黑龙江省青年科学基金(QC05C47)
- 作品数：4 被引量：37H指数：3
- 相关作者：关键李德超王健平程宗生邓慧鑫更多>>
- 相关机构：佳木斯大学附属口腔医院佳木斯市妇幼保健院佳木斯大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省青年科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 成骨细胞中Runx2对机械离心力刺激的响应被引量：16
- 2010年
- 目的研究机械离心力刺激对MC3T3-E1细胞中Runx2表达的影响,探讨成骨细胞将力学刺激转化为生化响应过程中骨形态发生蛋白(BMP)信号转导通路的作用。方法将MC3T3-E1细胞分成A、B、C、D组,分别使用含10%胎牛血清、10%胎牛血清、100ng·mL-1 Noggin和100ng·mL-1 Noggin的DEME培养基预处理24h,对B、D组加载271×g离心力5min,A、C组不进行离心加力,其余条件相同。30min后4组分别同时收获细胞,提取总RNA,并逆转录为cDNA,通过实时荧光定量PCR检测Runx2基因表达情况。结果B组Runx2 mRNA表达较A组明显增高(P<0.05),D组Runx2 mRNA表达比B组表达明显降低(P<0.05),A、C、D组间表达水平比较差异无统计学意义(P=0.692)。结论BMP信号转导通路参与成骨细胞对机械离心力刺激的响应过程,并可能在成骨细胞对力学信号引起的信息传递级联反应中扮演重要角色。
- 关键程宗生王健平李德超邓慧鑫
- 关键词：基因表达信号转导离心力成骨细胞骨形态发生蛋白
- 大鼠成骨细胞体外培养、特性鉴定及低氧时VEGF表达的变化被引量：6
- 2007年
- 目的:用酶消化法从Wistar大鼠下颌骨分离和体外培养成骨细胞,观察应用CoCl2处理后,成骨细胞中VEGF的表达变化。方法:取新生24h内Wistar大鼠下颌骨,采用多次酶消化法进行成骨细胞原代培养,经细胞形态学及组织学鉴定,取最佳生长状态的鼠下颌骨成骨细胞,采用CoCl2处理后建立体外成骨细胞低氧模型,以激光共聚焦显微镜观察不同低氧时间的VEGF的表达情况。结果:经大鼠下颌骨培养出的成骨细胞具有成骨细胞的典型生物学行为,富含碱性磷酸酶(ALP)活性,可合成Ⅰ型胶原等;应用CoCl2处理后,对照组细胞可观察到较弱的荧光,随低氧时间的延长,VEGF表达的荧光比值增加,低氧组低氧6h光密度值明显增加;在低氧9h时,VEGF的表达强度最高,达到峰值,随后降至正常水平。结论:采用新生大鼠下颌骨培养成骨细胞的方法切实可行,可用于口腔医学相关研究;低氧可调节成骨细胞VEGF的表达。
- 关键阚娜刘凤玲
- 关键词：成骨细胞体外培养VEGF低氧
- 骨形态发生蛋白/Smad信号转导机制及其对离心力刺激的响应被引量：3
- 2009年
- 骨形态发生蛋白(BMP)是一类转化生长因子-β超家族成员的多功能分泌型信号分子,参与调节多种细胞的增殖、分化和程序性死亡,在组织器官的形成、胚胎的发育和损伤组织的修复中起关键作用。Smad蛋白是BMP细胞内信号转导和调节分子,可以直接将BMP细胞外信号从细胞膜转导入细胞核,构成BMP/Smad信号转导通路,而BMP/Smad信号转导通路在调节牵张成骨新骨形成中发挥着重要作用。笔者下面就体外培养细胞离心力加载装置和BMP/Smad信号转导机制及其对离心力刺激的响应作一综述。
- 程宗生关键
- 关键词：骨形态发生蛋白SMAD信号转导通路
- 缺氧条件对成骨细胞VEGF和TGF-β1表达影响的实验研究被引量：14
- 2008年
- 目的研究CoCl2对体外培养的鼠下颌骨成骨细胞的作用,观察缺氧条件对成骨细胞VEGF及TGF-β1表达的影响,为临床牵张成骨技术的分子生物学机制研究提供理论依据。方法取新生24h内Wistar大鼠下颌骨,改良酶消化法培养和纯化成骨细胞,采用HE染色、ALP组织化学染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学、钙结节染色行细胞形态学及组织学鉴定,并绘制生长曲线。取第3代最佳生长状态的鼠下颌骨成骨细胞,用150μmol/LCoCl2处理(实验组),设正常状态下培养为对照组,分别于培养后0、3、6、9、12、24h,采用免疫荧光技术检测VEGF及TGF-β1表达。结果HE染色示成骨细胞形态多样,呈三角形、多角形、圆形及鳞片形等不规则形态,突起长短不一向外伸展,胞核清晰可见;胞浆丰富,呈粉红色,胞核蓝紫色,有时可见2个细胞核,密集处细胞形态不明显,分界模糊,仅见大圆核细胞。ALP组织化学染色示细胞胞质呈黑色颗粒,细胞核轮廓不清,细胞密集区可见大量阳性细胞。Ⅰ型胶原免疫组织化学染色示实验组阳性细胞均匀可见,胞浆呈棕黄色,胞核周围尤为明显,空白对照组细胞未见棕黄色颗粒。钙结节染色示成骨细胞于盖玻片上培养15d后,细胞聚集成不透明区域,呈结节样;茜素红染色后,有橙红色着色。培养各时间点对照组细胞激光共聚焦显微镜下可见较弱的VEGF表达荧光;实验组细胞随缺氧时间延长,VEGF表达荧光强度值增加,于术后9h达高峰,随后降至正常水平。培养各时间点激光共聚焦显微镜下可见两组细胞均有TGF-β1表达荧光,对照组各时间点荧光强度值均略高于VEGF对照组;实验组TGF-β1表达在缺氧3h短期成倍增加,随缺氧时间延长表达逐渐降低。结论经新生大鼠下颌骨培养的成骨细胞性状稳定;适当缺氧可诱导成骨细胞VEGF和TGF-β1表达增强。
- 关键王健平车笑非李德超
- 关键词：VEGF缺氧
