重庆市自然科学基金(CSTC2007BB5082)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：吴丽娟蒋建新朱佩芳陈伟张雪莹更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院重庆医科大学第三军医大学更多>>
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- 锌指蛋白A20基因沉默载体制备及初步应用
- 2008年
- 目的设计并制备有效干扰细胞内锌指蛋白A20（简称A20）表达的基因沉默载体，初步用于观察A20基因沉默对细胞炎症应答的影响。方法人工设计并合成A20特异性RNA干扰寡核苷酸片段（ASRF），构建A20基因沉默载体pSUPER～EGFP—A20 siRNA。采用基因转染技术使人单核细胞株THP1感染pSUPER—EGFP—A20 siRNA，用适时荧光定量PCR技术鉴定转染细胞A20基因的沉默率；用ELISA测定细胞核内NF—κB活性及培养上清液中的TNF—α水平。结果在设计的2条ASRF中，以M59465—385R／F对细胞A20表达的抑制效果最佳，基因沉默率达83．86％。初步应用表明，A20基因沉默后THP1内NF—κB活性水平增加了78．13％，释放的TNF—α增加了49．30％。结论成功得到了高效A20基因沉默载体，初步应用研究提示A20表达的意义在于下调细胞炎症应答程度。
- 吴丽娟陈萍康格非蒋建新朱佩芳
- 关键词：锌指内毒素类基因沉默
- 锌指蛋白A20转基因预处理对小鼠内毒素血症肺组织炎症损伤的影响被引量：4
- 2009年
- 内毒素性急性肺损伤（acute lung injury，ALI）是严重创伤或感染后出现最早、发病率最高的并发症之一。该病进展迅速，病情凶险，进一步发展可成为ARDS，甚至导致多器官功能障碍以致死亡。目前的研究认为，内毒素（LPS）诱导的过度炎症反应在该病的发生发展中起关键性作用，对过度炎症的抑制策略成为了当前该病治疗研究的热点。
- 吴丽娟毕玉田李增鹏陈萍蒋建新朱佩芳
- 关键词：内毒素血症炎症损伤锌指蛋白A20肺组织转基因内毒素性急性肺损伤
- 急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20表达及其与TNF-α和IL-6的相关性被引量：4
- 2008年
- 目的调查急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20的表达及其与血液TNF-α和IL-6水平的相关性,初步探讨锌指蛋白A20在急性脑梗死缺血性炎症损伤中的作用。方法采用流式细胞学分析技术和适时荧光定量PCR技术分别测定42例急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20的表达,并用ELISA技术测定血液TNF-α和IL-6浓度,与50例同期健康对照组进行比较。结果急性脑梗死组患者外周血单核细胞锌指蛋白A20表达水平较健康对照组明显增高,且以发病后第1天锌指蛋白A20表达水平最高(P<0.01),之后快速降低,与血液TNF-α和IL-6浓度呈现正相关关系。结论锌指蛋白A20可能参与了急性脑梗死缺血性炎症损伤的自我保护过程,其机制可能是抑制核转录因子NF-κB和NF-IL-6,进而下调促炎细胞因子的表达干预脑组织的炎症损伤。
- 吴丽娟杨清武王琳张雪莹陈伟蒋建新朱佩芳
- 关键词：急性脑梗死锌指蛋白A20肿瘤坏死因子Α白细胞介素6
- 锌指蛋白A20对小鼠内毒素性肝损伤的保护作用研究被引量：7
- 2008年
- 目的探讨锌指蛋白A20对小鼠实验性内毒素性肝损伤的保护作用。方法以内毒素血症小鼠为动物模型,采用尾静脉注射A20表达质粒的方法,观察A20转基因处理对内毒素血症小鼠肝组织内TNF-αI、L-1β水平以及肝脏病理损伤的保护。结果A20组LPS注射24h后肝组织匀浆TNF-α表达水平为(923.2±11.97)pg/ml、IL-1β为(996.43±15.32)pg/ml,与LPS对照组比较,t检验显示P值均<0.05,A20组与LPS对照组之间TNF-α和IL-1β水平差异有统计学意义。病理分析提示A20组24h后小鼠肝脏病理损伤明显较LPS对照组轻。结论A20能够明显抑制内毒素血症小鼠肝组织的炎症反应,减轻肝组织炎症损伤。
- 吴丽娟张雪莹陈伟蒋建新朱佩芳
- 关键词：锌指蛋白A20内毒素炎症基因治疗
- 脂质体包裹mA20及其突变体质粒转染对内毒素血症小鼠的治疗作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究脂质体包裹A20及其突变体mA20-ZnF4-7(mA20Δ)质粒对脂多糖(LPS)攻击所致内毒素血症小鼠的治疗作用。方法用LPS攻击小白鼠制备内毒素血症动物模型。随机分为:生理盐水对照组(NS组)、单纯内毒素组、空质粒组、脂质体包裹mA20质粒治疗组(L-mA20组)、脂质体包裹mA20Δ质粒治疗组(L-mA20Δ组)。以ELISA检测各组血浆TNF-α、IL-1β表达,并于12h时间点观察组织病理变化。结果(1)L-mA20组和L-mA20Δ组的TNF-α在各时间点表达(pg/mL)分别为:6h(304.696±6.087)(、304.985±6.291),12h(321.217±10.579)、(256.580±33.524),24h(307.594±11.181)(、280.348±11.698);与单纯内毒素组、空质粒组的TNF-α表达比较有显著性降低(P<0.05)。(2)L-mA20组和L-mA20Δ组的IL-1β在各时间点表达(pg/mL)分别为:6h(256.989±3.921)、(263.655±5.645),12h(205.724±4.827)、(154.690±1.380),24h(165.724±7.772)(、101.816±3.259);依时间有显著性下降趋势;与单纯内毒素组、空质粒组的IL-1β表达比较有显著性降低(P<0.05)。(3)病理观察结果显示:L-mA20组和L-mA20Δ组的肝、肺损伤均较单纯内毒素组、空质粒组轻;与NS相比,肝、肺损伤无明显差别。结论尾静脉注射被脂质体包裹mA20及其突变体mA20-ZnF4-7质粒对内毒素血症小鼠有相似的治疗作用,为临床应用结构更简单的A20蛋白提供了一定实验基础。
- 左云龙吴丽娟匡凤梧蒋建新朱佩芳
- 关键词：内毒素转染脂质体
