教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-05-0513)
- 作品数：7 被引量：44H指数：5
- 相关作者：叶恭银胡萃朱家颖董胜张方琦更多>>
- 相关机构：浙江大学西南林业大学东华大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 成虫营养和交配对蝶蛹金小蜂卵巢发育与卵黄发生的影响被引量：8
- 2008年
- 为明确不同因子对蝶蛹金小蜂雌蜂生殖生理的影响,采用ELISA法测定血淋巴中卵黄原蛋白(Vg)和卵巢内卵黄磷蛋白(Vt)的含量,研究成虫取食蔗糖和蜂蜜水及提供雄蜂交配对该蜂卵巢发育和卵黄发生的影响。结果表明,该蜂卵巢在羽化后24h内发育较慢,卵巢管内无成熟卵,而在羽化24h后卵巢快速发育,卵巢管内出现成熟卵。雌蜂取食蜂蜜水,血淋巴中Vg含量在羽化后72h达到最高,约为0.78μg,同时卵巢内Vt含量也达到最高,约为5.8μg。雌蜂取食蔗糖水,血淋巴中Vg含量在羽化后30h达到最高,约为0.62μg,卵巢内Vt的含量在羽化后96h达到最高,约为5.6μg。而对照雌蜂(取食蒸馏水)血淋巴中Vg含量在羽化后24h达到最高,约为0.58μg,卵巢内Vt含量在羽化后48h达到最高,约为4.5μg。此外,取食蔗糖水可以延长雌蜂寿命并促进卵巢发育,但对Vg的合成与摄取均无显著影响;取食蜂蜜水,不仅能延长雌蜂寿命,还对卵黄发生和卵巢发育起显著促进作用,尤其在卵黄发生的后期,达极显著水平。交配未能显著促进该蜂的卵黄发生。
- 董胜张郭建洋叶恭银胡萃
- 关键词：蝶蛹金小蜂交配卵巢发育卵黄发生
- 蝶蛹金小蜂毒液蛋白不同提取分离方法的比较被引量：3
- 2008年
- 为了建立蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum毒液抑制寄主血细胞免疫活性组分合适的分离纯化方法,就等电点沉淀法、乙醇沉淀法、75%硫酸铵沉淀法、75%硫酸铵沉淀法+40℃加热处理法,以及75%硫酸铵沉淀法分别与3种不同滤膜的分子大小截留法的组合等7种方法对毒液蛋白分离效果及活性的影响进行了比较。结果表明:等电点沉淀法获得的组分抑制寄主菜粉蝶Pieris rapae离体血细胞延展和包囊的活性最强,乙醇沉淀法次之,75%硫酸铵沉淀法最弱。从蛋白组分的SDS-PAGE图谱来看,等电点沉淀法获得毒液组分相对最纯,仅有3条主要谱带,分子量大小在45～116.2kDa范围内;乙醇沉淀法次之,有5条主要谱带,分子量大小在24～116.2kDa范围内;硫酸铵沉淀法的谱带组成与毒液蛋白粗提液相似。3种分子大小截留法获得的毒液组分的活性分析表明,强活性组分分子量大小可能都大于100kDa。综合认为,7种方法中以等电点沉淀法提取分离蝶蛹金小蜂毒液蛋白相对为最适。
- 吴玛莉朱家颖胡萃叶恭银
- 关键词：蝶蛹金小蜂毒液
- 寄生蜂毒液蛋白的研究进展被引量：15
- 2008年
- 寄生蜂毒液蛋白具有抑制寄主血细胞免疫、调控寄主生长发育、抑制寄主生殖系统发育、调节寄主内分泌等功能,但一直以来对其组成成分知之甚少。近年来,不仅研究了寄生蜂毒液蛋白的生化特性,而且通过分离纯化、酶活测定、基因克隆等方法明确了寄生蜂毒液的部分蛋白组分。根据这些毒液蛋白性质和功能,可将其分为麻痹毒素、抗菌活性物质、酶类、酶的抑制剂等,它们在害虫生防、药理学和生理学研究中有着广阔的应用前景。该文作者就国内外对寄生蜂毒液蛋白组成成分的研究进展进行了综述,并对其应用前景进行了简要探讨。
- 朱家颖叶恭银胡萃
- 关键词：寄生蜂毒液蛋白质生化特性基因
- 蝶蛹金小蜂寄生对菜粉蝶血细胞骨架相关蛋白基因的转录调控被引量：5
- 2010年
- 为揭示蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum抑制寄主菜粉蝶Pieris rapae血细胞免疫反应的分子机制,克隆了菜粉蝶肌动蛋白、肌动蛋白解聚因子及微管蛋白cDNA,并研究了蝶蛹金小蜂寄生对其转录水平的影响。结果显示:菜粉蝶肌动蛋白cDNA ORF为1131bp,编码377aa,预测分子量为41.78kDa,pI为5.29,与其他昆虫肌动蛋白的相似性非常高,在90%以上。氨基酸组成特点和系统进化分析表明,克隆到的菜粉蝶肌动蛋白基因属细胞质型肌动蛋白。菜粉蝶肌动蛋白解聚因子cDNA全长为1243bp,ORF为447bp,编码149aa,预测分子量为16.97kDa,pI为7.11,与家蚕Bombyx mori、赤拟谷盗Tribolium castaneum、意大利蜜蜂Apis mellifera和桑粉介壳虫Maconellicoccus hirsutus肌动蛋白解聚因子的相似性分别为97%,87%,89%和72%。菜粉蝶微管蛋白cDNA全长为1757bp,ORF为1344bp,编码448aa,预测分子量为50.38kDa,pI为4.86,与家蚕β型微管蛋白1,2,3和4的相似性分别为97%,97%,87%和93%。系统进化分析表明,克隆到的菜粉蝶微管蛋白基因属β型微管蛋白。RT-PCR分析表明,蝶蛹金小蜂寄生能抑制肌动蛋白、肌动蛋白解聚因子及微管蛋白基因在菜粉蝶蛹血细胞中的转录水平。由此推断蝶蛹金小蜂调控寄主血细胞骨架相关蛋白基因的转录是该蜂抑制寄主血细胞免疫反应的分子机制之一。
- 朱家颖叶恭银方琦李艳敏胡萃
- 关键词：蝶蛹金小蜂菜粉蝶肌动蛋白肌动蛋白解聚因子微管蛋白转录调控
- 蝶蛹金小蜂卵黄蛋白单克隆抗体的制备及其应用方法的建立被引量：9
- 2007年
- 为深入研究寄生蜂卵黄发生及其内分泌调控，特采用杂交瘤细胞技术，制备4株能稳定分泌抗蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum卵黄蛋白（vitellin，Vt）的单克隆抗体（mAb），即PpVtmAb1，PpVtmAb2，PpVtmAb3和PpVtmAb4。这4株单克隆抗体的重链和轻链的亚类均分别为IgG1和κ类型，不仅特异性识别Vt，而且识别雌蜂血淋巴中卵黄原蛋白（viteUogenin，Vg），但与雄蜂体液无反应。通过比较4种不同的ELISA方法，确定了微量检测蝶蛹金小蜂体内Vg／Vt的最适ELISA法，即双夹心ELISA法。该方法可用于单头雌蜂体内Vg／Vt的检测，其检测灵敏度为20ng／mL。用Western免疫印迹的方法证实了该蜂Vg的合成始于刚羽化的成虫，并在羽化后12～36h内含量达到高峰。
- 董胜张高秀云程正贤胡萃叶恭银
- 关键词：蝶蛹金小蜂卵黄蛋白单克隆抗体双夹心ELISA
- 寄生蜂调控寄主分子机制的研究进展被引量：6
- 2008年
- 在寄生蜂与寄主相互作用的研究中,揭示寄生蜂攻克寄主防御系统和调控寄主生长发育的分子机制,已成为生物防治领域的研究热点。有关研究表明:寄生蜂通过控制血细胞增殖与分化的转录/信号传导因子、调节血细胞延展/包囊的因子及诱导血细胞凋亡,以破坏寄主细胞免疫系统;干扰与血淋巴黑化相关基因及抗菌肽基因的表达以抑制寄主的体液免疫反应;调节与生长发育相关蛋白和酶类以扰乱寄主生长发育。作者从细胞免疫、体液免疫和对寄主生长发育三个方面综述了寄生蜂调控寄主分子机制的研究进展。
- 朱家颖叶恭银胡萃
- 关键词：寄生蜂寄主分子机制
- 丽蝇蛹集金小蜂寄生对寄主蛹可溶性蛋白与芳基蛋白组成与含量的影响被引量：4
- 2008年
- 为了探讨蛹期寄生蜂对寄主蛋白代谢的寄生生理效应,利用Bradford蛋白含量测定法、Western免疫印迹法及酶联免疫吸附检测法研究了棕尾别麻蝇Boettcherisca peregrina蛹被丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis寄生后其脂肪体和血淋巴中可溶性蛋白及芳基蛋白组成与含量的变化。结果表明:寄生蛹脂肪体和血淋巴中可溶性蛋白的组成与未寄生相比基本无明显差异;不论寄生与否寄主蛹脂肪体和血淋巴中芳基蛋白亚基分子量均为80kDa,该亚基在脂肪体中未出现降解现象,而在血淋巴中仅于寄生后12h的寄主蛹中呈现2条分子量相近的Western免疫印迹带,说明其降解可能先于未寄生对照。就含量而言,寄生蛹脂肪体中可溶性蛋白含量除寄生后24h外均显著低于未寄生对照,芳基蛋白含量除寄生后48h外也均显著低于未寄生对照,其中寄生后12h的含量仅为未寄生的32.0%。寄生蛹血淋巴中可溶性蛋白含量多低于未寄生蛹,且寄生后2,12,24h的差异达显著水平;芳基蛋白的含量均有低于未寄生的趋势,其中寄生后12h的含量为未寄生的17.0%。综合认为,丽蝇蛹集金小蜂的寄生可导致寄主脂肪体和血淋巴中可溶性蛋白及芳基蛋白含量下降。
- 韩成香方琦李凯胡萃叶恭银
- 关键词：棕尾别麻蝇可溶性蛋白寄生
