国家自然科学基金(30572277)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- β-内酰胺酶抑制多肽的串联表达及抑制活性研究
- 2009年
- 细菌对β-内酰胺类抗生素及β-内酰胺酶抑制剂产生耐受性使新型β-内酰胺酶抑制剂成为抗生素领域的研究热点。之前的研究通过酵母双杂交系统筛选到了一个β-内酰胺酶的结合多肽SIPIS04-01,体外实验表明其具有抑制氨苄西林的活性,为提高多肽的表达量,以基因串联表达方式-随机定向串联法成功构建密码子改造之后的小肽SIPIS04-01编码基因SIPIS04-01N的双拷贝质粒pYG563,使表达产物中融合蛋白占细菌蛋白总量的比例较单拷贝表达提高了48.4%。纯化所得小肽SIPIS04-01N对TEM-1类型的β-内酰胺酶具有体外抑制活性,并测定了抑制常数Ki。
- 许明飞谢丽萍杨涛朱春宝朱宝泉胡又佳
- 关键词：Β-内酰胺酶抑制剂
- 来自肺炎克雷伯菌的SHV型β-内酰胺酶基因的克隆、表达与纯化被引量：1
- 2008年
- 为研究先前筛得的可抑制TEM-1型β-内酰胺酶的多肽SIPIS-04-01对SHV型β-内酰胺酶的结合能力,从一株临床耐β-内酰胺类抗生素的肺炎克雷伯菌10032克隆了SHV型β-内酰胺酶基因,并替换质粒pUC18上原有的bla基因,转化大肠杆菌DH5α后表明该基因使宿主菌具有抗氨苄青霉素的能力。进一步将其克隆到一个高效表达载体pLY-5中,优化表达和纯化条件获得了SHV型β-内酰胺酶。体外试验证明该酶能降解氨苄青霉素,重组多肽SIPIS-04-01对此降解有所抑制。
- 杨涛胡又佳谢丽萍朱宝泉朱春宝
- 关键词：肺炎克雷伯菌
