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4种ELISA检测奶牛O型口蹄疫免疫抗体的比较试验被引量：2: 2010年; 张润祥高明春李爽王君伟; 关键词：O型口蹄疫 ELISA检测免疫抗体奶牛世界动物卫生组织口蹄疫病毒

规模化奶牛场口蹄疫O-Asia 1型二价灭活苗不同免疫程序免疫抗体水平分析被引量：5: 2011年; 口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的以感染偶蹄动物为主的急性、热性、高度接触传染性和快速远距离传播的动物疫病，以传染性强、传播速度快、危害严重而著称。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的多种动物共患传染病之一，我国将其列为一类动物传染病。根据OIE公布数据，2009年内地全年通报了16起口蹄疫疫情，感染动物主要为牛，其中的7起为我国过去未见的A型口蹄疫感染，其余均为Asial型感染。2010年又报道多起牛、羊A型FMDV猪O型FMDV。因此，口蹄疫的防控任务依然艰巨。; 张润祥高明春刘慧环曹永生王晓东王君伟; 关键词：规模化奶牛场免疫程序灭活苗世界动物卫生组织接触传染性动物传染病

规模化奶牛场口蹄疫灭活疫苗不同免疫程序免疫抗体水平分析: 我国家畜口蹄疫的防控,以预防免疫为核心,因此合理的免疫程序对于规模化牛场防控口蹄疫至关重要,我们对3个规模化牛场以每年抽检1-2次血清样本,每次40-80份检测血清免疫抗体,比较不同免疫程序下的免疫效果。经过系列研究,结...; 张润祥高明春曹永生王君伟; 关键词：口蹄疫规模化奶牛场免疫程序免疫抗体; 文献传递

应用口蹄疫病毒非结构蛋白鉴别自然感染和疫苗免疫动物被引量：2: 2011年; 口蹄疫（Foot and Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒引起的以感染牛、猪、羊等偶蹄动物为主的急性、热性、高度传染性疫病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的多种动物共患传染病之一。; 张润祥高明春王君伟; 关键词：口蹄疫病毒免疫动物自然感染非结构蛋白世界动物卫生组织疫苗

口蹄疫病毒非结构蛋白3AB单克隆抗体的制备及其对应表位区分析被引量：1: 2011年; 为鉴定口蹄疫病毒(FMDV)的非结构蛋白3AB的抗原表位,本研究以原核表达并纯化的FMDV 3AB重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,获得6株能够稳定分泌抗3AB蛋白特异性单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞。这6株MAbs亚类鉴定均为IgG1型,轻链均为κ链。间接免疫荧光试验结果表明,这6株MAbs均能够识别FMDV 3AB蛋白。采用制备的MAb对分段表达的3AB蛋白进行western blot分析,结合位点分别位于3AB的第aa 55～aa 70、aa 64～aa 79、aa 130～aa 145区段。该结果为进一步探索3AB蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。; 刘丹丹高明春宋军宋鸽曹永生张润祥李爽于力王君伟; 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体

IFN-γ真核质粒对口蹄疫病毒生长激素环多肽免疫小鼠的佐剂效应: 2010年; 葛兰云刘思莹李勐高明春刘湘涛王君伟; 关键词：IFN-Γ 佐剂效应口蹄疫病毒免疫小鼠素环

牛口蹄疫病毒VP2结构蛋白抗体间接ELISA方法的建立被引量：5: 2010年; 为建立牛口蹄疫(FMD)抗体的检测方法,本研究将口蹄疫病毒(FMDV)的VP2基因,通过pPROEXTM HTb表达载体在大肠杆菌DH5α中表达,获得大小为35ku的重组VP2蛋白(rVP2),western blot证实rVP2可与FMDV5种血清型的牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的rVP2为抗原建立了FMDVrVP2间接ELISA方法。重复性试验证实批内、批间变异系数均小于10%。特异性交叉试验表明,该抗原不与常见的其他7种牛病阳性血清发生交叉反应。检测非免疫无口蹄疫国家牛阴性血清的特异性为100%;检测感染血清敏感性为97.3%;检测O-AsiaⅠ的二价苗免疫牛血清,与4种商品化试剂盒比较,其符合率分别为69.0%、95.0%、90.4%和86.8%。实验结果表明建立的ELISA方法可以用于口蹄疫感染和免疫抗体检测。; 张润祥高明春曲哲会李爽曹永生宋军宋鸽刘丹丹王君伟; 关键词：口蹄疫病毒 VP2蛋白间接ELISA

牛IFN-γ基因的原核表达及其产物卵黄抗体的制备: 2010年; 刘思莹葛兰云徐宗香王兆鹏李勐高明春马波王君伟; 关键词：IFN-Γ 卵黄抗体原核表达基因 Γ-干扰素

Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白B细胞线性表位的鉴定被引量：4: 2009年; 为了对Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白进行抗原表位作图,设计了7个相互重叠15个氨基酸、覆盖整个VP2蛋白的重叠短肽,经克隆并在大肠杆菌中实现了融合表达。用Asia1型口蹄疫感染血清对7个融合蛋白进行免疫印迹分析,结果初步鉴定出VP2蛋白B细胞线性抗原表位位于氨基末端的第1-44氨基酸区域,并且证实O型、A型、C型口蹄疫标准血清和感染SAT2型口蹄疫康复期的牛血清也能识别融合蛋白F1(1-44 aa)。在此基础上,针对F1(1-44 aa)短肽,设计了6个相互重叠5个氨基酸的短肽片段,进一步鉴定出了VP2蛋白B细胞线性表位位于氨基末端的第6-15氨基酸区域。; 徐宗香高明春李勐李爽刘思莹葛兰云张润祥马波王君伟; 关键词：口蹄疫病毒 VP2蛋白

抗牛IFN-γ单克隆抗体的制备与鉴定: 2009年; 试验以纯化的rHis-BoIFN-γ蛋白为免疫原免疫4～6周龄BALB/c鼠,3次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用纯化的rGST-BoIFN-γ作为检测抗原,以间接ELISA和有限稀释法进行筛选,并初步鉴定其生物学特性。结果表明,试验共获得4株能稳定分泌抗rBoIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗体亚类均为IgM,轻链为κ链;其中腹水效价2株均达到5×104以上;通过Western blot结果表明,4株单抗均可特异性的结合rGST-BoIFN-γ蛋白,而不与GST标签蛋白反应。间接ELISA试验证明,4株单抗只与rBoIFN-γ反应,而不与GST蛋白和rGoIFN-α、rGoIFN-γ、rBoIFN-α等细胞因子发生交叉反应。通过间接免疫荧光显示,4株单抗均与真核细胞BHK21表达的rBoIFN-γ反应产生强荧光反应,证明了单抗能够与接近天然的BoIFN-γ反应,证实了单抗的特异性。阻断ELISA检测结果表明,3D10株单抗能够与牛外周血诱导产生的天然干扰素发生反应,证实了该单抗具有实际的应用价值。; 刘思莹葛兰云徐宗香李勐高明春王君伟; 关键词：单克隆抗体

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