国家自然科学基金(30270955)
- 作品数：22 被引量：108H指数：6
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- hCG通过ERK1/2调节睾丸间质细胞StAR蛋白的表达被引量：2
- 2006年
- 以2-3周龄的仔猪睾丸间质细胞为试验材料,研究了hCG在快速调节期对StAR蛋白表达的调节机制。结果表明:hCG、8-Br-cAMP均能使StAR蛋白、mRNA和P-ERK1/2的水平随刺激时间的延长逐渐增加,8-Br-cAMP作用的速度较hCG更快,增幅也更明显;加入PKI,StAR蛋白、mRNA和P-ERK1/2活性明显下降,但StAR mRNA仍然可以检测到;加入MAPK的抑制剂PD98059后,StAR蛋白、mRNA的水平均降低。由此可知,hCG在诱导StAR蛋白的表达过程中,首先通过cAMP-PKA直接调节蛋白前体蛋白向成熟蛋白的转化,随着时间的延长,通过cAMP-PKA-ERK1/2级联,磷酸化转录因子,促进StAR基因的表达。
- 王鲜忠孙燕潘红梅吴建云张家骅
- 关键词：HCGCAMPERK
- H_2O_2对睾丸支持细胞凋亡的影响被引量：1
- 2009年
- 本试验利用H2O2处理培养的仔猪睾丸支持细胞(SC),通过细胞活力检测、酶活性检测、电镜观察、流式细胞仪等方法,研究H2O2对SC凋亡的影响。结果发现,H2O2对SC的作用具有时间和剂量依赖性,600μmol/L的H2O2能诱导SC的凋亡率明显增加,细胞的超微结构受到破坏,出现明显的凋亡小体,同时也发现细胞的抗氧化能力下降。这表明,H2O2通过降低细胞的抗氧化能力,促进了SC的凋亡。
- 王鲜忠袁小丽孙燕吴建云张家骅
- 关键词：过氧化氢睾丸支持细胞细胞凋亡
- 利用免疫印迹技术检测睾丸中几种20～50ku蛋白的表达
- 2007年
- 为了建立睾丸中20～50 ku蛋白的免疫印迹检测技术,我们从蛋白提取、电泳条件、转膜条件、免疫反应条件等多方面进行了摸索。结果表明:RIPA和蛋白酶抑制剂不仅能保证蛋白提取的效率,而且可以有效防止蛋白降解;电泳时采用10%的分离胶,可以达到较好的分离效果;采用蛋白预染分子标准结合DAB染色可以获得较好的结果。利用上述程序检测了StAR蛋白、P-ERK和ERK的表达,得到了比较满意的效果。
- 王鲜忠吴建云孙燕罗英张家骅
- 关键词：免疫印迹睾丸蛋白质小鼠
- HCG通过StAR蛋白快速调节睾酮的合成被引量：5
- 2005年
- 以2～3周龄长白仔猪睾丸间质细胞为材料研究HCG对睾酮合成的快速调节作用.结果表明:(1)在2 h内,对照组间质细胞分泌睾酮的量为(3.25±0.28)ng/mL,而HCG(浓度为50 IU/mL)处理组睾酮的浓度为(8.79±0.54)ng/mL,增幅为4.54 ng/mL,二者差异极显著(P<0.01);(2)在2 h内,对照组细胞内cAMP的浓度为(13.13±1.12)pmol/mL,而处理组cAMP的浓度为(39.22±2.38)pmol/mL,二者之间差异极显著(P<0.01);(3)加入前体物后,胆固醇对照组睾酮浓度为(3.81±0.45)ng/mL,处理组睾酮浓度为(27.13±1.27)ng/mL,处理组睾酮的浓度明显高于对照(P<0.05),其它几种前体对照组与处理组差异不显著(P>0.05).(4)在2 h内,HCG增加了StAR蛋白和mRNA的表达.这表明在快速反应期,HCG通过促进StAR蛋白的表达,增强睾酮的生物合成.
- 王鲜忠潘红梅孙燕吴建云张家骅
- 关键词：HCG睾丸间质细胞睾酮
- c-jun对体外培养仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的影响被引量：3
- 2010年
- 本试验用c-jun ASODNs诱导c-jun基因发生转录后沉默，探讨原癌基c-jun对仔猪睾酮分泌的作用及可能机制。以2～3周龄长白仔猪为研究对象，采用体外培养体系，研究c-jun对基础状态下和hCG诱导下闯质细胞（Leydig cell，LC）睾酮分泌及基础状态下LC增殖及凋亡的影响。结果显示，c-jun ASODNs以剂量依赖性方式抑制基础状态下和hCG诱导下睾酮分泌（P〈0．01）及基础状态下LC增殖（P〈0.01），当1μmol／L c-jun ASODNs时，显著抑制LC的凋亡（P〈0．05）。结果表明，c-jun在基础状态下还是hCG诱导下均可促进仔猪LC睾酮的分泌，这种作用与c-jun促进LC增殖和凋亡有关。
- 郑小波肖向前王鲜忠张家骅
- 关键词：C-JUNHCG睾酮合成
- StARmRNA在仔猪睾丸组织中的表达研究被引量：2
- 2007年
- 类固醇合成快速调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)在调节类固醇合成中发挥了重要作用,为了认识StAR蛋白在仔猪性腺发育早期中的表达,以7、14、23、37日龄的仔猪睾丸为研究对象,采用组织原位杂交方法研究了StARmRNA在仔猪睾丸中的表达水平。结果表明:在7、14、23、37日龄的仔猪睾丸中,StARmRNA在睾丸的间质细胞中表达,其中在7日龄StARmRNA表达很弱,14、23、37日龄StARmRNA表达较强,StAR蛋白在这一时期的睾丸间质表达与其合成睾酮的能力一致。
- 詹晓庆王鲜忠孙燕王满意张家骅
- 关键词：仔猪睾丸
- AZF微缺失与男性不育被引量：9
- 2006年
- Y染色体是男性特有的染色体,其上含有与精子发生相关的基因。越来越多研究证实AZF区基因微缺失与男性不育密切相关,并且可能以正常生殖或辅助生殖方式遗传给后代引起不育。本文从Y染色体微缺失基因类型、Y染色体缺失机制及Y染色体微缺失的临床意义三个方面综述。
- 高小燕杨国锋孙燕张家骅
- 关键词：男性不育Y染色体微缺失ICSIAZF
- 仔猪睾丸组织c-jun mRNA表达量与其血浆睾酮水平关系研究被引量：1
- 2011年
- 对不同时期仔猪血浆睾酮含量和睾丸组织c-jun mRNA表达量进行了检测,以初步推测c-jun mRNA表达与睾酮分泌的关系,为进一步体外研究原癌基因c-jun对睾酮分泌的影响奠定基础。试验选择1、3、5周龄仔猪作为研究对象,利用睾酮ELISA检测试剂盒检测血浆中睾酮含量;采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测睾丸组织c-jun mRNA的表达。结果表明,仔猪血浆睾酮水平随周龄增加而显著升高,其中3周龄时睾酮含量最高;c-jun在各周龄睾丸组织中均有表达,其中3周龄仔猪睾丸组织c-jun mRNA表达量最高。因此,仔猪睾酮分泌与c-jun mRNA表达量可能存在相关性。
- 姚银竹肖榕吴群郑之琬卿丽娟徐茂森郑小波
- 关键词：仔猪睾酮睾丸组织
- 仔猪睾丸组织体外培养方法的建立被引量：6
- 2007年
- 以30日龄仔猪睾丸组织块为培养对象,应用飞利普TECNAI10电子显微镜对培养前后的生精细胞类别进行了观察,对培养后的组织块进行生精细胞分化程度鉴定,建立了仔猪睾丸组织生精细胞爬片体外培养模型。培养前后电镜观察及HE染色结果显示,培养前细胞种类主要有2种:支持细胞和精原细胞,有少数几个初级精母细胞;培养第20 d的睾丸组织块HE染色观察到3个精子细胞,电镜观察到2个精子细胞。证实,在没有添加睾酮的情况下,此培养体系能够提供睾丸组织块生精细胞分化所需要的条件,使非精子细胞类生精细胞减数分裂为精子细胞。
- 高小燕孙燕王鲜忠张家骅
- 关键词：睾丸组织块培养透射电镜HE染色
- 雌激素受体和雌性生殖研究进展被引量：24
- 2005年
- 雌激素通过雌激素受体(ER)在雌性生殖活动中起着重要作用,雌激素受体是配体依赖的转录调节因子,属核受体超家族成员。目前认为存在2种亚型:即经典的ERα和新发现的ERβ。利用基因敲除技术研究表明,ERα和ERβ对于卵巢的发育不是必需的,但ERα可通过负反馈回路调节排卵,而ERβ通过卵巢内和卵巢外2条途径调节卵泡的发育和排卵,两者共同作用以维持雌性性征、卵泡发育和排卵等生理活动;在子宫中,ERα占主导作用,在子宫成熟和胚胎附植过程中起着重要作用,ERβ则能以反应特异性和剂量依赖性的方式调节ERα的作用。
- 詹晓庆王鲜忠张家骅
- 关键词：雌激素受体子宫卵巢基因敲除
