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副突变及其发生机制和演化意义被引量：1: 2008年; 上世纪50年代科学家首次在玉米中发现副突变(paramutation),后来陆续在其他生物体中也发现了这种现象。副突变是一种不符合孟德尔遗传法则的遗传模式。近来运用现代分子生物学技术研究表明,RNA是副突变发生的基础机制,涉及表观遗传(epigenetic inheritance)调控及染色体结构的动态变化。副突变的演化有着重要的生物学意义,了解副突变将有助于农作物的改良及人类遗传疾病的治疗。本文综述了副突变的研究进展,以期为相关的教学和研究整理资料。; 张平邢万金; 关键词：副突变 RNA 异染色质

哺乳动物出生后卵巢中卵子再发生的研究进展: 2008年; 关于哺乳动物出生后卵巢内是否有新的卵子继续发生或者说出生后的卵巢中是否存在生殖干细胞以维持卵子继续发生问题,一直存在争议。占主流的观点是"出生后的卵巢内卵泡不可更新"说,但仍不断有报道对此论断提出挑战。这既是个生殖生物学的重大基础理论问题,又对雌性生殖、生殖医学、生殖期的延长及干细胞研究等许多相关问题有着极大的影响和深远的意义。因此就这一争议性问题的研究进程作简要回顾。; 张平邢万金; 关键词：卵子发生

大鼠RVLG cDNA的克隆、原核表达和小鼠抗RVLG蛋白多克隆抗体的制备被引量：10: 2008年; 为了识别大鼠卵巢中的生殖细胞,在原核系统中表达和纯化RVLG蛋白并制备了多克隆抗体。采用RT-PCR方法从大鼠睾丸组织中扩增获得RVLG cDNA片段,然后克隆到pMD19-T载体上进行测序,经双酶切回收目的基因片段后,将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1上,转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。纯化后的GST-RVLG融合蛋白免疫昆明(KM)小鼠,最后给小鼠腹腔注射S180细胞制备抗RVLG腹水多克隆抗体。用Western blotting及免疫组织化学法鉴定RVLG腹水多克隆抗体的特异性,间接ELISA法测定该抗体的效价。序列分析表明,所克隆的RVLG cDNA片段比GenBank中报道的大鼠RVLG cDNA(NM_001077647)多60 bp,原因是由于RVLG的可变剪切方式造成的。本研究成功构建了重组表达质粒pGEX-RVLG,且GST-RVLG融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,表达的目的蛋白占菌体总蛋白的10%以上。制备的抗体可特异性识别RVLG蛋白,其效价达1:20 000。获得的高效价、高特异性的小鼠抗RVLG蛋白腹水多克隆抗体为下阶段研究RVLG的特异性表达奠定了基础。; 张平邢万金包晓红刘志达王连庆李舜尧乌日嘠; 关键词：原核表达多克隆抗体

红色荧光蛋白DsRed2基因在大肠杆菌中的表达和观察及其在本科实验教学中的应用被引量：10: 2008年; 用PCR方法从质粒pDsRed2-1中扩增获得DsRed2,亚克隆到pMD19-T载体上,然后酶切将DsRed2分别插入到原核表达载体pET-Trx和pGEX-4T1上,转入E.coli BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达.在LB平板培养基上或液体培养基中直接观察菌体颜色,最后用SDS-PAGE检测DsRed2蛋白的表达.结果显示构建的重组载体pET-Trx-DsRed2和pGEX-GST-DsRed2在E.coli中成功表达,且不形成多聚体.LB平板培养基上和IPTG诱导24h后的液体培养基中都能直接观察到红色荧光,说明DsRed2可以作为原核表达系统的报告基因.; 邢万金赵宇航任仕超包晓红; 关键词：原核表达红色荧光蛋白实验教学

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内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJ05026)