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国家科技重大专项(2008ZXLO002007)
作品数:
1
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邓俊
刘锋
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乙型肝炎病毒P基因反转录酶区I233V变异对阿德福韦酯耐药的实验研究
被引量:2
2011年
目的构建含有HBVP基因反转录酶区1233V(rt1233V)突变的HBV复制型质粒,并分析此突变对阿德福韦(ADV)酯耐药性的影响。方法利用定点突变技术构建带有rtA181V、rt1233V和rtN236T突变的HBV重组质粒,分别转染肝细胞系Huh7,加入含有不同浓度ADV的培养液,培养3d后收集细胞DNA,用Southern印迹法检测HBV复制中间体。根据Southern印迹法得到的图像,用QUANTITIY ONE软件对其进行分析,应用Table Curve2D软件,通过公式拟合药物浓度-病毒复制率曲线。计算出ADV对各个重组质粒的半数抑制浓度(IC50)值后,以其对野生株质粒的IC50值为标准,分别计算各重组质粒的耐药倍数。结果ADV对带有rt1233V突变的重组质粒的IC50值为(1.69±0.52)μmol/L,耐药倍数是野生株的6.5倍。结论rt1233V变异能导致HBV对ADV轻度耐药。
邓俊
于德敏
陈立
刘锋
张东华
张欣欣
关键词:
乙型
腺嘌呤
点突变
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