国家自然科学基金(30270892)
- 作品数：3 被引量：26H指数：2
- 相关作者：黄冲李明福张永江魏梅生李桂芬更多>>
- 相关机构：中国检验检疫科学研究院中国农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP基因的克隆、原核表达及其抗血清制备被引量：1
- 2009年
- 本研究通过RT-PCR技术获得了包含李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP蛋白基因的DNA片段,构建了针对pET29a载体的两种表达质粒;转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达了带不同融合肽段的PNRSV1(25 ku)和PNRSV2(29 ku)融合蛋白。经过Ni-NTA亲和柱与SDS-PAGE分离纯化,获得大量表达融合蛋白,并免疫家兔制备了融合表达蛋白的特异性抗体。间接ELISA测定其效价分别为8×103和3.2×104。
- 李明福陈洪俊陈定虎邱德义杨雷亮赵世恒
- 关键词：李属坏死环斑病毒外壳蛋白原核表达蛋白纯化
- 北京怀柔地区樱桃上发现李属坏死环斑病毒被引量：20
- 2005年
- 李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)属雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)等轴不稳环斑病毒属(Ilarvirus),是我国二类检疫性有害生物.PNRSV主要危害李属和蔷薇属植物.如,樱桃、桃、李、月季等.春季感染PNRSV的樱桃早期幼叶会出现深棕色坏死斑和线纹,叶片展开期坏死斑脱落造成穿孔症状.受PNRSV危害后,果树树势减弱,产量降低,甚至死树.我国学者调查陕西、辽宁和山东等省的果树病害时发现并报道了该病毒[1～3].
- 李明福张永江黄冲相宁张秀琴李桂芬魏梅生陈燕芳
- 关键词：环斑病毒樱桃李属PNRSV果树病害
- 李属坏死环斑病毒怀柔分离物(PNRSV-HR)外壳蛋白基因片断的克隆与序列分析被引量：8
- 2005年
- 应用RT-PCR方法检测了采自北京市怀柔区的樱桃叶片,将此PCR扩增产物连接到pMD18-T载体上,通过转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,克隆了含有目的片段的重组质粒,并进行序列测定和分析。序列分析结果表明,认为该分离物外壳蛋白基因片断与李属坏死环斑病毒的NRSiz8株系的同源性最高,为98%,与德国分离物Ring17的同源性达99%;通过进化关系分析,认为该分离物属于引起温和症状的group,认为该分离物的第5,62,81和126位氨基酸也与CH9血清型引起温和症状的保守的替换相同。
- 黄冲李明福张永江
- 李属坏死环斑病毒怀柔分离物（PNRSV-HR）外壳蛋白基因片断的克隆与序列分析
- 应用RT-PCR方法检测了采自北京市怀柔区的樱桃叶片,将此PCR扩增产物连接到pMD18-T载体上,通过转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,克隆了含有目的片段的重组质粒,并进行序列测定和分析。序列分析结果表明,认为该分离物外...
- 黄冲李明福张永江
- 关键词：RT-PCR
- 文献传递
