国家自然科学基金(81000307)
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
- 相关作者：丁小强俞小芳刘红方艺邹建洲更多>>
- 相关机构：复旦大学杭州市中医院常州市第二人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脂肪干细胞(ASCs)在急性肾损伤(AKI)动物模型治疗中的作用研究进展被引量：3
- 2014年
- 近年来干细胞移植已成为损伤组织更新、再生和修复研究的重点。来源于脂肪组织的干细胞群较其他干细胞系有独特的优势。首先,脂肪组织分布广泛,容易获取,对患者创伤小,患者易于接受;其次,干细胞群易于分离,增殖速度快,能够快速应用于治疗。急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)作为内科常见急症,发病率高,治疗手段相对较局限,治疗效果不理想,亟需新的治疗方法,其中细胞疗法被认为是非常有前景的治疗手段。本文就脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ASCs)在AKI动物模型治疗中的应用进行综述和展望,以期为今后的研究奠定基础。
- 刘少鹏俞小芳钟一红郭佳丁小强
- 关键词：间充质干细胞
- 骨髓间充质干细胞在急性肾损伤中的研究进展被引量：1
- 2012年
- 干细胞研究是目前急性。肾损伤（AKI）治疗研究中一个热点，而骨髓间充质干细胞（BMSC）比其他成体干细胞更易获得，增殖能力强，生物学特性稳定，具有多向分化潜能，在AKI修复方面显示了更大的应用前景。近年来一系列动物实验证实了BMSC在AKI治疗中的潜力。本文综述近年来BMSC在AKI治疗中的国内外研究进展。
- 刘红俞小芳丁小强
- 关键词：骨髓间充质干细胞急性肾损伤多向分化潜能BMSC成体干细胞增殖能力
- 经肾动脉移植脂肪干细胞对大鼠急性缺血性肾损伤的治疗作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨经大鼠左侧肾动脉移植脂肪干细胞（ASCs）对急性缺血性肾损伤（iAKI）的治疗作用，同时观察ASCs的体内分布情况。方法采用胶原酶消化法分离培养ASCs并鉴定。夹闭SD大鼠双侧肾蒂45min建立iAKI模型。按随机数字表法分成两组：对照组（再灌注后即刻经左。肾动脉注射500trlPBS，n=30）和ASCs治疗组（再灌注后即刻经。肾动脉移植5×10^5ASCs，n=30）。术后12、24、48、72h和1周时处死大鼠，测定血清肌酐值（Scr），光学显微镜观察肾脏病理损伤及细胞凋亡、炎性反应及细胞增生情况，荧光显微镜观察ASCs在肾、肺、肝、脾、心脏的停留时间及分布情况。结果培养的第3代ASCs具有成脂、成骨等多向分化潜能，流式细胞仪检测高表达CD29（99．35％）和CD90（92．88％），低表达CD34（0．48％）和CD45（3．51％）。ASCs治疗组Scr水平各时间点均显著低于对照组（均P〈0．05）。与对照组相比，治疗组左侧肾小管间质损伤评分在再灌注12、24、48h时显著降低（均P〈0．05）；肾组织TUNEL染色和巨噬细胞浸润染色积分在再灌注12、24、48、72h和1周时显著降低（均P〈0．05）；核增殖抗原在再灌注48h时显著增加（P〈0．05），72h和1周时显著减少（均P〈0．05）。与治疗组右肾相比，治疗组左侧肾小管问质损伤评分在再灌注24h时显著降低（P〈0．05）；肾组织TUNEL染色阳性细胞数在再灌注1周时减少（P〈0．05）；巨噬细胞浸润染色积分在再灌注12、48、72h和1周时减少（均P〈0．05）；核增殖抗原48h时增加（P〈0．05），72h和1周时减少（均P〈0．05）。荧光显微镜观察显示ASCs在肾脏内停留时间超过1周，但移植48h后明显减少，肺、肝、脾、心脏仅观察到极少量的Dil阳性细胞。结论ASCs经肾动脉移植可显著改善iAKI大鼠肾功能、减轻肾脏病理损伤和细胞凋亡、减少炎性细胞浸润、促
- 刘少鹏俞小芳钟一红方艺刘红许嵘郭佳蔡洁茹刘同强谢婷丁小强
- 关键词：干细胞移植再灌注损伤细胞增殖急性肾损伤
- 低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、凋亡和坏死的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、凋亡和坏死的影响及其可能机制。方法采用全骨髓细胞贴壁法分离培养BMSCs,通过细胞成脂、成骨分化诱导及流式细胞仪检测其表面标志物(CD29、CD90、CD45)鉴定BMSCs;运用siRNA干扰技术沉默低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor,HIF-1α)基因。将细胞分成6组:正常培养组、正常培养+转染阴性对照组、正常培养+HIF-1αRNA干扰组、低氧预处理组、低氧培养+转染阴性对照组及低氧培养+HIF-1αRNA干扰组,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞仪和乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase,LDH)活力测定等方法,检测各组BMSCs的增殖、凋亡和坏死情况;Western blot和real-time PCR检测各组BMSCs中HIF-1α、葡萄糖转运子-1(glucose transporter,GLUT-1)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)的mRNA和蛋白的表达。结果培养的BMSCs具有成脂、成骨等多向分化潜能;流式检测呈现CD29和CD90高表达,CD45低表达;低氧预处理可促进BMSCs增殖,减轻坏死,对细胞凋亡无明显影响;低氧预处理组HIF-1α、GLUT-1及VEGF的蛋白及mRNA表达明显高于常氧培养组(P<0.05);给予低氧预处理组siRNA HIF-1α后其HIF-1α、GLUT-1及VEGF的蛋白及mRNA表达均明显低于未干扰前(P<0.05),且细胞增殖受抑制,细胞凋亡和坏死加重(与未干扰前相比,P<0.05)。结论低氧预处理可促进BMSCs的体外增殖,减轻坏死,其机制可能与低氧预处理后HIF-1α表达增加及上调其下游基因GLUT-1和VEGF表达有关。
- 刘红俞小芳滕杰邹建洲方艺刘少鹏丁小强
- 关键词：低氧增殖凋亡
- 低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞迁移能力的影响被引量：14
- 2012年
- 目的探讨氯化钴（CoCI2）诱导的化学低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）迁移能力的影响。方法采用全骨髓细胞贴壁法分离培养BMSC，流式细胞仪检测其表面标志物（CD29、CD90、CIM5）鉴定BMSC；分别采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法和流式细胞仪，检测不同CoCl2浓度（0、50、100、150、200、300、400、600~mol／L）和不同时间（0、6、12、24、48、72h）培养条件下BMSC的增殖和凋亡情况，确立CoCl2化学低氧预处理BMSC的实验模型；细胞划痕实验及Transwell细胞迁移实验检测低氧预处理对BMSC迁移能力的影响；Western印迹法和实时定量PCR检测低氧预处理后BMSC的低氧诱导因子（HIF）-lot和CXC趋化因子受体4（CXCR4）蛋白及μmRNA的表达；运用siRNA技术沉默HIF-let基因以及使用CXCR4抑制剂AMD3100，观察预处理后BMSC迁移能力变化。结果培养的BMSC呈现CD29和CD00高表达，CIM5低表达；CoCl2浓度200mol／L、培养时间24h为本研究BMSC化学低氧预处理的实验模型；通过细胞划痕实验及Transwell细胞迁移实验发现，低氧预处理组BMSC的细胞迁移能力强于常氧培养组[划痕试验：（0．396±0．018）mm比（0．200±0．011）mm，Transwell细胞迁移实验：21．0±4．5比8．54-1．7，均P〈0．05]；低氧预处理组HIF—lα及CXCR4的蛋白及mRNA表达明显高于常氧培养组（P〈0．05）；低氧预处理组BMSCHIF．1仪基因沉默后或经AMD3100处理后细胞迁移能力与常氧培养相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CoCl2诱导的化学低氧预处理可促进BMSC的体外迁移能力，其机制可能与低氧预处理后HIF-1d表达上调进而介导CXCR4在BMSC表达增加有关。
- 刘红俞小芳滕杰邹建洲方艺丁小强
- 关键词：间质干细胞细胞低氧细胞运动低氧诱导因子
- 间充质干细胞体外修饰治疗急性肾损伤的研究进展被引量：1
- 2013年
- 急性肾损伤（AKI）是以肾功能迅速下降为特征的一组综合征，病情进展至后期则演变为急性肾衰竭，多由于手术、外伤、放射介入以及肿瘤化疗等所诱发。据不完全统计，AKI在中国综合性医院总发病率为5％～18％，在重症监护病房则高达67％，病死率30％-80％。
- 蔡洁茹俞小芳丁小强
- 关键词：急性肾损伤间充质干细胞重症监护病房急性肾衰竭病情进展
