贵州省优秀科技教育人才省长资金项目([2009]30)
- 作品数：7 被引量：26H指数：4
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- 干扰素诱导蛋白p204调节心肌分化的机制及应用前景被引量：8
- 2011年
- 干扰素诱导蛋白p200家族蛋白包括6种鼠类及4种人类家族成员,具有共同的特征结构,广泛参与调节细胞增殖和分化、衰老和凋亡,在自身免疫反应、抗病毒及抗癌等领域发挥着重要的作用。内源性的p200家族蛋白鼠p204在心肌及骨骼肌表达最高,提示其在肌分化中起着重要作用。本文联系p204的分子结构及调节细胞生长与分化的功能,阐述p204促骨骼肌成肌细胞及胚胎癌细胞分化的机制,及对心肌损伤后心肌再生的应用前景。
- 宋方吴强
- 关键词：干扰素P204心肌分化干细胞
- 干扰素-α抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖被引量：1
- 2014年
- 血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）过度增殖是血管成形术后再狭窄、动脉粥样硬化及高血压等血管增殖性疾病的共同病理基础,有效抑制VSMCs增殖对上述疾病的防治具有重要的临床意义.干扰素（Interferon,IFN）具有抗病毒、免疫调节及抑制肿瘤细胞增长等作用,但其对VSMCs增殖的影响及其机制尚未完全明确.本研究探讨IFN-α对大鼠VSMCs增殖的影响及其部分机制,为其临床应用提供理论依据.
- 龙向淑宋方黄晶吴强
- 关键词：血管平滑肌细胞增殖干扰素-Α血管成形术后再狭窄VSMCS
- p200家族蛋白人AIM2及小鼠Aim2介导的新型炎性复合体
- 2012年
- 人AIM2及小鼠Aim2属干扰素诱导蛋白p200家族成员。AIM2的突变和黑色素瘤、大肠癌等肿瘤进程密切相关。2009年以来一系列的研究表明其作为一种新的DNA识别受体(DNA sensor),其对内源性及病原体双链DNA(dsDNA)同样敏感。AIM2介导的天然免疫应答通过识别并结合胞质中的dsDNA,进而启动caspase-1炎性复合体(inflammasome)通路相关的免疫反应。本文通过介绍p200家族蛋白(尤其是AIM2、Aim2、p202)的结构及表达定位特点,综述了AIM2调节自身免疫应答的机制及最新进展,并对其临床意义做出展望。
- 宋方吴强
- 关键词：干扰素诱导蛋白双链DNA
- 干扰素诱导蛋白p204表达变化对大鼠血管平滑肌细胞增殖及p21表达的影响被引量：8
- 2012年
- 目的:观察干扰素诱导蛋白p204对鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及p21表达的影响,探讨p204在VSMCs增殖调控中的作用及可能机制。方法:应用干扰素α(IFN-α)处理和p204基因(Ifi204)的小干扰RNA(siRNA)瞬时干预体外培养的VSMCs,用MTT法测定细胞活力反映细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,用半定量RT-PCR法和Western blotting分别检测p204和p21的mRNA和蛋白表达。结果:IFN-α可诱导鼠VSMCsp204 mRNA和蛋白表达上调,降低VSMCs细胞活力和细胞周期G1/S转换,伴p21 mRNA和蛋白表达上调。转染Ifi204 siRNA可抑制p204和p21表达,提高VSMCs细胞活力和促进细胞周期G1/S转换。结论:p204表达可抑制鼠VSMCs的增殖,该效应可能与激活p21表达有关。
- 龙向淑吴强宋方
- 关键词：干扰素小干扰RNA
- 干扰素诱导蛋白p204对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制被引量：10
- 2012年
- 目的:研究干扰素诱导蛋白p204对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响并探讨其可能的机制。方法:应用干扰素α(IFN-α)和p204基因(Ifi204)的小干扰RNA(siRNA)瞬时干预体外培养的VSMCs,用MTT法测定细胞活力反映细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,用实时qRT-PCR法和Western blotting分别检测mRNA和蛋白表达。结果:IFN-α可诱导大鼠VSMCs p204 mRNA和蛋白表达上调,抑制VSMCs细胞活力和细胞周期G1/S转换,伴Ras蛋白表达减少,Raf和ERK磷酸化水平下降。转染Ifi204 siRNA可抑制p204表达,提高VSMCs细胞活力和促进细胞周期G1/S转换,伴Ras蛋白表达增多,Raf和ERK磷酸化水平升高。结论:p204表达可抑制鼠VSMCs的增殖,该效应可能与p204抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路的激活有关。
- 龙向淑吴强宋方
- 关键词：干扰素干扰素诱导蛋白P204血管平滑肌细胞小干扰RNA
- 一套系统培养鼠主动脉血管壁细胞简单可靠的方法被引量：14
- 2011年
- 目的探讨一套系统培养鼠主动脉血管壁成分细胞的简单、可重复的方法。方法分别采用植块贴壁法进行主动脉血管平滑肌细胞和血管外膜成纤维细胞、结扎贴壁法进行血管内皮细胞的原代培养,胰酶消化传代;差速贴壁法及自然纯化法进行细胞纯化;转化生长因子β1诱导血管外膜成纤维细胞转化为肌成纤维细胞;相差显微镜及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、血小板/内皮细胞黏附分子（CD31）、波形蛋白（Vimentin）抗体两两联合的方式分别进行形态学和免疫细胞化学鉴定。结果组织及细胞活性良好,血管平滑肌细胞及血管外膜成纤维细胞原代培养周期为10-12天,血管内皮细胞为12-14天。传代培养周期为7-10天。经纯化传代后的细胞纯度达95%-100%。血管平滑肌细胞呈典型的＂峰-谷＂状生长,α-SMA（＋）/Vimentin（-）;血管内皮细胞呈＂铺路石＂样外观,CD31（＋）/α-SMA（-）;血管外膜成纤维细胞形态和血管平滑肌细胞不易区分,Vimentin（＋）/α-SMA（-）,诱导的肌成纤维细胞Vimentin（＋）/α-SMA（＋）。原代细胞传至10代以上仍未见生长活力减退。结论我们建立了一套系统培养纯度高、生长状态良好的大鼠主动脉血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、血管外膜成纤维细胞及肌成纤维细胞的简单可靠、重复性好的方法。该法对培养小鼠主动脉壁成分细胞仍然适用。
- 宋方吴强陆德琴袁军杨永耀谭洪文
- 关键词：主动脉原代细胞培养外膜成纤维细胞肌成纤维细胞
- 干扰素诱导蛋白p204在大鼠血管壁成分细胞的表达被引量：3
- 2012年
- 目的研究干扰素诱导蛋白p204在鼠血管壁各成分细胞的基础表达及干扰素诱导性。方法通过免疫组织化学染色及Western blot观察p204蛋白在成年昆明小鼠及Wistar大鼠或SD大鼠血管壁的表达;免疫细胞化学法及Western blot观察p204在培养的SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)和血管外膜成纤维细胞(VAF)的表达及分布;逆转录-聚合酶链反应观察干扰素诱导VSMC上p204 mRNA(Ifi204)表达特点。结果免疫组织化学染色表明p204抗原在成年昆明小鼠心内小静脉及小动脉血管壁内皮细胞、内膜、中膜及外膜的细胞胞浆中呈阳性反应,p204在成年Wistar大鼠主动脉内皮、VSMC及外膜均染色阳性,弹性纤维膜未着色。Western blot表明p204在SD大鼠主动脉有基础表达,其在VAF的基础表达量明显高于VSMC,免疫细胞化学法表明p204在鼠主动脉VSMC细胞同时表达于细胞质及细胞核。应用干扰素α1.0×106IU/L刺激VSMC细胞8 h即诱导Ifi204大量表达,干扰素α作用24 h时表达更强烈。结论 p204在小鼠及大鼠血管壁全层和培养的VSMC及VAF均存在基础表达,p204在VSMC上表达并不局限于细胞核,且易被干扰素α诱导其mRNA表达上调。p204在鼠血管壁细胞存在表达提示其在血管生理及血管增殖性疾病的发生发展中可能有着潜在的重要作用。
- 宋方吴强龙向淑谭洪文袁军杨永耀
- 关键词：干扰素干扰素诱导蛋白P204血管壁内皮平滑肌细胞成纤维细胞
