国家自然科学基金(30873452)
- 作品数：1 被引量：6H指数：1
- 相关作者：李厚华徐彦军付春祥赵德修虞珍珍更多>>
- 相关机构：中国农业大学中国科学院植物研究所中国科学院研究生院更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 水母雪莲查尔酮合酶基因的克隆、表达及酶活分析被引量：6
- 2011年
- 从水母雪莲Saussurea medusa Maxim.cDNA文库中得到一段查尔酮合酶基因(SmCHS)片段,然后通过RT-PCR得到完整的查尔酮合酶基因cDNA。序列分析表明SmCHS全长1 313 bp,其开放阅读框为1 170 bp,编码389个氨基酸,预测表达蛋白的分子量为43 kDa。构建原核表达质粒pET28a(+)-SmCHS,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株。经IPTG诱导表达后,对表达产物进行SDS-PAGE分析,结果显示,表达的融合蛋白以部分可溶的形式存在。用Ni-NTA预装柱对融合蛋白进行亲和纯化,对纯化蛋白进行酶活检测,结果表明融合蛋白具有查尔酮合酶活性,可催化底物4-香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A缩合生成产物柚皮素查尔酮。
- 夏芳李厚华付春祥虞珍珍徐彦军赵德修
- 关键词：水母雪莲查尔酮合酶原核表达纯化
