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甘肃省自然科学基金(096RJZA069)
作品数:
2
被引量:7
H指数:1
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王志强
周栋
苏云峰
王成
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CBP基因对肺鳞癌NCI-H520细胞生长侵袭的抑制作用
被引量:6
2010年
目的:研究CSK结合蛋白(CSK-binding protein,CBP)基因转染对人肺鳞癌NCI-H520细胞体外生长侵袭的影响。方法:构建CBP真核表达质粒pcDNA3.0-CBP,以脂质体转染法转染体外培养的人肺鳞癌细胞株NCI-H520,G418筛选出抗性克隆。Western-blotting和RT-PCR分别检测转染前后CBP蛋白和mRNA水平的变化,MTT法分析细胞生长抑制作用,Transwell体外侵袭实验和Wound-healing实验观察细胞的侵袭和迁移能力。结果:稳定转染CBP基因的细胞株有外源目的基因的整合和相应蛋白的高表达。MTT检测表明,pcDNA3.0-CBP转染组活细胞数低于未转染组和pcDNA3.0(-)空载体质粒细胞转染组(P<0.01)。细胞侵袭、迁移实验表明转染pcDNA3.0-CBP的瘤细胞侵袭与迁移能力均明显下降(P<0.01)。结论:外源性CBP基因稳定转染可抑制人肺鳞癌NCI-H520细胞增殖、侵袭的恶性表型。
周栋
杨勇
王志强
王成
张建华
苟云久
李斌
苏云峰
关键词:
肺鳞癌
转染
pcDNA3.0-CBP真核表达质粒的构建及对肺腺癌SPC—A1细胞的影响
被引量:1
2009年
目的观察外源性CBP基因稳定转染对人肺腺癌SPC—A1细胞体外生长的影响。方法构建CBP真核表达质粒pcDNA3.0-CBP,应用pcDNA3.0-CBP和空载体质粒pcDNA3.0(-),脂质体转染法转染体外培养的人肺腺癌细胞株SPC—A1,G418(800mg/L)筛选出抗性克隆。Westem blot检测转染前后CBP蛋白水平变化,噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制作用,Transwell体外侵袭实验和Wound—healing实验对细胞进行侵袭和迁移能力研究。结果转染CBP基因的细胞株有目的基因整合和相应蛋白高表达。MTT检测pcDNA3.0-CBP转染组活细胞吸光度(0.2787±0.0786)低于未转染组(0.5089±0.1301)和pcDNA3.0(-)空载体转染组(0.4804±0.1547)。pcDNA3.0-CBP转染组与两对照组吸光度的差异有统计学意义(P〈0.01)。细胞侵袭实验表明pcDNA3.0-CBP转染组穿透滤膜数(3.52±0.77)明显少于未转染组(8.17±0.86)和空载体转染组(8.22±1.30),转染组与两对照组侵袭力的差异有统计学意义(P〈0.01)。细胞迁移实验转染组细胞迁移数(71.30±7.68)明显少于未转染组(119.40±8.38)和空载体转染组(111.41±12.56),转染组与两对照组迁移力的差异有统计学意义(P〈0.01)。结论外源性CBP基因稳定转染可抑制人肺腺癌SPC—A1细胞的恶性表型,可能通过对Src家族激酶(SFKs)的负反馈调节抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭。
周栋
魏万胜
苏云峰
王志强
王成
苟云久
关键词:
肺腺癌
基因转染
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