汕头市科技计划项目(20068222)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：陈惠芹吴北燕张绪超黄绍良更多>>
- 相关机构：汕头大学医学院第一附属医院中山大学附属第二医院广东省人民医院更多>>
- 发文基金：汕头市科技计划项目国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胚AGM区造血干／祖细胞的分离及其在含AGM区基质细胞体系中的培养
- 2008年
- 本研究分离人胚主动脉-性腺-中肾(AGM)区造血干/祖细胞(HSPC)并在含人AGM区基质细胞的培养体系中进行培养,以了解人AGM区基质细胞对HSPC的作用。以免疫组织化学方法检测人胎龄28-45天胚胎AGM区细胞CD34、Flk-1、VEGF的表达;分离AGM来源的HSPC,通过直接接种和经Transwell非直接接触两种方法接种于含人AGM区基质细胞系(hAGMS3和hAGMS4)饲养层的培养体系,观察HSPC生长情况和卵石区形成细胞(cobblestone area-forming cells,CAFC)并计数卵石区(cobblastone area,CA);用间接免疫荧光方法检测培养体系中悬浮细胞和CAFC的CD34、Flk-1表达;收获细胞进行半固体造血集落培养以检测两种培养方法对AGM-HSPC的集落形成能力影响。结果表明:人AGM区造血细胞表达CD34和Flk-1。两种接种方法均显示有CFC形成,直接接触培养能形成CD34和Flk-1双阳性的CAFC,集落总数明显高于非接触培养(hAGMS3体系:1647±194vs389±31,p<0.05;hAGMS4体系:1586±75vs432±35,p<0.05)。结论:①人胚AGM区含有CD34+Flk-1+的HSC。②首次建立含人胚AGM基质细胞的AGM-HSPC培养体系,直接接触培养和非直接接触培养均能促进AGM-HSC的生长,AGM基质细胞与HSC直接接触发挥重要作用。
- 吴北燕黄绍良陈惠芹张绪超
- 关键词：主动脉-性腺-中肾区基质细胞
