您的位置： 专家智库 > >

转基因生物新品种培育专项(2008ZX08007-004)

作品数：11 被引量：25H指数：3
相关作者：张涌华松曹贵方温世勇赵鹏伟更多>>
相关机构：西北农林科技大学内蒙古农业大学山东省农业科学院更多>>
发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 11篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 9篇农业科学
  • 3篇生物学

主题

  • 4篇乳腺
  • 4篇奶牛
  • 4篇防御素
  • 3篇体细胞
  • 3篇牛乳
  • 3篇奶牛乳腺
  • 3篇基因
  • 3篇荷斯坦奶牛
  • 3篇Β-防御素
  • 2篇乳腺上皮
  • 2篇乳腺上皮细胞
  • 2篇乳腺炎
  • 2篇山羊
  • 2篇上皮
  • 2篇上皮细胞
  • 2篇细胞
  • 2篇腺上皮
  • 2篇腺上皮细胞
  • 2篇腺炎
  • 2篇LAP

机构

  • 6篇西北农林科技...
  • 4篇内蒙古农业大...
  • 2篇宁夏大学
  • 2篇山东省农业科...
  • 2篇内蒙古医学院
  • 1篇西南民族大学

作者

  • 5篇张涌
  • 4篇曹贵方
  • 4篇华松
  • 3篇凃勇
  • 3篇程兰玲
  • 3篇赵鹏伟
  • 3篇温世勇
  • 2篇王长法
  • 2篇刘顺德
  • 2篇何洪彬
  • 2篇包图雅
  • 2篇菅瑞珍
  • 2篇高小艳
  • 1篇仲跻峰
  • 1篇张辉
  • 1篇李琦
  • 1篇熊显荣
  • 1篇杨少华
  • 1篇张拓
  • 1篇鲁成龙

传媒

  • 2篇中国兽医学报
  • 2篇畜牧兽医学报
  • 2篇中国畜牧兽医
  • 1篇湖南农业科学
  • 1篇西北农业学报
  • 1篇自然科学进展
  • 1篇家畜生态学报
  • 1篇中国兽医科学

年份

  • 1篇2020
  • 6篇2012
  • 3篇2010
  • 2篇2009
共 11 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
哺乳动物X染色体失活机制及其应用被引量：2
2012年
1X染色体失活的起源及发展 哺乳动物X染色体失活是指雌性动物为了平衡与雄性动物X染色体基因表达量的差异，而失活其中1条X染色体的现象。X和Y染色体起源于1对同源的常染色体，自然选择的压力导致了1条染色体的某个基因突变，从而产生了决定性别的基因，进而产生了性别分化。
鲁成龙华松彭辉吕品刘旭张涌
关键词：X染色体失活体细胞克隆IPS哺乳动物
牛气管抗菌肽的原核表达、体外抗菌活性及其组织分布分析被引量：4
2010年
本文旨在对牛气管抗菌肽(tracheal antimicrobial peptide,TAP)基因进行原核表达,以及研究重组蛋白的抗菌活性,并分析TAP在各组织的表达分布情况,为开展转TAP基因抗乳腺炎奶牛研究提供技术资料。作者采用RT-PCR从荷斯坦奶牛气管扩增TAP基因,分析其序列后根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏好性,人工合成牛TAP基因,构建pET32a(+)-TAP重组质粒;然后转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并纯化。对表达蛋白进行SDS-PAGE、Western Blot鉴定;在线软件分析目的蛋白表达量。采用滤纸片法测定重组牛TAP的体外抗菌活性,并用RT-PCR法分析牛各组织中TAP表达情况。测序结果表明,扩增到114bp目的基因片段,可编码含38个氨基酸残基的成熟蛋白。SDS-PAGE分析表达的融合蛋白相对分子质量为24ku,重组蛋白以可溶性方式存在,表达量占菌体总蛋白的52.1%。Western Blot检测只出现单一条带。抗菌效价分析表明0.115μg·μL-1重组蛋白对牛源金黄色葡萄球菌有一定的抗菌活性。TAP基因在奶牛咽喉、肺、气管、小肠、肝、心脏及口腔黏膜中均有表达,在鼻黏膜和舌黏膜中微量表达,在皮肤中几乎不表达。作者成功表达了牛TAP基因,重组牛TAP蛋白在大肠杆菌中实现高效表达,并具有一定的抗奶牛乳腺炎致病菌的活性,为未来培育抗乳腺炎转基因奶牛及相关基因工程产品的开发奠定了基础。
高小艳王长法刘顺德李秋玲杨宏军杨少华仲跻峰何洪彬
关键词：抗菌活性乳腺炎
热激损伤对牛孤雌激活胚胎后续发育的影响
2010年
为了研究早期胚胎核与胞质对热激的应激反应,以及产生应激后二者之间的相互作用对胚胎体外发育、合子期激活基因的表达及胚胎细胞凋亡的影响。本研究将孤雌激活胚随机分为2组分别于38.5或41℃培养7h;随后将二者核进行置换,使用正常培养的胚胎与热激胚胎进行核置换,分别构建热激核-正常胞质重构胚以及热激胞质-正常核重构胚,检测了核质置换胚胎的体外发育率、合子激活基因的表达和胚胎凋亡情况。结果,当正常核移入41℃热激的卵胞质,重构胚的发育率显著下降;热激后的核质置换胚胎中存在合子基因激活不完全的现象,这种情况主要存在于热激胞质-正常核重构胚中;热激能诱导胚胎发生细胞凋亡,早期胚胎的胞质对热激更敏感,并在后期的诱导凋亡中起到主导作用。这些结果表明,虽然热激对核和胞质都有损伤,但胞质对热激损伤更为敏感。早期胚胎受到热激后导致发育能力降低的易感性主要是由胞质所引起的;早期胚胎受到热激可能会损伤到卵胞质中的母源因子,即使与正常核构成重构胚也依然会导致合子基因表达异常;并且胞质受到热激损伤会在热激诱导的凋亡机制中起到比核更大的作用。
徐薇唐爽吕志一苏锋华松张涌
关键词：热激核质相互作用凋亡
荷斯坦奶牛乳腺β-防御素的差异表达被引量：1
2012年
本研究为证明荷斯坦奶牛乳腺β-防御素的表达,扩增出6种β-防御素序列进行氨基酸分析,结果发现,扩增的6个保守的半胱氨酸,其核酸序列与NCBI数据库序列进行BLAST比对,结果LAP、BNBD4同源性100%,BNBD5为99.6%,EBD为99.5%,BNBD7、TAP为98.5%;实时荧光定量PCR检测6种防御素的mRNA水平的表达,它们之间的表达量都有显著性差异(BNBD4与BNBD5除外),其中LAP表达量最多,BNBD7,EBD,BNBD5,BNBD4次之,TAP的表达量最低。
程兰玲曹贵方温世勇赵鹏伟关洪敏菅瑞珍
关键词：Β-防御素荷斯坦奶牛乳腺炎
荷斯坦奶牛乳腺LAP基因的克隆与序列分析
2012年
为了研究奶牛乳腺防御素基因的表达调控机制,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出LAP基因的核心片段序列,并与NCBI数据库序列比对同源性;进一步扩增其DNA序列中间片段;其后运用反向PCR技术并结合半巢式PCR技术扩增其侧翼的序列。结果表明:序列与NCBI数据库中序列同源性为100%,确认为LAP基因;DNA序列扩增得到1 760 bp的中间序列,并预测了其酶切位点;得到5'侧翼序列107 bp,3'侧翼序列87 bp,经预测发现有转录因子GATA。为进一步研究防御素的防御功能、寻找防御素基因体外表达调控机制以及利用基因工程防治奶牛乳腺炎积累了基本资料。
程兰玲曹贵方赵鹏伟凃勇包图雅
关键词：荷斯坦奶牛反向PCR防御素
不同浓度脂多糖刺激奶牛乳腺上皮细胞对NF-κB及LAP表达的影响被引量：4
2012年
为了观察不同浓度脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞NF-κB及LAP基因表达的影响,设置不同浓度(0、50、100、200、400和800ng/mL)的脂多糖(LPS)刺激奶牛乳腺上皮细胞,分别于刺激2、4、8、16、24、48和72h后提取细胞总RNA,经反转录反应后,运用荧光定量PCR方法检测NF-κB P65亚单位和LAP的表达水平。结果,与空白对照组相比,脂多糖浓度达到400ng/mL并培养72h后,奶牛乳腺上皮细胞NF-κB P65亚单位和LAP的表达量最高,且与对照组有极显著差异(P<0.01)。结果表明,在脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性效应中,NF-κB的表达活性增强,调控着防御基因LAP表达,呈现一定的剂量和时间效应关系。
程兰玲曹贵方温世勇赵鹏伟凃勇菅瑞珍李琦
关键词：Β-防御素NF-ΚB乳腺上皮细胞脂多糖
优化CRISPR/Cas9系统提高奶山羊ROSA26位点基因打靶效率
动物乳腺生物反应器是利用转基因技术将外源基因导入动物基因组中并获得乳腺特异性表达目的蛋白转基因动物的一项技术,目前已有多种相关的医药蛋白产品获批上市,创造了巨大的经济价值,其中奶山羊由于大小合适、妊娠期短和乳汁分泌丰富的...
韩静
关键词：基因打靶
基因组印迹的调控机制及其对动物克隆的影响被引量：3
2009年
基因组印迹是一种表观遗传学调控方式.依据亲源性的不同机体仅表达来自亲本一方的等位基因,而来自另一方的等位基因不表达,这类基因称为印迹基因.印迹基因成簇存在,受该簇内的印迹控制区(imprinting control region,ICR)调控.基于ICRs的功能,研究者提出两种模式解释基因组印迹的机制:绝缘体印迹模式和非编码RNA印迹模式.印迹基因的正确表达对哺乳动物的正常发育极为重要,错误的印迹会引起严重的遗传性疾病和癌症.克隆动物发育异常也可能与之相关.结合本研究组最近的研究,文中综述了基因组印迹的调控机制及其对动物克隆的影响.
苏建民华松张涌
关键词：基因组印迹印迹基因非编码RNADNA甲基化体细胞核移植
不同培养液对牛体细胞核移植胚胎发育的影响被引量：5
2012年
旨在为牛体细胞克隆胚胎体外培养体系的建立奠定基础。利用体细胞核移植技术生产牛重构胚,将重构胚随机分成2组,分别用mSOF和G1.5/G2.5培养,统计2种培养液对牛核移植克隆胚胎发育的影响,用TUNEL荧光检测系统检测2个培养组胚胎细胞凋亡情况,同时用Real time RT-PCR检测热应激蛋白基因Hsp70和凋亡相关基因Bax在2个培养组的相对表达水平。两组的卵裂率分别为85.6%和87.0%、囊胚率分别为22.9%和27.1%,差异都不显著(P>0.05),但G1.5/G2.5组的8-细胞形成率显著高于mSOF组(P<0.05);mSOF组凋亡率为12.1%±1.9%,显著高于G1.5/G2.5组(P<0.05),G1.5/G2.5组的Hsp70和Bax相对表达量显著低于mSOF组(P<0.05)。结果表明,G1.5/G2.5培养液更有利于牛体细胞核移植胚胎的体外发育。
熊显荣王丽君王勇胜许文兵张辉华松张涌
关键词：体外发育MSOF培养液
β-防御素在荷斯坦奶牛正常和炎性乳腺上皮细胞中的差异表达被引量：1
2012年
为探讨荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞在正常和炎性2种情况下β-防御素(BNBD5)的表达量是否存在差异,本研究通过添加内毒素(LPS)建立了实验性乳房炎的乳腺上皮细胞模型,并采用实时荧光定量RT-PCR方法检测了乳腺上皮细胞中BNBD5mRNA表达水平的变化。结果显示,添加LPS后乳腺上皮细胞中炎性因子IL-6、IL-12和TNF-α的mRNA表达量与空白对照组相比显著增加(P<0.01),并且α-酪蛋白mRNA表达量显著降低(P<0.01),说明添加LPS诱发上皮细胞产生了一定的炎性反应;并且当添加LPS终质量浓度为300μg/L并培养48h之后BNBD5的表达量最高,与空白对照组存在极显著差异(P<0.01);推测BNBD5基因可能参与了由LPS诱发的奶牛乳房炎的防御机制。
凃勇曹贵方李海军包图雅米焱温世勇
关键词：荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞内毒素MRNA表达
全选 清除 导出
共2页<12>
聚类工具0