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黄芪甲苷对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制研究被引量：17: 2014年; 目的:研究黄芪甲苷对肝癌细胞系MHCC97-H增殖和侵袭能力的影响。方法:MTT法检测5、10、20、40、80、100μg/ml不同终浓度和24、48、72h作用时间下黄芪甲苷对MHCC97-H细胞增殖的影响。Transwell侵袭实验检测100μg/ml黄芪甲苷处理48小时对MHCC97-H细胞侵袭能力的影响。选择100μg/ml黄芪甲苷处理48小时作为处理条件,实时定量PCR、Western blot检测黄芪甲苷处理后MHCC97-H细胞MMP-2、9 mRNA和蛋白质表达水平的变化,明胶酶谱法检测黄芪甲苷处理后MHCC97-H细胞培养上清中MMP-2、9分泌水平的变化。结果:各浓度和作用时间下黄芪甲苷对MHCC97-H细胞增殖均无明显抑制作用。100μg/ml黄芪甲苷处理48小时后,MHCC97-H细胞侵袭能力降低,MMP-2、9分子mRNA和蛋白质表达水平均下降,且细胞培养上清中分泌的MMP-2、9减少。结论:体外黄芪甲苷对MHCC97-H细胞增殖无明显抑制作用,但黄芪甲苷可以通过降低MHCC97-H细胞MMP-2、9分子的表达起到降低其细胞侵袭能力的作用。; 马鹏飞阮柏王德盛窦科峰; 关键词：黄芪甲苷肝癌增殖

HGF／Met通路对肝癌细胞株MHCC97-H干细胞样表型的影响被引量：3: 2014年; 目的观察HGF／Met通路对肝癌细胞株MHCC97-H干细胞样表型的影响，探讨其可能的作用机制。方法体外培养肝癌细胞株Huh7和MHCC97-H，采用细胞免疫荧光染色技术筛选高表达Met的肝癌细胞株MHCC97-H，将其分为4组：空白组（不做处理）、HGF刺激组（50μg/L HGF）、抑制组（50μg／LHGF＋1mol／LHGF抑制剂PHA665752）和表皮生长因子（EGF）／成纤维细胞生长因子（FGF）刺激组（50μg/LHGF＋20μg/LEGF＋20μg/LFGF）。Westernblot检测前3组MHCC97-H细胞中Met和磷酸化Met（p-Met）蛋白的表达。培养24h后光镜下观察前3组细胞形态学变化。克隆球形成实验检测4组细胞克隆球形成能力。荧光实时定量PCR检测空白组和HGF刺激组不同时间点（2、4、8、16、24h）MHCC97-H细胞中多能干细胞相关基因表达变化。计量资料采用x±s表示，多组间比较采用单因素方差分析和重复测量的方差分析，两两比较采用LSD—t检验。结果细胞免疫荧光染色检测结果显示：肝癌细胞株MHCC97-H与Huh7细胞比较．前者高表达Met，将其作为后续研究对象。Westernblot检测结果显示：空白组、HGF刺激组和抑制组细胞中Met蛋白的相对表达量分别为0．44±0．04、0．37±0．03和0．41±0．04，3组比较，差异无统计学意义（F=2．31，P〉0．05）。而3组细胞中p-Met蛋白的相对表达量分别为0．020±0．010、0．070±0．020和0．010±0．000，3组比较，差异有统计学意义（F=34．11，P〈0．05），其中HGF刺激组p-Met蛋白的表达水平高于空白组和抑制组（t=3．87，5．20，P〈0．05）。HGF刺激组MHCC97-H细胞形态呈现长梭状问质样改变，而抑制组和空白组细胞形态相似，呈上皮样。克隆球形成实验结果表明：空白组、HGF刺激组、抑制组和EGF／FGF刺激组克隆球数目分别为0、（35．0±6．3）个、（4．3±1．5）个和（54．3±2．5）个，4组比较，差异有统计学意义（F：511; 阮柏王德盛刘杰李侠张卓超黄启科于泳窦科峰; 关键词：肝细胞生长因子 MET 多能干细胞

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陕西省科学技术研究发展计划项目(2012SF2-09-1)

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