国家高技术研究发展计划(2007AA02Z463)
- 作品数：8 被引量：58H指数：4
- 相关作者：陆柔剑谭文杰张陵林周为民王仲更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心北京协和医院北京市第六医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲型H1N1流感病毒感染患者中人冠状病毒和人偏肺病毒感染情况的初步分析
- 2010年
- 目的了解北京地区部分甲型H1N1流感病毒感染确诊急诊患者中人冠状病毒HCoV—OCA3、HCoV-229E、HCoV—NL63、HCoV—HKU1和人偏肺病毒（HMPV）的感染情况和临床表现特点。方法从2009—10-11期间北京地区部分确诊感染甲型H1N1流感病毒病例中，选择采集32份鼻咽拭子标本，利用荧光定量RT—PCR法进行HCoV—OCA3、HCoV-229E、HCoV—NL63、HCoV—HKU1和HMPV筛查；对阳性患者进行临床表现初步分析。结果32份鼻咽拭子标本中荧光定量RT—PCR检出4例（12．5％）HCoV-229E阳性，1例（3．1％）HCoV—HKU1阳性，2例（6．3％）HMPV阳性，未检测到HCoV—OCA3和HCoV—NL63阳性；检出阳性标本的临床表现为急性呼吸道症状，病情较轻，病程多为1周左右。结论2009—10-11北京地区部分确诊的感染甲型H1N1流感病毒病例中存在有人冠状病毒或人偏肺病毒共感染的情况。
- 陆柔剑张陵林谭文杰王仲阮力彭堃
- 关键词：甲型H1N1流感人冠状病毒人偏肺病毒
- 腺病毒分型与诊断方法研究进展被引量：6
- 2008年
- 人腺病毒属于腺病毒科，哺乳动物腺病毒属，到目前为止，人腺病毒共分离到52个血清型，分属于A-G7个亚属。
- 唐浏英
- 关键词：病毒分型腺病毒科哺乳动物人腺病毒血清型
- 人偏肺病毒TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：7
- 2008年
- 目的:建立人偏肺病毒(hMPV)核酸特异的快速、敏感的TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法。方法:分别设计hMPV特异的引物与荧光标记探针,合成hMPV绝对定量RNA模板,建立实时荧光定量PCR方法,并与常规RT-PCR平行比较,对其灵敏性、特异性和可重复性,以及用于临床样本的适用性等进行评价。结果:本方法可对hMPV进行特异性诊断,检测灵敏度可达10拷贝/25μL,检测线性范围至少可达101～106拷贝/反应,且实验重复性好,初步应用于北京地区采集的158份临床鼻咽拭子标本,定量RT-PCR检出31份标本阳性,明显高于常规RT-PCR方法(22/158)。结论:建立了人偏肺病毒TaqMan-MGB探针定量RT-PCR检测方法,并初步证实可用于临床鼻咽拭子标本的检测,为开展hMPV的流行监测及临床早期诊断提供了技术手段。
- 陆柔剑张陵林谭文杰周为民王仲彭堃阮力
- 关键词：人偏肺病毒TAQMAN-MGB探针实时定量PCR
- 人鼻病毒的研究进展被引量：19
- 2011年
- 1概述
急、慢性呼吸道感染是最常见的人类疾病。据统计,平均每人每年发生呼吸道感染的几率大于30%,在儿童中的发病率和病死率更高。除细菌外,病毒是引起呼吸道感染的重要的病原微生物之一。
- 王焕焕毛乃颖王善振王增贤
- 关键词：病毒呼吸道感染病原微生物人类疾病病死率发病率
- 人冠状病毒HCoV-NL63和HCoV-HKU1常规RT-PCR与实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用比较被引量：23
- 2008年
- 分别设计HCoV-NL63和HCoV-HKU1特异的引物与荧光标记探针,并合成含靶基因的模板RNA,建立常规RT-PCR方法与实时荧光定量RT-PCR方法,对其灵敏性、特异性和可重复性以及用于临床样本的适用性等进行平行比较评价。结果表明:这两种方法皆可对HCoV-NL63或HCoV-HKU1进行特异性诊断,其中荧光定量RT-PCR方法检测灵敏度均可达10拷贝/25μL反应体积,不同批次重复检测结果间的变异系数均小于5%。上述方法应用于158份临床鼻咽拭子标本,其中荧光定量RT-PCR方法检出6份HCoV-NL63阳性标本,5份HCoV-HKU1阳性标本,而常规RT-PCR方法则分别检出HCoV-NL63阳性与HCoV-HKU1阳性各3份。对常规RT-PCR方法获得的阳性样品进行序列分析证实上述方法的可靠性。本实验成功建立了可用于临床标本检测的人冠状病毒HCoV-NL63和HCoV-HKU1常规RT-PCR方法与实时荧光定量RT-PCR检测方法,并初步证实荧光定量RT-PCR检测方法检出率明显高于常规RT-PCR方法,这为开展HCoV-NL63和HCoV-HKU1的流行监测及临床早期诊断提供了有效技术手段。
- 陆柔剑张陵林谭文杰周为民王仲彭堃阮力
- 关键词：人冠状病毒
- 2007年秋冬季北京地区成人发热就诊患者中人冠状病毒229E感染状况分析被引量：4
- 2009年
- 目的了解北京地区成人发热就诊患者中人冠状病毒HCoV-229E感染病原学、临床表现和流行病学特点。方法2007年10月至12月从北京地区发热且有呼吸道症状的就诊成人中采集158份鼻咽拭子标本，利用荧光定量RT—PCR法进行HCoV-229E筛查；利用常规PCR方法扩增HCoV-229E基因片段测序；对感染阳性患者进行HCoV-NL63、HCoV-HKU1及HMPV的共感染筛查、临床表现描述和流行病学特点分析。结果158份鼻咽拭子标本中荧光定量RT—PCR检测出103（65．2％）例HCoV-229E阳性；其中26例存在与HCoV—NL63（3例）、HCoV—HKU1（3例）及HMPV（20例）的混合感染；HCoV-229E阳性标本的临床表现以头痛（70．9％）、咽红（70．9％）、咽痛（69％）、寒颤（68％）、咳嗽（33％）、有痰（21．3％）、流涕（21．4％）和鼻塞（16．5％）为主，少量可见呕吐（6．8％）、呼吸困难（3．9％）和腹泻（1．9％）；统计学分析表明其感染与性别、年龄无关。结论人冠状病毒HCoV-229E感染在秋冬季成人发热就诊患者中为常见病原，可合并感染其他病毒。其临床表现呈上呼吸道感染特征。2007年秋冬季在北京地区成人中可能存在HCoV-229E局部流行。
- 陆柔剑张陵林谭文杰周为民王仲彭堃阮力
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
- 人冠状病毒HKU1血清学检测方法的建立及其初步应用被引量：2
- 2010年
- 目的 表达HCoV-HKU1的壳蛋白（N蛋白）及棘突蛋白（S蛋白）,建立检测血清中相应抗体的方法.方法 使用原核表达系统表达纯化HCoV-HKU1的N蛋白,转膜制条建立基于蛋白印迹的N抗体检测方法.构建HCoV-HKU1 S蛋白的真核表达质粒,转染细胞后,用间接免疫荧光（IFA）建立S抗体检测方法.利用已建立的N抗体和S抗体检测方法,检测了100份正常成人血清.结果 经Western Blot检测,S和N蛋白表达正确;利用已建立的血清学检测方法分析100份正常成人血清,其中HCoV-HKU1 S抗体的阳性率为47%,N抗体的阳性率为48哂,S抗体和N抗体均阳性的占总数的21%,双抗体均阴性的占总数的22%.S抗体和N抗体共同检测可获得74%的阳性检出率.结论 所建立的方法可用于HCoV-HKU1血清学分析,共同检测HCoV-HKU1 S抗体和N抗体可获得较好的检测结果.在正常成年中HCoV-HKU1抗体阳性检出率较高.
- 周为民王文玲谭文杰张陵林殷霄陆柔剑王慧娟
- 关键词：冠状病毒属病毒蛋白质类血清学
- 北京地区成人呼吸道感染病人中人偏肺病毒感染情况的初步分析被引量：2
- 2012年
- 目的:了解北京地区成人呼吸道感染患者中人偏肺病毒(hMPV)的感染情况、流行分布和临床表现特点。方法:采集2010年5月至2011年4月北京地区成人呼吸道感染患者鼻咽拭子标本413份,利用巢式PCR法进行hMPV筛查,对PCR阳性片段进行核酸序列测定,确定hMPV感染基因型别;同时,分析hMPV感染的流行病学特点,并对感染阳性患者进行临床表现的初步分析。结果:413份鼻咽拭子标本中检出hMPV阳性4份(0.97%),分别存在于2010年8月、10月和2011年2月、4月,其中1例合并鼻病毒感染;感染患者临床表现主要是发热、鼻塞、流涕、头痛、咳嗽,有1例出现呕吐和腹泻;hMPV阳性片段系统进化分析发现这4例感染中的3例为B2型,1例为A2b型。结论:北京地区成人呼吸道感染患者中存在hMPV感染,其基因型为B2和A2b型。
- 陆柔剑俞晓燕段希洁张陵林王文周为民王仲阮力吕建新谭文杰
- 关键词：人偏肺病毒呼吸道感染成人
