国家科技支撑计划(2006BAI02A12)
- 作品数：21 被引量：55H指数：4
- 相关作者：李兆申高军龚燕芳杜奕奇金晶更多>>
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- 粪便microRNAs检测用于胰腺癌筛查诊断的价值评价被引量：3
- 2011年
- 目的 检测胰腺癌患者粪便microRNAs,评价其诊断价值.方法 收集29例胰腺癌患者、22例慢性胰腺炎（CP）患者以及13例健康志愿者的粪便标本,抽提粪便总RNA,应用实时定量PCR法检测各组样本miR-21、miR-155、miR-181a、miR-181b、miR-196a、miR-210的表达量,以miR-16作为内参基因.应用接受者操作特征（ROC）曲线（AUC）评估microRNAs对胰腺癌的诊断价值.结果 粪便总RNA抽提及microRNAs检测方法具有稳定及可重复性.胰腺癌组miR-181b、miR-196a、miR-210的表达量分别为2.22±0.64、2.78±0.14、5.55±0.38;CP组为1.42±0.39、3.88±0.85、5.39±0.69;对照组为0.32±0.40、1.14±0.98、4.23±0.99.胰腺癌组和CP组均较对照组显著增加（P值均＜0.05）;而胰腺癌组与CP组间无显著差异.胰腺癌组对对照组的miR-181b AUC为0.745（95%CI 0.597～0.894）,诊断胰腺癌的敏感性和特异性分别为84.6%和51.7%;miR-210的AUC为0.772（95%CI 0.629～0.914）,对胰腺癌的诊断敏感性和特异性分别为84.6%和65.5%.两组比较差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.miR-196a对胰腺癌无诊断意义,但胰腺癌患者粪便miR-196a的表达与肿瘤直径相关（r=0.516,P=0.041）.结论 粪便RNA的抽提和microRNAs检测为无创性,且具有可重复性.miR-181b和miR-210在胰腺癌患者粪便中的表达增高,有可能是胰腺癌潜在的分子标志物.
- 任艳高军王小玮刘建强顾俊骏黄浩杰金晶龚燕芳李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤微RNAS粪便
- RNA干扰DNA甲基转移酶1对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的观察以DNA甲基转移酶1（DNA methy transferas 1，DNMT1）基因为靶基因的RNA干扰对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖及凋亡的影响。方法设计、合成针对DNMT1基因的siRNA和阴性对照siRNA（N—siRNA）。实验分为空白对照组、脂质体组（仅予脂质体）、N—siRNA组（转染30 nmol N-siRNA）、siRNA组（转染30 nmol siRNA）。siRNA转染48h后，实时PCR法检测DNMT1 mRNA水平；WST-8法检测细胞增殖；流式细胞技术检测细胞凋亡。结果siRNA组DNMT1mRNA的抑制率为（86．0±4．3）％，明显高于N—siRNA组的（40．1±2．2）％和空白对照组的0（P〈0．01）；细胞存活率为（47．6±5．6）％，明显低于N—siRNA组的（68．1±4．1）％和空白对照组的100％（P〈0．01）；细胞凋亡率为（14．94±2．89）％，明显高于空白对照组的（7．51±1．12）％、脂质体组的（7．06±0．39）％、N—siRNA组的（8．84±1．44）％（均P〈0．01）。结论siRNA能特异、有效地抑制人胰腺癌PaTu8988细胞DNMT1 mRNA的表达，同时抑制细胞增殖、促进细胞凋亡。
- 徐岷高道键张玉琦高军李兆申龚燕芳吴洪玉杜奕奇金晶满晓华
- 关键词：胰腺肿瘤RNA小分子干扰细胞增殖
- sICAM-1、sVCAM-1和P选择素检测对胰腺癌诊断和预后评估的价值被引量：3
- 2009年
- 目的探讨血清可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、可溶性血管内皮细胞黏附因-1(sVCAM-1)和P选择素检测对胰腺癌诊断和预后评估的临床价值。方法2007年10月-2008年6月收治的胰腺癌患者70例,包括胰头癌45例,胰体、胰尾癌25例;TNM分期Ⅰ-Ⅱ期34例,Ⅲ-Ⅳ期36例。采用酶联免疫法(ELISA)法测定患者手术前后血清sICAM-1、sVCAM-1和P选择素水平,并与30例胰腺良性病变患者进行比较。结果胰腺癌患者血清sICAM-1、sVCAM-1和P选择素水平明显高于胰腺良性病变患者(P<0.01);Ⅲ-Ⅳ期胰腺癌患者血清sICAM-1、sVCAM-1和P选择素水平明显高于I-Ⅱ期患者(P<0.05)。sICAM-1、sVCAM-1和P选择素检测的敏感度分别为81.4%、85.7%、84.3%,三者联合检测的敏感度为92.9%。行根治性手术组(39例)术后血清sI-CAM-1、sVCAM-1和P选择素水平均较术前显著降低(P<0.05),而姑息性手术组(31例)则无明显变化(P>0.05)。结论血清sI-CAM-1、sVCAM-1和P选择素水平是胰腺癌诊断和预后判断的敏感性指标,三者联合应用可提高胰腺癌早期诊断的敏感性。
- 朱伟黄文武新颖徐纪平蔡全才李兆申
- 关键词：胞间黏附分子1血管细胞黏附分子-1P选择素
- 超声内镜对胰腺癌早期诊断价值的评估被引量：7
- 2009年
- 目的评估超声内镜对胰腺癌早期诊断的价值。方法2007年1月-2007年6月经手术病理确诊为胰腺癌的患者126例,明确诊断前半月内均接受过超声(US)、超声内镜(EUS)及螺旋CT(SCT)检查,术后证实为小胰腺癌(癌块直径≤2cm)28例,癌块直径>2cm者98例。比较术前接受US、SCT和EUS检查的影像学异常发现率、诊断准确率及间接征象准确率等,探讨超声内镜对胰腺癌早期诊断的价值。结果联合应用EUS及SCT检查,胰腺癌异常影像的发现率、诊断准确率大为提高,与单独应用US、EUS或SCT相比,有显著性差异(P<0.05);以术后病理报告为标准,在评估胰周组织浸润、血管侵犯等间接征象方面EUS与SCT无显著性差异(P>0.05);对小胰腺癌的诊断,EUS诊断准确率显著高于US和SCT(P<0.05)。结论EUS在胰腺癌早期诊断中有重要价值,EUS联合SCT能提高胰腺癌的早期检出率。
- 黄文赵航徐纪平金震东朱伟李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤腔内超声检查
- 血浆微小核糖核酸联合检测对胰腺癌的诊断价值
- 2011年
- 胰腺癌早期发现困难、预后极差，是实体癌中生存率最低的恶性肿瘤，手术切除率仅为10％～15％，在可切除的胰腺癌中早期胰腺癌仅占15％。
- 刘建强高军杜奕奇李兆申任艳王小玮龚燕芳王卫卫路华
- 关键词：早期胰腺癌微小核糖核酸血浆手术切除率生存率
- 肽核酸钳制-PCR/K-ras突变检测方法在结直肠癌组织中的诊断应用
- 2013年
- 目的确定本实验室建立的肽核酸钳制(PNA)-PCR/K-ras突变检测方法的阳性判断标准,并评价其对结直肠癌组织的诊断价值。方法将含K-ras基因12密码子突变的质粒和野生质粒以不同比例(突变/总体:0,1/3 200,1/1600,1/800,1/400,1/200,1/100)混合作为标准样品,独立配制6个批次并分别进行PNA-PCR/K-ras突变检测,收集Kras突变CT值及K-ras总体CT值,计算ΔCT值(突变CT值-总体CT值),采用ROC曲线分析突变CT值和ΔCT值诊断K-ras突变的最适Cut-off值,联合两者最适Cut-off值,设定该方法的最终阳性判断标准。分别采用该方法和直接测序法对35例结直肠癌组织及对应癌旁组织进行K-ras突变检测并比较分析。结果突变模板浓度为1/800及以上的标准样品突变CT值和ΔCT值与阴性标准品之间差异存在统计学意义(P<0.05);突变CT值和ΔCT值的最适Cut-off值分别为41.7和15.4。最终阳性判断标准为突变CT值≤41.7或ΔCT值≤15.4,对应的ROC曲线下面积为0.955(P=0.001),以此判断标准,各标准样品(0,1/3 200,1/1 600,1/800,1/400,1/200,1/100)的阳性检测率分别为0%、66.7%、83.3%、100%、100%、100%、100%,检测下限为1/800。在结直肠癌及癌旁组织标本中,该方法阳性检测率为45.7%(32/70),与直接测序法(18.6%,13/70)比较差异具有统计学意义(P=0.000)。结论 PNA-PCR/K-ras突变检测方法具有较高的检测灵敏度,在结直肠癌组织样本中具有较直接测序法更高的阳性检出率。
- 李泉江胡佳佳金晶吴洪玉满晓华朱玲高军李兆申
- 关键词：K-RAS基因突变
- NPTX2基因概述及其相关疾病被引量：2
- 2010年
- Neuronal pentraxinⅡ(NPTX2)属于神经元五聚体蛋白家族,但其分布广泛,不局限于神经系统。近来发现NPTX2与恶性神经胶质瘤、帕金森病、发作性睡病、药物成瘾、肺癌、胰腺癌等疾病的发生相关。本文综述了NPTX2及其在神经系统内外疾病中作用的研究进展。
- 李磊张玲高军李兆申
- 关键词：疾病
- miR-223在胰腺癌组织中的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的分析胰腺癌及其配对癌旁组织中miR-223的表达差异,评价miR-223对胰腺癌潜在的诊断价值。方法收集笔者医院28例胰腺癌患者手术标本的癌组织及配对的癌旁组织,3例正常胰腺组织作为对照。采用TaqMan Real-timePCR方法,以U6为内参,检测miR-223在胰腺癌及配对癌旁组织中的相对表达量,并分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。结果胰腺癌组织中miR-223的表达量显著高于癌旁组织(P=0.008),胰腺癌中miR-223的高表达和肿瘤临床特征无关(P>0.05)。结论 miR-223可能在胰腺癌的发生发展中发挥一定作用,并可能成为新的胰腺癌诊断标志物。
- 王卫卫刘建强黄浩杰邹多武李兆申高军
- 胰腺癌细胞株中NPTX2基因的甲基化情况研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨神经元正五聚蛋白2(NPTX2)基因在胰腺癌中低表达的分子机制。方法利用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测2例正常胰腺组织及ASPC1、BxPC3、CFPAC、PaTu8988、PANC-1、SW1990等6株胰腺癌细胞株中NPTX2基因的甲基化情况,并对产物进行测序验证。利用DNA甲基化转移酶(DNMT)抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dC)处理细胞株ASPC1及PANC1,再运用qRT-PCR及SYBR Green荧光掺入甲基化特异性定量PCR法检测NPTX2基因的mRNA水平及甲基化程度。结果MSP结果显示正常胰腺组织中NPTX2基因未发生甲基化,而在6株胰腺癌细胞株中NPTX2基因均有不同程度的甲基化。胰腺癌细胞株ASPC1及PANC-1在5-Aza-dC处理前的甲基化指数(MI)分别为0.964、0.472,mRNA表达的相对值(RQ)分别为5.251和0,而处理后的MI分别为0.531、0.226,RQ分别为5.965和1.076。结论NPTX2基因启动子的高甲基化是该基因在胰腺癌中表达下降的主要原因之一。
- 曹佳高军杜奕奇李兆申黄文龚燕芳张玲宋健金晶吴洪玉
- 关键词：CPG岛
- DNMTl siRNA对人胰腺癌PaTu8988细胞周期的调控机制研究被引量：3
- 2009年
- 目的研究沉默DNA甲基转移酶1(DNMTl)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和细胞周期的影响及可能机制。方法培养的人胰腺癌PaTu8988细胞分为空白对照组、阴性siRNA(15nmol/L)组、阴性siRNA(30nmol/L)组、DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siRNA(30nmol/L)组。转染48h后,采用real-time PCR和Western blotting评价沉默效率和细胞周期调控基因p21的表达情况;WST-8法检测细胞增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期变化。结果转染48h后,15nmol/L和30nmol/L浓度的DN-MT1 siRNA均明显抑制了DNMT1 mRNA和蛋白的表达;DNMT1 siRNA转染后人胰腺癌PaTu8988细胞增殖受抑制,各组细胞增殖抑制率依次为0%±12.0%、13.7%±8.2%、23.4%±7.3%、17.1%±5.8%和36.9%±14.2%,其中DNMT1 siRNA(30nmol/L)组的细胞增殖抑制率明显高于其他各组(P<0.01);DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siRNA(30nmol/L)组的G2/M期细胞百分率均显著低于其他各组,S期细胞百分率明显高于其他各组(P<0.05);DNMT1 siRNA(30nmol/L)组细胞周期调控基因p21 mRNA相对表达量明显高于其他各组(P<0.01)。结论DNMTl siRNA能特异性抑制胰腺癌细胞DNMTl的表达,并抑制细胞增殖、促使细胞出现S期阻滞,其机制可能与上调细胞周期调控基因p21的表达有关。
- 徐岷高军高道键张玉琦杜奕奇刘枫龚燕芳吴洪玉李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤细胞周期
