国家自然科学基金(30270970)
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
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- 质粒DNA经胃肠道吸收整合宿主基因组的可能性评价被引量：2
- 2004年
- 给小鼠灌胃裸pcDNA3s质粒DNA,于3周后提取小鼠肺、肾、脾、肠系膜淋巴结、胸腺、生殖器官、肌肉及肝脏组织中的总DNA,琼脂糖凝胶分离游离质粒DNA与基因组DNA,以组织基因组DNA为模板,PCR法检测质粒DNA的整合率.对照模板中加入不同拷贝数的pcDNA3s质粒,确定PCR反应的敏感性.结果表明,各组织基因组DNA经PCR扩增均呈阴性,低于PCR反应的最低检出率.pcDNA3s质粒可能整合入宿主基因组的拷贝数是基因自发突变率的1/3000,尚未发现外源质粒DNA经胃肠道途径整合入宿主基因组的证据.
- 刘建文施用晖乐国伟方希修
- 外源质粒DNA对小鼠脾脏物质能量代谢的影响被引量：1
- 2006年
- 研究外源质粒DNA经胃肠道途径对免疫激活状态下小鼠脾脏代谢的影响。给Balb/c小鼠灌喂质粒pcDNA3200μg,分别在灌喂后4h和18h分离脾脏,提取脾脏总RNA。利用Affymetrix基因表达谱芯片对灌喂质粒pcDNA3后的Balb/c小鼠脾脏进行基因表达谱研究。采用Genmmapp和MAPPFinder软件进行功能聚类分析。对上调倍数两倍及两倍以上的基因进行功能聚类发现,灌喂后4h,外源质粒刺激小鼠脾脏产生免疫应答的同时,脾脏中嘌呤代谢及蛋白质合成,胆固醇合成、脂肪酸合成、糖酵解、三羧酸循环及线粒体氧化磷酸化途径等大量代谢过程受到诱导。在灌喂后18h也得到类似的结果。结果表明外源质粒DNA可通过胃肠道途径吸收影响小鼠脾脏物质能量代谢过程。结果有助于在分子水平上深入了解外源质粒DNA经胃肠道吸收后的作用机制。
- 刘建文施用晖乐国伟
- 关键词：脾脏代谢基因芯片
- 外源DNA在动物体内的吸收代谢被引量：4
- 2004年
- 综述了外源DNA在动物体内组织和细胞的代谢命运。外源DNA经核酸酶不完全降解后可以通过胃肠道被哺乳动物吸收,外源DNA片段能够被哺乳动物细胞吸收并整合到宿主细胞基因组中。
- 刘建文乐国伟施用晖
- 关键词：外源DNA哺乳动物细胞核酸酶胃肠道
- 外源质粒DNA经胃肠道途径对小鼠免疫功能的影响
- 目的:本实验研究了外源质粒DNA经胃肠道吸收后对小鼠免疫功能的影响。方法:观察外源质粒pcDNA3对小鼠胸腺、脾脏指数,脾脏淋巴细胞转化率,脾脏抗体细胞生成含量,血清溶血素水平,巨噬细胞吞噬指数及吞噬率的影响,并考察了外...
- 刘建文乐国伟施用晖方希修
- 关键词：免疫胃肠道
- 文献传递
- 外源质粒pcDNA3s疫苗在小鼠体内组织代谢动力学研究被引量：2
- 2004年
- 为分析外源质粒pcDNA3s肌肉注射后在小鼠体内的组织分布及评价整合到宿主基因组上的可能性.通过PCR方法检测质粒pcDNA3s经肌肉注射在各组织中的分布及随时间变化的情况.检测外源质粒在基因组DNA上的整合情况.注射后3h所有的组织均能检测到质粒,至第3周时只有胸腺和生殖器官能检测到质粒的存在,至第6周后各组织均为阴性.各组织基因组DNA经PCR扩增均为阴性.肌注外源质粒后,外源质粒在小鼠细胞内逐渐被清除,外源质粒不会整合到宿主染色体上.
- 刘建文乐国伟施用晖
- 关键词：代谢动力学染色体
- 外源质粒DNA对小鼠肝脏基因表达谱的影响
- 2006年
- 研究了外源质粒DNA经胃肠道吸收可能对肝脏产生的作用机制。给Balb/c小鼠灌胃质粒pcDNA3 200μg,在灌胃后4 h分离肝脏,提取肝脏的总RNA。利用寡核苷酸芯片对灌胃质粒pcDNA3后的Balb/c小鼠肝脏进行基因表达谱研究。结果发现17 664个基因中,表达上调100条,表达下调41条。按基因功能分类,表达上调的基因可分为免疫应答基因、转录因子基因、信号转导基因、转运相关基因及代谢相关基因等;表达下调的基因主要为脂质代谢基因。灌胃外源质粒DNA后,肝脏组织主要表现为急性时相反应的加强、免疫反应的活化、细胞信号通路的活化以及脂质代谢途径的抑制。表明外源质粒DNA通过胃肠道途径可广泛调控肝脏的基因表达。
- 刘建文施用晖乐国伟
- 关键词：寡核苷酸芯片肝脏基因表达
- 外源质粒DNA经胃肠道途径对小鼠免疫功能的影响
- 目的:本实验研究了外源质粒DNA经胃肠道吸收后对小鼠免疫功能的影响。方法:观察外源质粒pcDNA3对小鼠胸腺、脾脏指数,脾脏淋巴细胞转化率,脾脏抗体细胞生成含量,血清溶血素水平,巨噬细胞吞噬指数及吞噬率的影响,并考察了外...
- 刘建文乐国伟施用晖方希修
- 关键词：免疫胃肠道
- 外源质粒DNA经胃肠道途径对小鼠免疫基因的调控作用被引量：2
- 2005年
- 目的:研究外源质粒DNA经胃肠道途径对小鼠免疫基因表达的调控作用。方法:给BALB/c小鼠灌胃质粒pcDNA3200μg,分别在灌胃后4h和18h分离脾脏,提取脾脏总RNA。利用Affymetrix基因表达谱芯片对灌胃质粒pcD-NA3后的BALB/c小鼠脾脏进行基因表达谱研究。采用Genmmapp和MAPPFinder软件进行功能聚类分析。结果:灌胃质粒pcDNA3后,大量与免疫应答相关的基因发生上调,这些基因包括转录因子、细胞因子和细胞因子受体、主要组织相容性基因、蛋白酶体基因、补体分子基因和细胞凋亡相关基因;下调的基因主要是免疫球蛋白基因。MAPPFinder分析结果显示大量免疫应答过程发生上调。结论:外源质粒DNA通过胃肠道途径可调控大量免疫基因的表达,对相关基因及免疫应答过程的研究有助于在分子水平上深入了解外源质粒DNA的胃肠道作用机制。
- 刘建文乐国伟施用晖
- 关键词：基因芯片免疫基因表达
