哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(RC2012XK002003) 作品数:3 被引量:9 H指数:2 相关作者: 任晓峰 贾文龙 孙雪娇 邹昊 刘和 更多>> 相关机构: 东北农业大学 更多>> 发文基金: 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 环境科学与工程 更多>>
猪传染性胃肠炎病毒M蛋白的表达与抗体制备 被引量:3 2014年 文章表达猪传染性胃肠炎病毒TGEV M基因,制备抗M蛋白多克隆抗体。扩增的M基因经Bam H I和Eco R I双酶切后克隆到原核表达载体PGEX-6P-1上,构建重组表达质粒PGEX-6P-1-TGEV-M,经IPTG诱导,获得以包含体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白作为免疫原免疫大白兔制备兔抗TGEV-M抗体,进行效价测定及生物活性检测。结果表明,多抗效价达1:262 144;间接ELISA和间接免疫荧光试验说明,此多抗可与TGEV-M重组蛋白及TGEV发生抗原抗体反应。此多抗可作为鉴别诊断试剂将TGEV从众多猪源病毒中区分出来。 任晓峰 邹昊 孙雪娇关键词:猪传染性胃肠炎病毒 原核表达 抗体制备 猪流行性腹泻病毒S1蛋白截短表达及多抗制备 被引量:6 2013年 文章旨在表达猪流行性腹泻病毒PEDV截短S1基因(rS1636-789),并制备特异性多克隆抗体。扩增PEDV rS1636-789基因克隆到原核表达载体PGEX-6P-1上,构建重组表达质粒PGEX-6P-1-rS1636-789,经IPTG诱导,获得以包含体形式表达重组蛋白。将重组蛋白作为免疫原制备兔抗rS1636-789抗体并进行效价测定及生物活性检测。结果表明,多抗效价达1:65 536,间接ELISA和Western blot说明此多抗可与rS1636-789重组蛋白发生很好抗原抗体反应。研究进一步定位PEDV S蛋白免疫优势区,为PEDV基因工程疫苗研究奠定基础。 任晓峰 贾文龙关键词:猪流行性腹泻病毒 表位 原核表达 抗体制备 猪繁殖与呼吸综合征病毒HH08株GP3蛋白的原核表达及其多抗血清的制备与检测 2013年 GP3蛋白是猪繁殖与呼吸综合征病毒次要结构蛋白之一,是由ORF3基因编码一种高度糖基化糖蛋白,在病毒致病性、复制、装配、变异和保护性反应等方面具有重要意义。目前对GP3蛋白研究仍不透彻,在病毒感染细胞过程中所起作用也不清楚。试验扩增PRRSV-HH08株ORF3,连接至PGEX-6P-1载体,导入大肠杆菌内诱导表达,获得以包涵体存在GP3蛋白,纯化后作为抗原制备兔抗GP3多抗血清,Western-blotting结果表明,该蛋白与多抗血清有免疫反应,鉴于ORF3与ORF5基因保守度极低,可用于与其他蓝耳病毒株GP3或GP5蛋白为抗原制作多抗血清比较敏感性及特异性。 任晓峰 刘和关键词:PRRSV 抗血清