国家自然科学基金(40976072)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 相关作者：李凯彬吴淑勤刘春梁慧丽王芳更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所暨南大学华南理工大学更多>>
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- 相关领域：环境科学与工程农业科学生物学更多>>
- 苯并芘和多氯联苯对剑尾鱼CYP1A、P-gp基因表达的影响
- 目的 体外培养剑尾鱼脑细胞系,肝组织块为实验材料,研究苯并(a)芘、多氯联苯1254及其混合物对生物因子CYP1A、P-gp的影响.方法 体外培养脑细胞及肝组织块,作如下处理：B(a)P处理组：细胞接受不同剂量B(a)P...
- 邓美英李凯彬李强刘春吴淑勤
- 关键词：苯并(A)芘多氯联苯P-GP
- 剑尾鱼P-糖蛋白基因全长cDNA克隆、分析及组织分布被引量：2
- 2013年
- P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)为ABC转运体超家族的主要成员,分布于细胞膜,依赖ATP供能,可将细胞内的亲脂性毒物或药物逆浓度泵出胞外,在机体解毒上具重要功能。研究采用RT-PCR和RACE法对剑尾鱼P-gp基因进行克隆并获得了全长cDNA序列4301 bp,该基因编码1286个氨基酸残基,估算编码蛋白的分子质量为141.64 kD。生物信息学分析表明,剑尾鱼P-gp不含信号肽序列,具ATP转运家族蛋白的典型结构域,包括2个疏水性的跨膜区(Transmembrane domains,TMD)和2个位于细胞浆内的核苷酸结合区(Nucleotide-binding domains,NBD),为全转运子,每个跨膜区都有6个跨膜α螺旋,而每个NBD包含1个ABC转运体家族标记序列;跨膜性质预测结果显示该蛋白属膜蛋白,具P-gp的典型特征。序列同源性分析发现,不同进化地位动物P-gp存在高度同源性,显示P-gp在系统进化上高度保守。P-gp在剑尾鱼肝脏、肾脏、脑等不同组织均有表达,其中以肝脏的相对表达量最高,是P-gp检测的代表组织。QRT-PCR实验表明,苯并(a)芘胁迫可明显诱导P-gp mRNA的表达。剑尾鱼P-gp的表达水平或可作为一个生物标记物指标,应用于环境持久性有机污染物的监测研究中。
- 王芳李凯彬聂湘平刘春劳海华王英英梁慧丽吴淑勤
- 关键词：剑尾鱼P-糖蛋白全长CDNA克隆苯并(A)芘生物标记物
- DDT、苯并[a]芘暴露对阿部鲻虾虎鱼P糖蛋白mRNA表达的影响被引量：3
- 2012年
- 建立了阿部鲻虾虎鱼(Mugilogobius abei)P糖蛋白(P-gp)mRNA荧光定量RT-PCR检测方法,利用该检测方法探讨不同时间、不同浓度DDT和苯并[a]芘(BaP)暴露对阿部鲻虾虎鱼P-gp基因表达的影响。结果显示,该检测方法能在低质量浓度污染物(0.01 mg·L-1DDT、0.005 mg·L-1BaP)暴露下检测到P-gp基因表达量的显著变化(P<0.05)。P-gp基因在正常阿部鲻虾虎鱼肌肉、肝脏、心脏、肠、脑组织中均有表达,在鳃、脾组织中没有检测到表达,DDT和BaP能诱导肝脏和脑中P-gp基因表达量升高。2种污染物暴露5 h均可诱导肝脏表达量的显著变化,随着暴露时间延长,表达量均升高,24 h达到较高表达量。低质量浓度DDT和BaP均能诱导肝脏P-gp基因表达,并呈现良好的剂量-效应关系,而高质量浓度均抑制P-gp的表达。DDT和BaP可影响阿部鲻虾虎鱼肝脏P-gp基因表达,其变化可作为生物标志物,来评价化学污染物对水生动物的生物学效应。
- 刘春李凯彬王庆王芳常藕琴梁慧丽吴淑勤
- 关键词：DDT苯并[A]芘P糖蛋白
- 苯并(a)芘、多氯联苯和滴滴涕暴露对剑尾鱼肝组织块CYP1A、P-gp mRNA表达的影响被引量：3
- 2013年
- 以体外培养剑尾鱼肝组织块为试验材料,研究苯并(a)芘〔B(a)P〕、多氯联苯(PCB)和滴滴涕(DDT)及其混合物对CYP1A、P-gp mRNA表达的影响。试验设6个处理,分别为B(a)P、PCB单独处理组:接受不同剂量B(a)P或PCB(0.5、1、5、10μmol/L)处理6 h;DDT单独处理组:接受不同剂量DDT(0.1、1、10、20μmol/L)处理6 h;B(a)P+PCB、B(a)P+DDT混合暴露组:PCB(1μmol/L)或DDT(1μmol/L)与不同剂量B(a)P(0.5、1、5、10μmol/L)联合染毒6 h;同时设立1‰二甲基亚砜(DMSO)组为溶剂对照组。结果显示,B(a)P单独暴露各组均显著诱导CYP1A mRNA表达,5μmol/L组P-gp mRNA水平与各组差异显著。PCB单独暴露各组CYP1A、P-gp mRNA水平均差异不显著。DDT暴露组10、20μmol/L高剂量组可显著诱导P-gp mRNA表达,各组CYP1A mRNA水平差异不显著。与单独暴露组明显不同的是:B(a)P 10μmol/L+PCB 1μmol/L混合暴露组CYP1A mRNA水平与各组差异显著。混合暴露组P-gp mRNA水平与对照均差异不显著。表明剑尾鱼肝组织块CYP1A、P-gp mRNA水平在单独暴露与混合暴露中呈现不同的表达规律。
- 邓美英邓美英李凯彬李强刘春
- 关键词：苯并(A)芘多氯联苯P-GP
- 剑尾鱼脑细胞系的建立及细胞色素P4501A的诱导表达被引量：2
- 2013年
- 为了构建剑尾鱼脑细胞系并探讨其细胞色素P4501a(CYP1A)基因的诱导效应,实验通过胰蛋白酶消化法对剑尾鱼脑组织进行体外培养,经连续继代培养,建立了可稳定传代的脑细胞系,命名为SFB。SFB最适培养液为含有15%胎牛血清(FBS)的DMEM/F-12和L-15等比混合培养液,培养条件为27℃,5%CO2。生长特性研究表明,第65代细胞的群体倍增时间为43.048h,显示出旺盛的生长和分裂能力。染色体分析发现,培养细胞的染色体众数为48条,SFB核型公式为2n=2st+46t,臂指数(NF)=48,与剑尾鱼一致。诱导实验表明,SFB在10-8～10-5mol/L的苯并(a)芘诱导下,CYP1A mRNA表达量显著提升,且表现出良好的剂量效应关系。脑细胞系的建立为剑尾鱼的毒理学评价研究提供了便利,也为其系统的生态毒理学应用打下基础。
- 王英英李凯彬刘春王庆曾伟伟石存斌吴淑勤
- 关键词：剑尾鱼
- 苯并[a]芘诱导阿部鲻虾虎鱼细胞色素P4501A1表达的研究被引量：2
- 2013年
- 为了解苯并[a]芘(BaP)对鱼类细胞色素P4501A1(CYP1A1)表达的影响,以阿部鲻虾虎鱼(Mugilogobius abei)为试验材料,研究BaP诱导前后鱼体各组织CYP1A1表达情况和质量浓度为0.005 mg/L、0.025 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L、2mg/L BaP暴露后肝脏CYP1A1表达情况。结果表明:CYP1A1基因在正常鱼体的鳃、肌肉、肝脏、脾脏、心脏组织中均有表达,其中肝脏中表达量最高;BaP诱导后,在鳃、肝脏、心脏中表达量分别升高到诱导前的1.3倍、21.6倍和1.3倍;肝脏CYP1A1基因表达量在5 h、12 h、24h分别为诱导前的1.8倍、4.9倍和21.6倍;不同质量浓度BaP暴露24 h后,肝脏CYP1A1基因和蛋白表达量比对照组均有显著性升高(p<0.05),0.1 mg/L暴露组表达量均最高。研究表明,BaP对CYP1A1具有较强的诱导作用,阿部鲻虾虎鱼CYP1A1变化适于作为BaP暴露的敏感生物标志物,可以用来显示暴露于多环芳烃有机污染物鱼类的生活状态。
- 刘春李凯彬王庆王芳常藕琴梁慧丽吴淑勤
- 关键词：生态学苯并[A]芘CYP1A1
- 诺氟沙星对阿部鲻鰕鯱Ⅰ相、Ⅱ相酶活性及CYP1A1和P-gpmRNA表达影响被引量：8
- 2011年
- 通过饲料暴露的方式研究了抗生素诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)对阿部鲻鰕鯱(Mugilogobius abei)Ⅰ相、Ⅱ相代谢酶活性以及CYP1A1和P-糖蛋白(P-gp)mRNA表达的影响.结果表明随着暴露时间的延长,NFLX对阿部鲻鰕鯱肝脏Ⅰ相代谢酶APND、ERND均表现出先诱导后抑制的作用.24h时NFLX的暴露浓度为20μg·g-1对Ⅰ代谢酶APND和ERND的诱导达到最大值.当暴露时间达到168h,APND和ERND均受到显著抑制.Ⅱ相代谢酶GST和MDA在72h受到最大诱导,经过168h暴露后,GST活性逐渐恢复到正常水平,而MDA含量在50μg·g-1浓度组仍然维持较高水平.CYP1A1和P-gpmRNA表达量随着暴露时间的延长而增加,168h达到最大.APND、ERND、GST、MDA、CYP1A1mRNA和P-gpmRNA响应敏感,适合作为NFLX暴露的生物标记物.
- 何秀婷程章聂湘平李凯彬赵晓艳陈菊芳
- 关键词：诺氟沙星CYP1A1P-GP
