国家科技部农业科技成果转化资金(OIEFN213201078)
- 作品数：5 被引量：25H指数：3
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- 表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的筛选被引量：3
- 2006年
- 将转移载体P11SF和PN11SF分别与282E4株鸡痘病毒(282E4strain fowlpox virus,282E4FPV)和大空斑株鸡痘病毒(large plaque strain fowlpox virus.LP FPV)共转染鸡胚成纤维细胞,通过蓝斑筛选,得到4株重组鸡痘病毒rFPV282E4-SFA、rFPVLP-SFA、rFPV282E4-SFB和rFPVLP-SFB,通过PCR和间接免疫荧光鉴定均为阳性,另外将各重组病毒分别传20代,测其遗传稳定性,结果显示均具有良好的稳定性。对SPF鸡进行免疫效力试验,攻毒后均100%保护,而对于商品鸡,保护率分别为64%、60%、52%和88%。
- 张体银孙蕾梁萍刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒免疫效力
- 表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性被引量：11
- 2006年
- 本实验为了评价表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV282E4-SF,rFPVLp-SF)的遗传稳定性,将其在鸡胚成纤维细胞连续培养20代。通过蓝斑来鉴定重组鸡痘病毒纯度,结果所有蚀斑100%变蓝。通过对第0、10和20代F基因扩增并进行序列测定,所有碱基和氨基酸序列均和原始转移载体序列完全一致,没有发生任何改变。随后又通过间接免疫荧光证实rFPV282E4-FS和rFPVLP-FS各个代次F基因的特异表达。所有结果均显示了上述重组鸡痘病毒具有良好的遗传稳定性,满足兽医生物制品的遗传稳定性要求。
- 张体银孙蕾刘武杰刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒
- 应用间接ELISA检测鸡痘病毒抗体方法的建立被引量：5
- 2005年
- 建立了检测鸡痘病毒抗体的间接 EL ISA方法。应用该方法检测鸡痘阳性血清 ,其灵敏度为琼脂扩散试验的 4 0 0~ 80 0倍 ,而且还具有特异性强、操作简便。
- 张体银李军伟孙蕾孙学辉张如宽刘秀梵
- 关键词：间接ELISA鸡痘病毒抗体检测鸡痘
- 应用间接ELISA检测鸡痘病毒抗体方法的建立被引量：4
- 2005年
- 应用鸡胚成纤维细胞(CEF)扩增鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)并提纯后作为抗原建立了具有较高特异性和灵敏性的间接ELISA方法.通过方阵滴定法来确定抗原最佳包被浓度为2.7μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1:100,其阳性临界值为OD≥0.113.将400份FPV免疫实验鸡血清用本方法进行检测,其阳性检出率为81.25%(325/400).此外,将该方法与琼脂扩散试验进行比较检测血清样品,结果显示本方法的灵敏度比琼脂扩散试验灵敏400～800倍,而且还有特异性强,操作简便、快速等优点.
- 张体银孙蕾孙学辉刘秀梵
- 关键词：间接ELISA鸡痘病毒抗体
- 新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的安全性及免疫效力被引量：2
- 2008年
- 将重组鸡痘病毒rFPVLP-SF分别皮下接种1日龄SPF鸡和26日龄商品鸡,评价其安全性和免疫效力。SPF鸡接种后除282E4株鸡痘病毒组在接种部位出现痘斑外,其他组鸡无任何临床症状。抗体检测结果表明,免疫接种后rFPVLP-SF组鸡的血清抗体水平没有显著变化,免疫后第21 d以1×105ELD50的F48E8株NDV滴鼻攻毒,观察14 d,rFPVLP-SF和油乳剂灭活疫苗免疫鸡的保护率分别为92%和100%,二者没有显著差异;大空斑株鸡痘病毒组和攻毒对照组鸡均全部死亡。结果显示,该重组病毒具有良好的安全性和免疫效力,有一定的应用前景。
- 张体银王光锋孙蕾梁萍刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒安全性免疫效力
