厦门市科技计划项目(3502Z20093023)
- 作品数：4 被引量：30H指数：4
- 相关作者：蔡慧农李利君肖安风倪辉吴升山更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程化学工程更多>>
- 黑曲霉DB056分泌的柚苷酶分离纯化及酶学性质研究被引量：9
- 2010年
- 对黑曲霉DB056发酵产生的柚苷酶进行分离纯化并研究其基本特性。粗酶液经硫酸铵沉淀、离子交换层析和凝胶过滤层析分离,所得柚苷酶的比活力为1716.41U/mg蛋白,纯化倍数为17.52倍。柚苷酶具有4个相对分子质量的组分,较适pH值范围4.0～5.0,最稳定的pH4.5;该酶适宜的作用温度范围45～55℃,温度50℃时酶活力最大,45℃和50℃条件下可以分别稳定4h和2h,55℃时柚苷酶1h失活50%;Ag+、Hg2+对柚苷酶具有强烈的抑制作用,其它金属离子对柚苷酶的影响随离子浓度的不同而不同,如0.1mmol/LCa2+、K+、Al3+、Mn2+、Cu2+可提高柚苷酶的活力,而5.0mmol/LFe2+、Al3+对柚苷酶显示抑制作用。
- 卢云真倪辉蔡慧农李利君胡阳肖安风
- 关键词：柚苷酶分离纯化酶学性质
- 黑曲霉DB056发酵α-鼠李糖苷酶和柚苷酶培养基的优化研究被引量：11
- 2010年
- 目的:优化黑曲霉DB056产α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的培养基,提高这两种酶的产量。方法:以α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力为指标,研究碳源、氮源和乳化剂TritonX-100对α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力的影响,优化黑曲霉DB056摇瓶发酵α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的培养基。结果:碳氮源的种类与浓度,乳化剂Tri-tonX-100的浓度对黑曲霉DB056产α-鼠李糖苷酶和柚苷酶有重要影响;黑曲霉DB056产酶的优化培养基是:柚皮苷3.5g/L,玉米浆4g/L,MgSO4·7H2O1.0g/L,KH2PO41.0g/L,KCl0.5g/L,无水CaCl20.1g/L,乳化剂TritonX-1001.0%。此时α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力分别为994U/mL和276U/mL,分别比发酵初始培养基提高了42.3%和147.8%。结论:通过培养基优化,大幅度提高了黑曲霉DB056液态深层发酵α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力。
- 吴升山蔡慧农苏文金倪辉倪辉李利君
- 关键词：黑曲霉发酵培养基柚苷酶高效液相色谱法
- 喷雾干燥法制备柚苷酶固体酶制剂的工艺优化被引量：6
- 2013年
- 以黑曲霉DB056为柚苷酶产生菌,柚苷酶发酵液经冷冻离心、除菌过滤、超滤浓缩和喷雾干燥得到固体酶制剂。以α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶酶活回收率为指标,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法优化喷雾干燥参数,得到最佳喷雾干燥条件是:以麦芽糊精为助干剂,调整可溶性固形物含量为27%,进风温度111.3℃,进料速度161.5mL/h,热风流量5.1m^3/min,出风温度60℃,雾化器压力0.4MPa。在此条件下,α-L-鼠李糖苷酶酶活回收率为79.7%。采用优化的工艺制备柚苷酶固体酶制剂,所得酶制剂中α-L-鼠李糖苷酶活力达19000U/g,酶活总回收率为78.1%;柚苷酶的活力4700U/g,酶活总回收率为28.3%;酶制剂含水量6.5%。
- 肖安风丁涛倪辉李利君杨远帆蔡慧农
- 关键词：喷雾干燥柚苷酶
- 一株产柚苷酶的罗伦隐球酵母的鉴定及柚苷酶表达被引量：8
- 2010年
- 【目的】对一株新分离的、产生柚苷酶的疑似酵母菌株Jmudeb008进行鉴定,确定其分类的种属关系,阐明葡萄糖对该菌株表达柚苷酶的影响。【方法】利用形态观察、核酸分析及生理生化实验对Jmudeb008进行种属鉴定;用含有0.5g/L柚皮苷及不同浓度葡萄糖的培养基培养Jmudeb008,通过检测培养过程柚皮苷、柚皮素及葡萄糖浓度的变化研究葡萄糖对Jmudeb008表达柚苷酶的影响。【结果】Jmudeb008的菌落形态及个体形态都与典型的酵母相似,其26SrDNAD1/D2区域和5.8SrDNA-ITS区域的序列与罗伦隐球酵母（Cryptococcus laurentii）的同源性为99%,葡萄糖发酵试验阴性,尿酶试验阳性,重氮基蓝B试验阳性、硝酸盐还原试验阴性符合该菌种特性,因此鉴定为罗伦隐球酵母。Jmudeb008在以柚皮苷为唯一碳源的培养基中或当培养基中葡萄糖消耗完以后会分泌柚苷酶,而有葡萄糖存在时不分泌柚苷酶。【结论】分离得到了能产柚苷酶的罗伦隐球酵母,该酵母产柚苷酶受葡萄糖分解代谢调节。
- 李利君倪辉肖安风蔡慧农
- 关键词：柚苷酶葡萄糖
