国家自然科学基金(30572438) 作品数:9 被引量:70 H指数:6 相关作者: 梁晓春 屈岭 孙连庆 吴群励 赵丽 更多>> 相关机构: 北京协和医院 中国医学科学院北京协和医学院 解放军第306医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
高糖对体外培养雪旺细胞影响的研究进展 被引量:4 2008年 雪旺细胞在糖尿病周围神经病变过程中起着重要的作用,近年来伴随组织细胞体外培养技术的日趋成熟,探讨体外高糖环境对雪旺细胞的影响逐渐成为研究新热点。本文就近年来高糖环境对体外培养雪旺细胞影响的相关研究作一综述。 屈岭 梁晓春 张宏关键词:雪旺细胞 体外培养 高糖 糖尿病 Jinmaitong(筋脉通)Alleviates the Diabetic Peripheral Neuropathy by Inducing Autophagy 被引量:7 2016年 Objective:To observe the deregulation of autophagy in diabetic peripheral neuropathy(DPN) and investigate whether Jinmaitong(筋脉通i,JMT) alleviates DPN by inducing autophagy.Methods:DPN models were established by streptozotocin-induced diabetic rats and Schwann cells(SCs) cultured in high glucose medium.The pathological morphology was observed by the improved Bielschowsky's nerve fiber axonal staining and the Luxol fast blue-neutral red myelin staining.The ultrastructure was observed by the transmission electron microscopy.Beclinl level was detected by immunohistochemistry and Western blot.The proliferation of cultured SCs was detected by methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide.Results:Diabetic peripheral nerve tissues demonstrated pathological morphology and reduced autophagic structure,accompanied with down-regulation of Beclinl.JMT apparently alleviated the pathological morphology change and increased the autophagy[in vivo,Beclinl integral optical density(IOD) value of the control group 86.6±17.7,DM 43.9±8.8,JMT 73.3 ±17.8,P<0.01 or P<0.05,in vitro Beclinl IOD value of the glucose group 0.4710.25 vs the control group 0.88 ±0.29,P<0.05].Consequently,inhibition of autophagy by 3-methyladenine resulted in a time- and concentrationdependent decrease of the proliferation of SCs(P<0.05,P<0.01).Conclusions:Down-regulation of autophagy in SCs might contribute to the pathogenesis of DPN.JMT alleviates diabetic peripheral nerve injury at least in part by inducing autophagy. 屈岭 张宏 顾蓓 戴威 吴群励 孙连庆 赵丽 石玥 梁晓春关键词:筋脉通 药效 药物 Effects of Jinmaitong Capsule(筋脉通胶囊) on Ciliary Neurotrophic Factor in Sciatic Nerves of Diabetes Mellitus Rats 被引量:2 2013年 学习中国药 Jinmaitong 囊的效果的目的(, JMT ) 在臀部的神经,睫的神经营养的因素(CNTF ) ,和在有导致 streptozotocin 的糖尿病 mellitus (STZ-DM ) 的老鼠的 CNTF 的 mRNA 表情的 pathomorphology 上。动物模型被 streptozotocin 的一次 intraperitoneal 注射建立的方法。老鼠被随机简单地包括模型组,低剂量的 JMT 组(JL ) ,中等剂量的 JMT 组(JM ) ,高剂量的 JMT 组(JH ) 和 neurotropin 组划分成 5 个组。为每上述 5 个组,一组 10 只正常 Wistar 老鼠在身体重量,年龄和性匹配被放作为正常组。Intragastric 政府在建立的动物模型后面被开始。JL 组与乘为一个人的成年人推荐的 JMT 剂量的五被管理;JM 组与乘为一个人的成年人推荐的 JMT 剂量的十被管理;JH 组与乘为一个人的成年人推荐的 JMT 剂量的二十被管理。neurotropin 组与乘为一个人的成年人推荐的 neurotropin 剂量的十被管理。所有老鼠被给 intragastric 管理 16 个星期然后否决。在里面第 4,第 8,第 12,第 16 星期,身体重量和血葡萄糖水平在干预前后被检测。臀部的神经的词法变化被光显微镜和传播电子显微镜观察。CNTFmRNA 表情被检测由即时荧光灯量的聚合酶链蛋白质,和 CNTF 蛋白质表情被 immunohistochemical 检测方法。血葡萄糖 STZ-DM 老鼠铺平的结果比正常的组高得多(P < 0.01 ) ,并且任何处理组和模型组之间没有明显的差别(P > 0.05 ) 。在干预在前后第 4,第 8,第 12,第 16 星期,在在所有这些组之中的身体重量没有重要差别(P > 0.05 ) 。STZ-DM 老鼠的臀部的神经可能在轴突,髓磷脂鞘,和 interstitium 有 pathomorphological 变化。在 STZ-DM 老鼠的 CNTF 和 CNTF-mRNA 表情的层次显著地两个都被减少(P < 0.01 ) 。STZ-DM 老鼠的臀部的神经可能在轴突,髓磷脂鞘,和 interstitium 有 pathomorphological 变化。结论 JMT 能由在臀部的神经纸巾增加 CNTF 和 CNTF-m 石玥 梁晓春 吴群励 孙连庆 屈岭 赵丽 王普艳关键词:睫状神经营养因子 病理形态学 WISTAR大鼠 免疫组织化学方法 电子显微镜观察 一氧化氮与糖尿病周围神经病变及中药干预的研究 被引量:3 2009年 孙连庆 梁晓春关键词:糖尿病周围神经病变 DPN 发病机制 中药干预 一氧化氮 筋脉通对糖尿病大鼠周围神经组织神经生长因子表达的影响 被引量:29 2008年 目的:观察中药复方筋脉通对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠坐骨神经神经生长因子(nerve growthfactor,NGF)mRNA和蛋白表达的影响。方法:采用链脲佐菌素一次性腹腔内注射大鼠的方法造模,简单随机分为模型对照组、筋脉通小剂量、中剂量和大剂量组、神经妥乐平组及正常对照组。成模后即开始灌胃给药,筋脉通低、中、高组分别按成人剂量的5,10,20倍给药;神经妥乐平组按成人剂量的10倍给药。模型组和正常组予灌服蒸馏水。所有实验大鼠于灌胃16周后处死。检测各组治疗前及治疗后4,8,12,16周的体重和血糖变化,并进行热水甩尾试验和机械痛阈检测,采用实时荧光定量PCR法检测坐骨神经NGF mRNA的表达,免疫组化染色法测定坐骨神经NGF蛋白的表达。结果:糖尿病大鼠血糖值均显著高于正常组(P<0.01);各治疗组血糖在各时间点与模型组相比无明显差异。造模及灌胃前后,各组大鼠之间的体重无明显差异。模型组和各治疗组较正常组甩尾潜伏期延长、机械痛阈下降,坐骨神经NGF mRNA和蛋白表达减少(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,筋脉通中剂量组与神经妥乐平组的甩尾潜伏期显著缩短、痛阈值显著升高,坐骨神经NGF mRNA和蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01)。筋脉通中剂量组与神经妥乐平组相比无显著差异。结论:筋脉通能够增加糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经NGF mRNA的转录和蛋白的表达。 屈岭 梁晓春 吴群励 孙连庆 赵丽 陈锡萍 钟定荣关键词:神经生长因子 机械痛阈 实时荧光定量PCR 筋脉通 筋脉通胶囊对高糖培养雪旺细胞睫状体神经营养因子表达的影响 被引量:15 2010年 目的探讨筋脉通胶囊对糖尿病周围神经病变的作用及其机制。方法以Wistar大鼠按成人剂量15倍给药分别制成筋脉通和神经妥乐平含药血清。实验分为空白对照组(不加细胞)、正常对照组(加入正常大鼠血清)、高糖组(加入葡萄糖)、筋脉通组(加入筋脉通含药血清和正常大鼠血清)、神经妥乐平组(加入神经妥乐平含药血清),除空白对照组和正常对照组之外,其余各组均加入50mmol/L葡萄糖培养高糖雪旺细胞模型。采用免疫荧光法检测高糖培养雪旺细胞睫状体神经营养因子(CNTF)的表达,实时荧光定量PCR法检测CNTF-mRNA的表达。结果与正常对照组相比,高糖组、筋脉通组、神经妥乐平组雪旺细胞CNTF及CNTF-mRNA的表达均降低(P<0.01);与高糖组相比,筋脉通组与神经妥乐平组雪旺细胞CNTF及CNTF-mRNA表达均增高(P<0.01);且筋脉通组雪旺细胞CNTF-mRNA表达较神经妥乐平组增高(P<0.05)。结论筋脉通胶囊可以上调高糖培养雪旺细胞CNTF蛋白及其mRNA的表达,从而对糖尿病周围神经病变具有一定的改善作用。 王普艳 梁晓春 张宏 孙连庆 吴群励 屈岭 赵丽关键词:糖尿病周围神经病变 高血糖 雪旺细胞 中药筋脉通对高糖培养雪旺细胞增殖及NGF表达的影响 被引量:29 2009年 目的:从细胞生物学水平观察筋脉通含药血清对高糖培养雪旺细胞(SC)的增殖及其分泌神经生长因子(NGF)的影响。方法:体外培养大鼠SC,采用血清药理学方法制备筋脉通含药血清,观察筋脉通含药血清对高糖培养SC增殖活性的影响,检测筋脉通含药血清对高糖培养SC分泌NGF的影响。结果:高糖培养条件下,SC增殖及分泌NGF的能力明显减弱,筋脉通含药血清可增强高糖培养SC的增殖能力,上调NGF的表达水平,作用与神经妥乐平含药血清相似。结论:中药筋脉通可有效促进高糖环境培养的SC的增殖能力及其分泌NGF的水平。 孙连庆 梁晓春 张宏 吴群励 屈岭 赵丽 顾蓓关键词:雪旺细胞 MTT比色法 共聚焦激光扫描显微镜 筋脉通 中药筋脉通对糖尿病周围神经组织雪旺细胞自噬与凋亡的影响 目的:观察糖尿病周围神经病变时自噬,凋亡的改变及中药筋脉通的干预作用。方法:采用链脲佐菌素腹腔内注射大鼠和体外高浓度葡萄糖细胞培养的方法造模,BielschoWsk y氏改良神经纤维轴索染色和Luxol fast blu... 屈岭 顾蓓 张宏 戴威 高云周 吴群励 石玥 梁晓春关键词:自噬 凋亡 雪旺细胞 筋脉通 文献传递 Effect of Jinmaitong (筋脉通) Serum on the Proliferation of Rat Schwann Cells Cultured in High Glucose Medium 被引量:24 2008年 调查 Jinmaitong 的效果的目的(筋脉通, JMT ) 老鼠 Schwann 房间(SC ) 的增长上的浆液在高葡萄糖媒介首先有教养。方法 SC 在 Dulbecco 的 minmum 必需品媒介( DMEM 控制)主要是有教养的, 50 mmol/L 葡萄糖媒介( 50 mmol/L Glu ), 75 mmol/L 葡萄糖媒介( 75 mmol/L Glu ),以及 50 mmol/L 葡萄糖中等,与 JMT 的不同集中浆液(未经冲淡, 1:2 冲淡了, 1:8 冲淡了)并且 Neurotropin ( Ntp )分别地。在不同条件下面的 SC 的增长被 MTT 检测。结果 SC 在 24 72 h 以内在 DMEM 丰富地成长了,但是在 96 h 慢下来。SC 的增长在 48, 72 和 96 h 的文化以后在 50 mmol/L Glu 和 75 mmol/L Glu 被禁止,它证明两个与控制组(P<0.01 ) 相比是显著地不同的。抑制比在 50 mmol/L Glu (P<0.05 ) 在 75 mmol/L Glu 是更重要的。枪兵的 rho 分析表明 SC 的增长与葡萄糖的集中有否定关联(r=−0.471, P<0.01 ) 。排除时间因素,部分关联显示出类似的结果(r=−0.679, P<0.01 ) 。在 48 h 以后, SC 的增长与 50 mmol/L Glu 相比在 JMT1:2 和 Ntp 显著地增加了(控制 0.437 ± 0 .019, 50 mmol/L Glu 0.367 ± 0 .035, JMT1:2 0.426 ± 0 .024, Ntp 0.422 ± 0 .013;P<0.01 ) ,并且有不,统计上,在 JMT 组, Ntp 组和控制之中的有效差量组织(P>0.05 ) 。SC 的增长在高葡萄糖媒介被禁止的结论,和抑制被 JMT 浆液的不同集中减少,特别在 JMT1:2。 屈岭 梁晓春 张宏 吴群励 孙连庆 顾蓓关键词:SCHWANN细胞 高葡萄糖 筋脉通 中药筋脉通对糖尿病大鼠睫状体神经营养因子表达的影响 被引量:6 2010年 目的 观察中药复方筋脉通对糖尿病大鼠坐骨神经睫状体神经营养因子(CNTF)mRNA和蛋白表达的影响.方法 采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型.将28只糖尿病大鼠按随机数字表法分为模型组(8只)、筋脉通组(10只)和神经妥乐平组(10只),饲养8周形成糖尿病周围神经病变模型后开始灌胃.筋脉通和神经妥乐平组按照成人剂量的10倍灌胃给药(筋脉通0.875 g·kg-1·d-1,神经妥乐平2.67 NU·kg-1·d-1),模型组灌服等量蒸馏水,共16周.检测各组大鼠灌胃前及灌胃4、8、12、16周的体重和血糖变化;并于第16周进行热水甩尾实验、机械痛阈测定,然后取坐骨神经,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测CNTF mRNA的表达,用免疫组化染色法测定CNTF蛋白表达.结果 与模型组相比,筋脉通组和神经妥乐平组血糖、体重在各时间点均无明显差异;与模型组比较,筋脉通组和神经妥乐平组甩尾潜伏期明显缩短[(7.58±6.58) s,(7.41±1.24) s比(11.12±1.79) s]、机械痛阈值明显升高[(14.75±6.58) g,(15.43±6.36) g比(6.92±1.46) g],坐骨神经CNTF的mRNA和蛋白表达明显增加(mRNA:0.030 2±0.010 0,0.026 0±0.005 0比0.006 3±0.003 0,蛋白:14 119.65±5 837.82,13 643.16±5 090.90比11 513.31±4 248.31,P<0.05或P<0.01).而筋脉通组与神经妥乐平组相比均无显著差异.结论 筋脉通能明显增加糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经CNTF的mRNA及蛋白表达. 王普艳 梁晓春 孙连庆 吴群励 屈岭 赵丽关键词:机械痛阈 实时荧光定量聚合酶链反应 筋脉通