国家自然科学基金(81000035)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- 相关机构:南华大学湖南师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省科技厅项目更多>>
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- 心肌特异性Hole转基因小鼠模型的构建与鉴定
- 2013年
- 目的:建立在小鼠心肌细胞中特异性过表达Hole转基因小鼠。方法:构建心肌特异性过表达Hole的转基因载体,显微注射导入小鼠受精卵,通过胚胎移植,获得转基因首建者小鼠。利用PCR检测Hole基因整合情况,并通过实时定量PCR检测Hole基因过表达效率。结果:PCR检测发现有6只小鼠在其基因组上整合有Hole载体基因。实时定量PCR结果显示,在心脏组织中Hole基因的转录本表达明显升高。结论:成功建立了在小鼠心肌细胞中特异性过表达Hole转基因小鼠,为研究Hole基因在心脏发育与相关疾病中的功能及机制提供了动物模型。
- 徐伟周军媚江志刚刘明范雄伟王跃群吴秀山
- 关键词:HOLEGENE心肌细胞心脏小鼠转基因
- 小鼠睾丸基因PDZD9的克隆及亚细胞定位分析被引量:1
- 2012年
- 目的克隆小鼠睾丸基因PDZD9并构建pEGFP-C1-PDZD9重组载体进行亚细胞定位分析。方法提取小鼠睾丸RNA,利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术从小鼠睾丸cDNA中分离PDZD9基因。将PDZD9基因定向克隆至带有绿色荧光报告基因的真核表达载体pEGFP-C1。利用阳离子聚合物方法转染COS7细胞,荧光显微镜下观察其亚细胞定位。结果小鼠睾丸基因PDZD9克隆成功,成功构建真核表达载体pEGFP-C1-PDZD9,亚细胞分析表明该蛋白定位于细胞核和细胞质中,主要分布在细胞核中。结论成功克隆了小鼠睾丸基因PDZD9,并初步分析了其在细胞中的定位情况,为下一步对PDZD9的功能研究奠定了基础。
- 周军媚姚峰刘鑫王宗保吴端生陈春芳贺震余坚
- 关键词:克隆转染亚细胞定位