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国家自然科学基金(30572224)
作品数:
2
被引量:9
H指数:1
相关作者:
李鹏
尚明美
宋海峰
王强
汤仲明
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相关机构:
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
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2008
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HER-2反义寡核苷酸对靶基因抑制作用的时相变化与微观分布研究
2008年
目的:研究靶向HER-2基因、具有不同活性的反义硫代寡核苷酸(S-ODNs)在SK—BR-3细胞内的微观分布差异,以及与靶基因转录和翻译抑制作用的关系。方法:运用实时定量PCR和Western印迹方法检测反义寡核苷酸对细胞靶基因转录和翻译抑制的时相性变化,用激光扫描共聚焦显微镜(LsM)观察6-羧基荧光素标记S-ODNs在靶细胞内的分布。结果:反义S—ODNs能够在mRNA与蛋白水平抑制HER-2的表达。不同序列的抑制活性各不相同,但最大抑制强度均出现于转染后48~72h之间,此后靶基因表达逐渐恢复。高活性序列主要均匀分布于细胞核,且持续时间长,低活性序列呈点状分布于胞质,少量分布于细胞核且持续时间短。结论:活性不同的S-ODNs亚细胞分布有显著区别,且分布变化与对靶基因的抑制效应具有对应关系。
李鹏
尚明美
王强
付洁
宋海峰
刘秀文
汤仲明
关键词:
HER-2
硫代反义寡核苷酸
实时定量PCR
亚细胞分布
非病毒基因递送技术研究进展
被引量:9
2008年
基因递送是生物学和医学研究中一项重要且常用的技术,分为病毒感染法和非病毒转染法两大类。病毒载体具有较高转染效率,但产生不良反应等缺陷限制了其应用。非病毒载体具有低细胞毒性、低免疫原性、生物相容性好、可以生物降解等优点,而且不受基因大小的限制,具有很好的应用前景,但转染效率不高是其主要的瓶颈,目前研究人员正致力于寻找和开发高效率的非病毒转染方法。文中阐述了几种主要的生化转染法(阳离子多聚物、阳离子脂质体、磷酸钙)及物理转染法(电穿孔、超声/微气泡、显微注射和基因枪)的原理、优缺点以及研究进展。
李鹏
尚明美
宋海峰
关键词:
非病毒载体
阳离子脂质体
磷酸钙
电穿孔
显微注射
基因枪
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