湖南省研究生创新基金(cx2009b163)
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
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- 马尾松捕光叶绿素a/b结合蛋白基因cab-Pm1的克隆与原核表达被引量:6
- 2010年
- 光合作用是光合生物将光能转化为化学能,并同时将无机物转化成有机物贮存在生物体的过程。现已证明光合生物对光能的吸收、传递和转化都是在光合膜上具有一定的分子排列和空间构象的色素蛋白复合体上进行的(郁飞等,2001)。
- 王猛曹福祥龙绛雪
- 关键词:马尾松原核表达
- 马尾松苯丙氨酸解氨酶基因cDNA全长克隆与序列分析被引量:3
- 2010年
- 苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)是连接植物初级代谢和次级代谢途径关键酶、限速酶,催化苯丙氨酸转化为肉桂酸,促进黄酮、木质素等次生代谢产物的合成,在植物抗病过程中有重要意义.采用RT-PCR和RACE技术,从马尾松中克隆到PAL基因的cDNA全长.此cDNA全长2 700 bp,包括2 154 bp的完整ORF,编码717个氨基酸的蛋白,相对分子质量与等电点分别为78 200和5.81.其推导的蛋白序列与火炬松(Pinustaeda)、欧洲赤松(Pinus sylvestris)和海岸松(Pinus pinaster)的苯丙氨酸解氨酶同源性分别为98.2%、99.4%和97.8%.
- 曹福祥王猛龙绛雪
- 关键词:马尾松苯丙氨酸解氨酶RACE
- 马尾松亲环素基因全长cDNA的克隆与原核表达
- 2010年
- 亲环素(Cyclophilins,CyPs)具有肽酰脯氨酸顺反异构酶活性,催化蛋白质折叠过程,并且起着分子伴侣的作用,同时参与mRNA加工和信号转导等生物学过程.本研究采用RT-PCR技术和RACE-PCR技术,从马尾松(Pinus massoniana)中分离了亲环素基因cDNA全长,命名为cyp-pm1(GenBank登录号:GQ497815).该基因全长1 002 bp,编码区全长为519 bp,编码172个氨基酸,在5′端有106 bp非编码区,在3′端含有377 bp(其中含有26 bp的polyA)非编码区.生物信息学分析表明该基因编码的蛋白质等电点和相对分子质量为8.82和18 212,含有典型的亲环素肽酰脯氨酸顺反异构酶蛋白功能域.序列分析表明该基因与植物亲环素家族基因有较高的同源性.通过亚克隆技术把cyp-pm1的开放读码框克隆到表达载体pET-24a(+)中,成功构建了pET-cyp-pm1重组表达载体,并在IPTG诱导下在大肠杆菌中成功表达了与推导相一致的蛋白,相对分子质量约1.8×104.
- 王猛曹福祥龙绛雪
- 关键词:马尾松亲环素原核表达