达,可溶性分析表明CIRP融合蛋白以包涵体形式表达。采用Ni-NTA亲和层析、电洗脱纯化融合蛋白CIRP,将纯化的蛋白免疫BALB/C小鼠,三次免疫后,间接ELISA测定小鼠效价,效价为1:105,采用杂交瘤技术融合,用间接ELISA法、有限稀释法筛选阳性杂交瘤细胞,通过Western blot对McAb特异性进行鉴定,利用间接ELISA方法对McAb的Ig亚类(型)、杂交瘤细胞上清、腹水效价进行测定。结果获得了1A6、2D3、3C5及4C44株稳定分泌CIRPMcAb的杂交瘤细胞株,1A6、3C5、4C4产生的单克隆抗体亚类均为IgG2b,2D3产生的单抗亚类为IgG3,轻链均属κ链。4株单克隆细胞上清效价均在1:103以上,腹水效价均达1:107以上。Westernblot分析4株单抗均能与重组蛋白CIRP特异性结合,与空载体对照没有反应。以3C5细胞株的腹水为一抗,检测冷应激小鼠多种组织中天然CIRP蛋白表达,结果显示3C5细胞腹水能识别心、肝、脾、肺、肾、脑、睾丸等多种组织中天然CIRP,并与能之与结合。这证明该抗体具有良好特异性和结合活性,制备的单克隆抗体可以用于深入开展CIRP的功能性和应用性研究。
- 李士泽赵巧香辛九庆赵雅楠尹位杨焕民计红
- 关键词：原核表达单克隆抗体
